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北京百奧創(chuàng)新科技有限公司
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常用于轉染的細胞類型有哪些呢？2023/10/30
轉染是分子生物學和細胞生物學研究的重要技術，它允許我們向細胞引入外源基因，從而進行基因功能研究、基因表達調控，或是進行基因治療等。常用于轉染的細胞類型有哪些呢？一起來了解一下吧！常用于轉染的細胞包括原代細胞、原代細胞衍生物、腫瘤細胞系、幼倉鼠腎細胞（BHK-21）、人胚腎細胞（HEK-293）、人胚肺細胞（HEL）、人肺癌細胞（A549）、人乳腺癌細胞（MCF-7）、人宮頸癌細胞（HeLa）、人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）、大鼠肝細胞、神經元細胞等。人胚胎腎細胞（HEK293）：這種細胞系具有高
基礎液體培養(yǎng)基的常見問題2023/10/25
細胞培養(yǎng)是人工模擬與創(chuàng)造細胞在體內的生存環(huán)境，由此可見培養(yǎng)基成為了細胞在體外正常生長與增值的重要角色，在細胞培養(yǎng)實驗中我們會遇到各種各樣的問題，一起來看一下基礎液體培養(yǎng)基的常見問題有哪些吧？問題一：液體培養(yǎng)基為什么顏色不一樣？答：酚紅加量不同，導致顏色差異：DMEM＞MEM＞DMEM/F12＞RPMI1640＞F12&F10。問題二：培養(yǎng)基放冰箱里顏色變深？答：空氣中CO2濃度低，培養(yǎng)基內CO2會逐漸溢出，HCO3-減少，造成培養(yǎng)基偏堿。問題三：含有谷氨酰an培養(yǎng)基地保存條件？答：谷氨酰an對溫
基礎液體培養(yǎng)基的組分都有哪些？2023/10/25
細胞培養(yǎng)，是人工創(chuàng)造與體內生長相似的環(huán)境，使細胞生長、繁殖并維持主要結構和功能的技術。培養(yǎng)基是一切體外培養(yǎng)的基礎，為細胞的生長和代謝活動提供了各種必需的營養(yǎng)物質。那基礎液體培養(yǎng)基的組分都有哪些呢？水液體細胞培養(yǎng)基中90%以上的成份是水。細胞對水的品質非常敏感，水的品質將直接影響細胞培養(yǎng)的效果。因此，細胞培養(yǎng)用水須經過純化，品質應符合中國藥典注射用水標準或者超純水的標準。能源物質液體培養(yǎng)基的能源物質以葡萄糖為主，少數含有半乳糖、果糖、甘露糖等。根據葡萄糖含量不同區(qū)分，代謝消耗較快的病理狀態(tài)細胞多選
蛋白Marker有多少種？2023/10/24
蛋白Marker：即蛋白分子量標準，是一些已知分子量的蛋白質的混合物，像“尺子”一樣用來指示蛋白質條帶的大小。在聚丙烯酰胺凝膠電泳SDS-PAGE實驗中，蛋白Marker的作用主要是用來指示蛋白條帶所對應的分子量大小，因此準確的判斷靶標分子量的大小，所取得的實驗數據才能被廣泛認可；除此之外，蛋白標準還有表示轉移成功或者蛋白在凝膠上的電泳程度等等的作用，所以選擇正確的蛋白Marker也是Westernblot實驗成功的必要條件之一。那蛋白Marker有多少種？一起來學習一下吧！1.普通未預染蛋白M
Corning基底膜基質Matrigel Matrix的不同選擇2023/10/23
一、什么是基底膜基質基底膜基質，又稱為基底膜基質膠或基底膜提取物（BME），是從Engelbreth-Holm-Swarm（EHS）小鼠肉瘤組織中提取出來的，構建細胞結構、細胞和細胞之間粘附的底物，優(yōu)化細胞作用環(huán)境，模擬體內細胞2D和3D生長情況。屬于商業(yè)性質的富含細胞外基質（ECM）的基質膠，主要成分有巢蛋白、層粘連蛋白、膠原蛋白、硫酸肝素蛋白聚糖等。不同廠家提供的基底膜基質膠成分有所差別，如Corning的基底膜基質膠的主要成分有層粘連蛋白、Ⅳ型膠原、硫酸肝素糖蛋白、巢蛋白，還包含多種生長因
怎么判斷血清的優(yōu)劣呢？2023/10/23
血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因zi后，分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。血清的主要作用是提供基本營養(yǎng)物質，包括激素、維生素、轉運蛋白、微量元素、擴散因子和生長因子等細胞增殖和維持的必需成分，促進細胞生長。那么怎么判斷血清的優(yōu)劣呢？外觀顏色：根據血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現出黃色或紅色，實際上，血紅蛋白含量的高低對血清質量并無直接影響，這個指標的意義在于能體現出采血過程的嚴謹規(guī)范程度。胎牛血清或多或少總有點溶血，因為真正的胎牛血清凝血功能差，紅細胞容
蛋白質不表達的原因有哪些呢？2023/10/23
做蛋白表達實驗的時候，有時候實驗會覺得參考實驗方法和ke隆的蛋白基因序列沒有問題，蛋白電泳就是沒有結果。今天就一起來探討一下蛋白質不表達的原因有哪些呢？1.載體構建錯誤這個屢見不鮮，很多新人經常弄錯讀碼框。比如Qiagen的pQE系列載體，其ke隆位點常有一兩個堿基的區(qū)別；另外有些酶產生粘端有些酶產生平端，這些都容易導致讀碼框錯誤，從而表達不出來。2.宿主菌選擇不當不同的宿主菌其基因型是不一樣的。有些經過特殊修飾的載體，或者特殊用途的載體，或者有特殊啟動子的載體，必須選擇合適的宿主菌進行表達。因
細胞衰老在組織重塑中有什么作用？2023/10/19
衰老是一種增齡伴隨的機體功能衰退的過程，是眾多人類慢性疾病的主要風險因素。抵抗衰老是人類永恒的話題。衰老程序參與了許多需要組織重塑的生理和病理過程，衰老細胞在這些過程中的持續(xù)存在決定了它們的積極或消極的作用：衰老細胞在組織中的短暫積累主要覆蓋了有益的功能，而持續(xù)的衰老似乎會對組織穩(wěn)態(tài)的恢復產生負面影響。那么細胞衰老在組織重塑中有什么作用？一起來學習一下吧！胚胎發(fā)育程序性衰老已被證明在哺乳動物胚胎發(fā)生過程中發(fā)揮了有益的作用。在兩棲動物的發(fā)育過程中，也可以觀察到衰老細胞，它們被轉化生長因子-β（TG
如何選擇蛋白表達系統(tǒng)？2023/10/19
在蛋白表達系統(tǒng)的相關研究中，從頭合成蛋白質并不是一個可行的選擇。因此需要借助活細胞或細胞器用作生產和構建蛋白質的工廠。那么你知道該如何選擇蛋白表達系統(tǒng)嗎？讓我們一起來看看吧！目前，較為主流的表達宿主有大腸桿菌（E.coli）、畢赤酵母（P.pastoris）、昆蟲-桿狀病毒（Bac-to-Bac系統(tǒng)）以及哺乳動物細胞系（CHO、HEK293）等。一、細菌優(yōu)點：1.遺傳背景清楚；2.繁殖快、成本低、抗污染能力強；3.表達量高、表達產物分離純化相對簡單、穩(wěn)定性好；4.商品化的載體和菌株種類非常齊全、
PCR反應污染原因有哪些？2023/10/18
PCR反應的特點是具有較大擴增能力與靈敏性，但令人頭痛的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產生。那么PCR反應污染原因有哪些？一下來學習一下吧！1、標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中，由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散，導致彼此間的污染。2、PCR試劑的污染:主要是由于在PCR試劑配制過程中，由于加樣槍、容器、雙蒸水及其它
標準溶液配制的注意事項有哪些？2023/10/18
標準溶液就是已確定其主體物質濃度或其他量值的溶液。不同的情況需使用不同的標準溶液，可千萬別一概而論。那么標準溶液配制的注意事項有哪些？一起來學習一下吧！1.分析實驗所用的溶液應用純水配制，容器應用純水洗滌三次以上，特殊要求的溶液應事先做純水的空白檢驗。2.溶液要用帶塞的試劑瓶盛裝;見光易分解的溶液要裝于棕色瓶中;揮發(fā)性試劑(如，有機試劑)配制的溶液，瓶塞要嚴密;見空氣易變質及放出腐蝕性氣體的溶液也要蓋緊，長期存放要用蠟封住;濃堿溶液應用塑料瓶裝，如裝在玻璃瓶中，要用橡皮塞塞緊，不能用玻璃磨口塞。
引物純化方式有哪些，如何選擇？2023/10/17
在基因測序和核酸檢測等生物實驗中，引物純化是關鍵的步驟之一，它直接影響著實驗的準確性和成功與否。那么，引物純化方式有哪些，如何選擇？本文將詳細介紹引物純化的方法?！裘擕}寡核苷酸合成后，為了純化寡核苷酸成為天然的DNA結構，首先必須去除保護基團。通過濃lv水處理，合成的寡核苷酸從固相載體上分離，2-氰乙氧基--磷酸二脂鍵的保護基團，以及堿基的保護基團基（苯甲?；彤惗』┍蝗コ瑥亩纬闪颂烊坏腄NA結構。然而，必要的去保護步驟完成后，寡核苷酸混合物還包含幾種必須被去除的小分子有機化合物。所有非必
DNA引物是如何合成的？2023/10/17
DNA引物是如何合成的？目前引物合成基本采用固相亞磷酰胺三酯法。DNA合成儀有很多種,無論采用什么機器合成，合成的原理都相同，主要差別在于合成產率的高低，試劑消耗量的不同和單個循環(huán)用時的多少。亞磷酰胺三酯法合成DNA片段，具有高效、快速的偶聯以及起始反應物比較穩(wěn)定的特點。亞磷酰胺三酯法是將DNA固定在固相載體上完成DNA鏈的合成的，合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的，相鄰的核苷酸通過3′→5′磷酸二酯鍵連接。第一步是將預先連接在固相載體CPG上的活性基團被保護的核苷酸與三氯yi酸反應
ELISA實驗中都有哪些注意事項呢？2023/10/16
ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術。該技術自70年代初問世后迅速應用于生物學和醫(yī)學科學的許多領域。那我們在進行ELISA實驗中都有哪些注意事項呢？1.正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。2.實驗材料的保存比較重要，一般需要注意的點如下：※E
培養(yǎng)的細胞生長緩慢的原因及解決方法都有哪些？2023/10/16
我們在培養(yǎng)細胞的過程中可能會遇到各式各樣的問題，可見細胞的嬌氣程度，本文針對培養(yǎng)的細胞生長緩慢的原因及解決方法都有哪些進行探討，一起來學習一下吧！可能原因1.由于更換不同培養(yǎng)液或血清；2.培養(yǎng)液中一些細胞生長必須成分如谷an酰胺或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞；3.培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；4.試劑保存不當；5.接種細胞起始濃度太低；6.細胞已老化；7.支原體污染。解決方法1.比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清支持細胞生長實驗，讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液；2.換入新鮮配置培養(yǎng)液，或補加
原代細胞培養(yǎng)過程中可能存在哪些問題呢？2023/10/13
細胞培養(yǎng)是生物學和醫(yī)學研究常用的手段之一，可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取組織或器官的一部分進行培養(yǎng)，也稱初代培養(yǎng)。嚴格地說即從體內取出組織接種培養(yǎng)到第一次傳代階段，但實際上，通常把第一代至第十代以內的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。由于培養(yǎng)的細胞剛剛從活體組織分離出來，故更接近于生物體內的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段。原代細胞培養(yǎng)越來越多地用作細胞和分子生物學的主要工具，那么我們在原代細胞培養(yǎng)過程中可能存在哪些問題呢？一起來學習一下吧
基因測序技術的發(fā)展2023/10/13
基因測序是通過對生物體的核酸序列進行檢測，從而在分子和基因層面實現對生物體的進階分析與解讀。對于人類而言，究其根本都含有23對染色體、2.5萬個基因編碼、30億個堿基對組成的bio-data綜合體。測序技術的不斷進步使人類可以破解生命的密碼，是分子生物學迅速發(fā)展的強大推動力之一。近半世紀以來隨著基因測序技術的發(fā)展不斷有所突破，該技術也由初始的一代測序發(fā)展到四代測序，那么接下來一起來學習一下基因測序技術的發(fā)展歷程吧！一代測序一代測序是上世紀70年代由Sanger和Coulson開創(chuàng)的DNA雙脫氧鏈
細胞衰老有什么特征呢？2023/10/12
細胞衰老最基本的特征之一，就是細胞長久地處于細胞周期的阻滯現象或者退出細胞周期。主要發(fā)生在細胞周期的G1期，區(qū)別于G0期停滯的靜止細胞。那細胞衰老有什么特征呢？一起來學習一下吧！在pH為6時，衰老細胞具有較高的衰老相關-β-半乳糖苷酶（SA-β-gall）活性。在衰老細胞中，細胞周期阻滯與細胞周期抑制劑水平的增強相關，包括p16INK4a、p21CIP1和p27。此外，在衰老細胞中可以觀察到p19ARF、p53和PAI-1的表達升高，并被用作各種衰老的生物標志物。此外，與增殖細胞相比，衰老細胞的
如何選擇細胞培養(yǎng)板呢？2023/10/12
細胞培養(yǎng)板是進行細胞培養(yǎng)的重要工具，選擇適合的細胞培養(yǎng)板對于細胞的生長和實驗結果具有重要影響。接下來將介紹我們是如何選擇細胞培養(yǎng)板呢？1.培養(yǎng)板材質：細胞培養(yǎng)板的材質是一個重要的考慮因素。目前市場上主要有塑料和玻璃兩種材質的培養(yǎng)板。塑料培養(yǎng)板價格較低且易于使用，而玻璃培養(yǎng)板具有更好的透明度和耐高溫的特性。根據實驗需要，可以選擇適合的材質。2.表面涂層：細胞培養(yǎng)板的表面涂層可以影響細胞黏附和增殖。常用的涂層包括凝膠體、膠原蛋白、明膠等。例如，凝膠體涂層可以增加細胞對基質的黏附，有助于細胞的生長和擴
在細胞轉染中瞬時轉染與穩(wěn)定轉染有什么區(qū)別？2023/10/10
細胞轉染（Transfection）是指將外源性基因（如DNA、RNA、蛋白質等）導入到細胞內的技術。轉染的目的是產生重組蛋白，或特異性增強或抑制轉染細胞中的基因表達。隨著基因和蛋白功能的深入研究，轉染已經成為科研實驗中常用的技術手段之一。研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質生產等生物學試驗中，其應用越來越廣泛。在實驗過程中根據導入的核酸存在于宿主細胞的時間長短，可以分為瞬時轉染和穩(wěn)定轉染。那么在細胞轉染中瞬時轉染與穩(wěn)定轉染有什么區(qū)別？一起來學習一下吧！瞬時轉染（transienttra
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