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北京百奧創(chuàng)新科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第8年
重點(diǎn)推介:Wako預(yù)制膠SuperSep™ Phos-tag™(195-17991/198-17981)2023/11/17
Phos-tag™是一種能與磷酸離子特異性結(jié)合的功能分子,可與蛋白上的磷酸基團(tuán)結(jié)合。在SDS-PAGE中,在有二價(jià)金屬離子(Mn2+/Zn2+)參與的條件下,磷酸化蛋白與Phos-tag™結(jié)合,電泳遷移速度變慢,從而與非磷酸化蛋白分離。Wako的SuperSep™Phos-tag™是一種即開即用型的預(yù)制膠含有50μmol/L的Phos-tag™丙烯酰胺,含有Zn2+作為金屬離子,保存穩(wěn)定性長(zhǎng)達(dá)半年,得到的條帶整齊。多種規(guī)格型號(hào),適合Bio-rad/LifeTechnolofies/EasySep
RNA和DNA提取實(shí)驗(yàn)中都有哪些問(wèn)題呢?2023/11/17
核酸提取是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中重要的實(shí)驗(yàn)步驟。因?yàn)槲覀冊(cè)诜肿由飳W(xué)中所做的幾乎所有事情在開始都需要DNA或RNA,無(wú)論是qPCR、分子克隆、下一代測(cè)序還是其他任何東西。那么RNA和DNA提取實(shí)驗(yàn)中都有哪些問(wèn)題呢?一起來(lái)學(xué)習(xí)一下吧!1.產(chǎn)量低如果您遇到的DNA/RNA產(chǎn)量低于您對(duì)樣品的預(yù)期,則需要考慮許多因素。通常,這是一個(gè)裂解問(wèn)題。不wan全裂解是產(chǎn)量低的主要原因。它也可能是由不正確的綁定條件引起的。確保使用新鮮的優(yōu)質(zhì)乙醇(100%200標(biāo)準(zhǔn))稀釋緩沖液或添加到結(jié)合的步驟。劣質(zhì)乙醇或舊庫(kù)存可能已經(jīng)吸
重點(diǎn)推介:Meridian可風(fēng)干qPCR/RT-qPCR預(yù)混液(MDX082/MDX095)2023/11/15
可風(fēng)干RT-qPCR和qPCR預(yù)混液是不含甘油,含有優(yōu)化的風(fēng)干輔料,可與風(fēng)干和烘干兼容的預(yù)混液配方。該產(chǎn)品適用于POC診斷平臺(tái)或高通量自動(dòng)化平臺(tái)的多重反應(yīng),可與不同的風(fēng)干方法兼容,制造室溫穩(wěn)定的反應(yīng)混合液。對(duì)痰液樣本中PCR抑制劑有高耐受性將小鼠RNA加入到含有10%、5%或0%痰液樣本的樣品保存液(UTM)中,使用可風(fēng)干一步法RT-qPCR預(yù)混液對(duì)該樣本進(jìn)行擴(kuò)增。結(jié)果顯示,可風(fēng)干一步法RT-qPCR預(yù)混液(MDX095)擴(kuò)增性能良好,對(duì)痰液和樣品保存液中的抑制劑表現(xiàn)出高耐受性。風(fēng)干后酶仍保留完
重點(diǎn)推介:Meridian抗抑性qPCR預(yù)混液(MDX013)2023/11/15
基于對(duì)腫瘤生物標(biāo)志物特定分析的qPCR和RT-qPCR技術(shù)具有較高靈敏度,目前被廣泛用于液體活檢CTC和ctDNA的鑒定。相對(duì)于基因測(cè)序來(lái)說(shuō),PCR技術(shù)更快速、易操作、成本低。然而CTC和ctDNA的分離通常需要新鮮血液樣品或其他能夠立即處理的樣品,并要求短時(shí)間內(nèi)對(duì)其分析,這在某種程度上限制了應(yīng)用。邁迪安公司推出的抗抑性qPCR預(yù)混液(MDX013,MDX016)是開發(fā)檢測(cè)CTC和ctDNA的液體活檢產(chǎn)品的理想選擇。這兩種預(yù)混液可以從血液、尿液或唾液等樣本中直接擴(kuò)增目標(biāo)DNA或RNA。在有抑制劑
重點(diǎn)推介:MedKoo試劑DCG04(CAS314263-42-8)2023/11/15
MedKoo公司的主要業(yè)務(wù)是向全球所有從事抗癌藥物研究開發(fā)的制藥企業(yè),科研機(jī)構(gòu)和院校提供抗癌藥物、抗癌化學(xué)試劑、抗癌藥原料和化學(xué)中間體。MedKoo的目標(biāo)是打造全球規(guī)模大、品種最多、類別全和質(zhì)量好的小分子抗癌化合物庫(kù)。DCG04是甘露糖-6-磷酸受體的多價(jià)配體,用于內(nèi)溶酶體靶向活性探針。DCG-04是一種基于活性的半guang氨酸組織蛋白酶探針,能夠熒光讀取其受體靶向特性。下面讓我們一起來(lái)看看DCG04的產(chǎn)品屬性吧!別名:DCG04;DCG-04;DCG04;CD-892;CD892;CD892
細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)的常見問(wèn)題有哪些?2023/11/15
細(xì)胞侵襲是指研究細(xì)胞穿透和侵入到周圍或?qū)αⅢw組織的能力的實(shí)驗(yàn)。這是一種重要的生物學(xué)過(guò)程,在胚胎發(fā)育、組織修復(fù)和疾病轉(zhuǎn)移等生理和病理過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。那么細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)的常見問(wèn)題有哪些?一起來(lái)學(xué)習(xí)一下吧。細(xì)胞密度選擇不當(dāng)過(guò)高或過(guò)低的細(xì)胞密度會(huì)影響細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果。過(guò)高的細(xì)胞密度會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞聚集在一起,難以穿過(guò)基質(zhì)層,而過(guò)低的細(xì)胞密度則可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)中的細(xì)胞過(guò)于分散,難以形成完整的細(xì)胞層。解決辦法:應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和細(xì)胞類型選擇適當(dāng)?shù)募?xì)胞密度,并在實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行條件優(yōu)化?;|(zhì)濃度選擇不當(dāng)基質(zhì)濃度過(guò)低會(huì)使細(xì)胞
原代細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中可能存在的問(wèn)題有哪些?2023/11/10
細(xì)胞培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取組織或器官的一部分進(jìn)行培養(yǎng),也稱初代培養(yǎng)。嚴(yán)格地說(shuō)即從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到第一次傳代階段,但實(shí)際上,通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。一般持續(xù)1-4周。此期細(xì)胞呈活躍的移動(dòng),可見細(xì)胞分裂,但不旺盛。那么原代細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中可能存在的問(wèn)題有哪些?一起來(lái)學(xué)習(xí)一下吧!污染:轉(zhuǎn)移主要組織進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)需要注意避免污染。pH值變化:這可能是由于培養(yǎng)基中的鹽分不正確,細(xì)菌或真菌污染,碳酸氫鹽緩沖
原代細(xì)胞與細(xì)胞系有什么區(qū)別?2023/11/10
在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,原代細(xì)胞和細(xì)胞系都是常用的實(shí)驗(yàn)工具,但它們之間存在著明顯的區(qū)別。了解原代細(xì)胞與細(xì)胞系有什么區(qū)別對(duì)于進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和研究非常重要。原代細(xì)胞是指從人體或動(dòng)物組織中直接分離出來(lái)的細(xì)胞,具有非常高的活性。這些細(xì)胞通常需要在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行培養(yǎng)和擴(kuò)增,以獲得足夠的數(shù)量用于實(shí)驗(yàn)和研究。由于原代細(xì)胞是直接從組織中分離出來(lái)的,因此它們保留了原始細(xì)胞的特性和功能,可以更好地模擬體內(nèi)環(huán)境。但是,原代細(xì)胞通常只能在有限的時(shí)間內(nèi)保持活性,并且容易受到環(huán)境因素的影響,因此需要進(jìn)行及時(shí)的保存和更新。細(xì)胞系(celll
質(zhì)粒有哪些分類和用途?2023/11/08
質(zhì)粒是在細(xì)菌和其他細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的一種小型、環(huán)狀DNA分子。通常只攜帶少量基因,特別是一些與抗生素耐藥性有關(guān)的基因;另外質(zhì)??梢栽诓煌募?xì)菌細(xì)胞之間傳遞因?yàn)橘|(zhì)粒分子本身具有復(fù)制功能的遺傳結(jié)構(gòu),可攜帶一些遺傳信息,并且其自我復(fù)制能力和攜帶遺傳信息能力非常強(qiáng)大,經(jīng)過(guò)基因表達(dá)后可使其宿主細(xì)胞表現(xiàn)相應(yīng)的性狀,所以質(zhì)粒常被用作基因載體,在分子生物學(xué)、生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)等學(xué)科中得到廣泛的應(yīng)用。那么質(zhì)粒有哪些分類和用途?一起來(lái)學(xué)習(xí)下吧!CloningPlasmids克隆質(zhì)粒:用于促進(jìn)DNA片段的克隆??寺≥d體往
紫外分光光度計(jì)有哪些用途?2023/11/07
紫外分光光度法是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜,來(lái)研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外分光光度計(jì)可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長(zhǎng)的光。紫外分光紫外分光光度計(jì)有哪些用途?一起來(lái)學(xué)習(xí)一下吧!1、檢定物質(zhì)根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是最大吸收波長(zhǎng)λ-max和摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應(yīng)用。在國(guó)內(nèi)外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的最大吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。2、與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃
外泌體純化方法有哪些以及其優(yōu)缺點(diǎn)2023/11/07
外泌體研究自過(guò)去二十年以來(lái)一直是焦點(diǎn)領(lǐng)域。人體內(nèi)多種細(xì)胞在正常以及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,如間充質(zhì)干細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、免疫細(xì)胞等。外泌體與干細(xì)胞有著類似的功能,在組織工程與再生醫(yī)學(xué)方面的臨床前期研究,尤其是干細(xì)胞外泌體。那么一起來(lái)學(xué)習(xí)一下外泌體純化方法有哪些以及其優(yōu)缺點(diǎn)吧!1.超速離心法是常用的外泌體純化手段,也是普遍認(rèn)可的一種方式,采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行,可分離到大小相近的囊泡顆粒。優(yōu)點(diǎn):無(wú)需特殊試劑,操作簡(jiǎn)便,適合大批量樣本。缺點(diǎn):耗時(shí)耗力,純度相對(duì)較低,回收率不
大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞制備及轉(zhuǎn)化中的影響因素有哪些?2023/11/06
大腸桿菌,是一種伴隨我們終生的細(xì)菌,也是生物實(shí)驗(yàn)常用的模式生物。通過(guò)感受態(tài)細(xì)胞的制備和宿主細(xì)胞的轉(zhuǎn)化等操作實(shí)現(xiàn)基因工程改造,大腸桿菌便成為基因工程菌,并造福人類。本期跟隨百奧創(chuàng)新的腳步,讓我們一起來(lái)了解大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞制備及轉(zhuǎn)化中的影響因素有哪些?1.細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)和密度最好從-70℃或-20℃甘油保存的菌種中直接轉(zhuǎn)接用于制備感受態(tài)細(xì)胞的菌液。細(xì)胞生長(zhǎng)密度以每毫升培養(yǎng)液中的細(xì)胞數(shù)在5×107個(gè)左右為佳。即應(yīng)用對(duì)數(shù)期或?qū)?shù)生長(zhǎng)前期的細(xì)菌可通過(guò)測(cè)定培養(yǎng)液的OD600控制。對(duì)TG1菌株OD600為0
免疫共沉淀的實(shí)驗(yàn)流程是怎樣的呢?2023/11/06
WhatisCo-IP?Co-IP全稱Co-Immunoprecipitation,中文學(xué)名免疫共沉淀,是一種以抗體和抗原識(shí)別專一性為基礎(chǔ),用于研究蛋白質(zhì)之間相互作用的經(jīng)典方法。通俗點(diǎn)來(lái)說(shuō),假設(shè)我們需要研究樣品中A蛋白和B蛋白之間是否存在一些相互作用,首先我們通過(guò)合適的方法處理樣本,將蛋白提取出來(lái)(同時(shí)不能破壞蛋白之間的相互作用),然后用預(yù)先結(jié)合了瓊脂糖珠或者磁珠的A蛋白抗體捕獲樣本中的A蛋白,那么與A蛋白結(jié)合的B蛋白也能一起沉淀下來(lái)。再將蛋白從珠子上裂解下來(lái),對(duì)B蛋白進(jìn)行檢測(cè),能檢測(cè)到,說(shuō)明B
引物設(shè)計(jì)要遵循什么原則?2023/11/03
對(duì)于剛接觸分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的小伙伴們來(lái)說(shuō),如果做一些與基因相關(guān)的實(shí)驗(yàn)的話,肯定離不開最基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)——PCR,目前大家使用PCR技術(shù)做的最多的就是對(duì)基因/物種的鑒定、基因的克隆、基因表達(dá)量測(cè)定等實(shí)驗(yàn)。今天百奧創(chuàng)新將介紹PCR引物設(shè)計(jì)要遵循什么原則。1、引物長(zhǎng)度一般在15-30bp。常用的為18-27bp,因?yàn)檫^(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致其延伸溫度大于74℃,不適于TaqDNA聚合酶進(jìn)行反應(yīng);2、引物GC含量一般為40%-60%,45-55%為宜,GC含量過(guò)高或過(guò)低都不利于引發(fā)反應(yīng),上下游引物GC含量和Tm值要保持接近
PCR反應(yīng)準(zhǔn)備工作要怎么做呢?2023/11/03
PCR全稱多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerasechainreaction),是一種非常強(qiáng)大的技術(shù),可以通過(guò)一種非常簡(jiǎn)單但是高效的方法來(lái)復(fù)制DNA,它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制,PCR的最大特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加。那PCR反應(yīng)準(zhǔn)備工作要怎么做呢?1.PCR反應(yīng)體系1.10×擴(kuò)增緩沖液10μl2.4種dNTP混合物(終濃度)各100~250μmol/L3.引物(終濃度)各5~20μmol/L4.模板DNA0.1~2μg5.TaqDNA聚合酶5~10U6.Mg2+(終濃度)1~3mmol
常見的細(xì)胞消化方法有哪些?2023/11/02
我們?cè)诩?xì)胞培養(yǎng)時(shí)大部會(huì)以貼壁的形式生長(zhǎng)(除了取自血、脾或骨髓的細(xì)胞),使用的wan全培養(yǎng)基中的血清,含有許多帶陽(yáng)性電荷的促細(xì)胞附著因子(層黏連蛋白Laminine、纖維鏈接蛋白Fibronectin等胞外基質(zhì)),能幫助細(xì)胞附著于帶陰性電荷的底物上,并形成鍵結(jié)、貼壁伸展。也就是所謂的細(xì)胞消化,常見的細(xì)胞消化方法有哪些?一起來(lái)學(xué)習(xí)一下吧!機(jī)械消化法直接用液體吹打或用刮刀,施予外力讓細(xì)胞與培養(yǎng)底物分離;適用于貼壁性弱的細(xì)胞傳代,但相較于其它消化方法,這種外力無(wú)法量化控制,細(xì)胞分散效果差,且可能會(huì)造成大
如何選擇合適的流式抗體呢?2023/11/01
流式細(xì)胞術(shù)是一種在液流系統(tǒng)中,快速測(cè)定單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞器的生物學(xué)性質(zhì),并把特定的細(xì)胞或細(xì)胞器從群體中加以分類收集的技術(shù)。在細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)胞凋亡研究和免疫學(xué)方面起著非常重要的作用。隨著流式細(xì)胞術(shù)在不斷發(fā)展,流式抗體及熒光標(biāo)記產(chǎn)品的種類、數(shù)量也在不斷增多,加上多色分析實(shí)驗(yàn)方案需求的增長(zhǎng),逐漸產(chǎn)生了抗體難選擇、熒光難搭配等問(wèn)題。那么如何選擇合適的流式抗體呢?1、抗體的選擇流式抗體本身也是抗體,所以選擇流式抗體一定要滿足抗體選擇最基本的條件:目標(biāo)蛋白特異性,反應(yīng)種屬以及應(yīng)用實(shí)驗(yàn)。(1)確定所需檢測(cè)的指標(biāo),
免疫組化非特異性染色的原因及避免方法有哪些呢?2023/11/01
免疫組織化學(xué)技術(shù)是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng),對(duì)組織或細(xì)胞內(nèi)抗原或抗體物質(zhì)定性和定位的組織化學(xué)技術(shù)。組織的非特異性染色的機(jī)理很復(fù)雜,所以控制非特異性背景染色也不容易,非特異性染色的識(shí)別常出現(xiàn)在組織邊緣、膠原纖維及血漿滲出處,壞死組織及固定不良的組織中心處。表現(xiàn)為彌漫性,均勻性的背景染色。也可以是隨機(jī)分布的陽(yáng)性反應(yīng)產(chǎn)物點(diǎn)、團(tuán)或塊狀。免疫組化非特異性染色的原因及避免方法有哪些呢?一起來(lái)學(xué)習(xí)一下吧!1.靜電吸附抗體是一種帶負(fù)電荷的球蛋白,容易和帶正電荷的組織相結(jié)合。在用第一抗體前加制備第二抗體
組織切片有哪些注意事項(xiàng)?2023/10/31
組織切片可以說(shuō)是進(jìn)入一種生物組織微觀世界的門戶,同時(shí)也是醫(yī)學(xué)診斷的得力助手。當(dāng)我們將顯微鏡對(duì)準(zhǔn)組織切片時(shí),微小的世界就會(huì)展現(xiàn)在我們眼前。不同染色下的“組織世界”也呈現(xiàn)出不一樣的色彩,通過(guò)這個(gè)神秘的組織世界,研究者們可以探尋疾病的痕跡和新生組織的規(guī)律。那么組織切片有哪些注意事項(xiàng)?一起來(lái)了解一下吧!組織切片雖然很常規(guī)但仍然是一種與個(gè)人技術(shù)含量相關(guān)的表征技術(shù)。因此,在進(jìn)行組織切片時(shí),有幾個(gè)重要的方面需要注意:1、標(biāo)本獲?。菏紫龋绾斡行Й@取有用的標(biāo)本是后續(xù)處理的重要一步,同時(shí)需要注意采集適當(dāng)?shù)慕M織樣本
免疫組化(IHC)實(shí)驗(yàn)步驟是怎樣的呢?2023/10/31
做實(shí)驗(yàn)時(shí)最基礎(chǔ)的就是深刻的銘記原理,如此在實(shí)驗(yàn)的實(shí)操階段才能真正做到胸有成竹。簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),免疫組化就是一項(xiàng)利用抗原抗體反應(yīng)來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原和對(duì)蛋白定位、定性的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。免疫組化(IHC)實(shí)驗(yàn)步驟是怎樣的呢?一起來(lái)學(xué)習(xí)一下吧!1.脫蠟與水化:將石蠟切片放置于60°烤箱烤片30-60min,這一步是為了使蠟片水分蒸發(fā)和石蠟融化,好讓組織切片牢固地貼在玻片上。而后依次將其放入二甲苯I、II、III各10min,乙醇梯度(高至低:100%、95%、80%、70%)各2min,水洗5min(不要直接對(duì)著
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