二氧化氮(NO2)檢測試劑盒100T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
二氧化氮(NO2)檢測試劑盒100T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
二氧化氮(NO2)檢測試劑盒100T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
肝動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
ACVR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細胞裂解液 (陽性對照)
Hurt-78細胞,人T細胞淋巴瘤 小鼠胚胎成纖維細胞,3T3-swiss albino細胞 人肺泡上皮細胞cDNAHPAEpiC cDNA
正常大鼠腎細胞;NRK
COS-1(非洲綠猴SV40轉化的腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0174NRK-52E(大鼠腎小管導管上皮細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-2H3
CM-R028大鼠食管平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
FAM3B Others Human 人 FAM3B 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠成年表皮角質(zhì)形成層細胞*培養(yǎng)基 100mL
YAC-1小鼠淋巴瘤細胞 YAC-1 mouse lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
IL17RD Protein Canine 重組狗 IL17RD 蛋白 (His 標簽)
人脈絡絲表皮細胞 (HCPEpiC)( 5×105 ) 人臍帶血單個核細胞 Saos-2,人成骨肉瘤細胞
IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚胎心臟成纖維樣細胞;HEH2
人腎皮層上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
B16-Fo細胞,鼠黑色素瘤細胞系 WI-38(胚肺細胞) 人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)
CCL8 Protein Mouse 重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標簽)
SGC7901(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 HER2 / ErbB2 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人脫氫表雄酮(DHEA)免疫試劑盒 Human Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISA Kit
動植物組織葡萄糖含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatsolubleE-selectin,sE-selectinELISA試劑盒大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin-2receptor,IL-2RELISA試劑盒人白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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兔子睪酮(T)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human androgen receptor (AR) ELISA Kit 人雄激素受體(AR)ELISA試劑盒
Mouseanti-thyroid-globulinantibody,TGABELISAKit 小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanEotaxin1ELISA試劑盒人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織PKG-I激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Humanpancreatickininogenase,PKELISAKit人*(PK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
二氧化氮(NO2)檢測試劑盒100T免費代測人白介素5(IL-5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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