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ROS活性氧抑制劑 / ROS清除劑5ml售后服務實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
ROS活性氧抑制劑 / ROS清除劑5ml售后服務注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
PA-1(人卵巢腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
肺大靜脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
IL23R Others Rat 大鼠 IL23R / IL23 Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照)
Molt-4細胞,人T淋巴細胞(白血病CD8+) 小鼠胰腺腺泡細胞癌細胞,MPC-83細胞 人尿道上皮細胞cDNAHUC cDNA
大鼠肺泡巨噬細胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]
CRFK(貓腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0190RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12]
CL-0226SW626(人卵巢癌細胞)5×106cells/瓶×2
FAM19A4 Others Human 人 FAM19A4 / TAFA4 人細胞裂解液 (陽性對照)
人牙齦成纖維細胞cDNAHGF cDNA
豬胚胎傳代細胞;ST 子細胞,SiHa細胞 B22細胞,KM小鼠未分化神經膠質瘤瘤株
Sars結構蛋白表達株;293sars181A
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
EPHB1 Others Mouse 小鼠 EPHB1 / EPHT2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF
NCI-N87 人高分化胃癌細胞
RLF, 大鼠淋巴成纖維細胞
人間充質干細胞-肝
人胚胎,皮膚,肌肉;M-7 人臍帶單核細胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人脫-γ-羧基*原(DCP)免疫試劑盒 Human des-gamma-carboxy-prothrombin,DCP ELISA Kit
植物可溶性糖含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatsolubleFactor-relatedApoptosis,sFAS/Apo-1ELISA試劑盒大鼠可溶性凋亡相關因子(sFAS/Apo-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanintestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISA試劑盒人腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanmyosinlightchainkinase,MLCKELISAKit人肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子肝細胞生長因子(HGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human bromodeoxyuridine (BrdU) ELISA Kit 人溴脫氧核苷*(BrdU)ELISA試劑盒
Humanrheumatoidarthritisassociatednuclearartigen,RANAELISAKit 人抗類風濕關節(jié)炎核抗原抗體(RANA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanepidermalbasementmembranezone,EBMZELISA試劑盒人抗表皮細胞基底膜抗體(EBMZ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織PLK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanPancreaticcarcinomamarkers-CA242ELISAKit人胰腺癌標志物CA242ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
ROS活性氧抑制劑 / ROS清除劑5ml售后服務人白介素27(IL-27)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白介素26(IL-26)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白介素24(IL-24)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白介素23(IL-23)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝