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亞硝酰氫(HNO)檢測試劑盒100T免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
亞硝酰氫(HNO)檢測試劑盒100T免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
NCI-H716(人結(jié)直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
頜下腺上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 人細胞裂解液 (陽性對照)
P3HR1細胞,人EBV陽性B淋巴瘤細胞 大鼠胰腺癌細胞株,DSL-6A/C1細胞 人小腦星形膠質(zhì)細胞cDNAHA-c cDNA
中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24
CoC1(人卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0142LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠氣管上皮細胞;RTE
犬腎細胞;MDCK/IgR
FAM3D Others Mouse 小鼠 FAM3D / Oit1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人前列腺上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
A673細胞,人橫紋癌細胞 肺炎鏈球菌 615小鼠狀肺腺癌瘤株;P615
CCL16 Protein Human 重組人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白 (His 標簽)
MA-782(小鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)
NCSTN Others Mouse 小鼠 Nicastrin / NCSTN 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚胎氣管組織來源細胞;CCC-HBE-2
人膀胱成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
C6細胞,大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 cv-1(非洲綠猴腎細胞) 人癌細胞;MCF 7B
IL8 Protein Human 重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77)
SMMC-7721(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CD320 / 8D6A 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠CD320分子(CD320)ELISA試劑盒 ,英文名: CD320 ELISA Kit
人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA檢測試劑盒Humandeoxypyridinoline,DPDELISAKit 96T/48T
大鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)免疫試劑盒 Rat Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH ELISA kit
CLIAKitforVCL(Humanvinculin)ELISAKit人紐蛋白規(guī)格:48T/96T
免疫組化AP-BCIP/NBT底物顯色試劑盒50次
ELISAKitPGAM2人磷酸甘油酸變位酶2規(guī)格:48T/96T
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human thymosin alpha 1 (Thymosin alpha 1) ELISA Kit 人*α1(Thymosin α1)ELISA試劑盒
Human28SribosomeRNPantibody,28SrRNPELISAKit 人28S抗核糖體抗體(28SrRNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
humaneosinophil-associatedribonucleaseAfamilymember1,EAR1ELISA試劑盒人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員1(EAR1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織PKD2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Humanpara-aminobenzoicacid,PABAELISAKit人對氨基苯甲酸(PABA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
亞硝酰氫(HNO)檢測試劑盒100T免費代測人白細胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白細胞分化抗原40配體(CD40)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白細胞分化抗原40L配體(CD40L)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白細胞分化抗原4(CD4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝