Mallory磷鎢酸蘇木素染色試劑盒(PTAH化學(xué)氧化法)300ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
Mallory磷鎢酸蘇木素染色試劑盒(PTAH化學(xué)氧化法)300ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Mallory磷鎢酸蘇木素染色試劑盒(PTAH化學(xué)氧化法)300ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
Neuro-2a/N2a(小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM9401

REG4 Others Human 人 REG4 / RELP / GISP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

HNE2細(xì)胞，人鼻咽癌細(xì)胞 小鼠淋巴瘤細(xì)胞,Yac-1細(xì)胞 CM-H014人氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

肝細(xì)胞培養(yǎng)基HM-prf

Promocell C-26011 Renal Epithelial Cell GrowthMedium KIT, 腎上皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基套裝 500ml
CM-H017人上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

ICOS Others Rat 大鼠 ICOS / AILIM / CD278 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

NB4細(xì)胞，人急性早幼粒白血病細(xì)胞 綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞,MFC-GFP細(xì)胞 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-sf-prf

MS751(人子宮頸表皮癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

BEL-7402(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R123大鼠角膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人細(xì)胞;Hela
GFRA1 Others Canine 狗 GFRA1 / GFR alpha-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人肺細(xì)胞;HLF-a

恒河猴腎細(xì)胞;MMK3

Ls-174-T細(xì)胞，人結(jié)腸癌細(xì)胞 人黑色素瘤細(xì)胞,SK23細(xì)胞 人細(xì)胞;Hela

HCCC-9810(人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

APP Others Human 人 APP / Protease nexin-II 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠乙酰*轉(zhuǎn)移酶(CHAT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人信號(hào)識(shí)別顆粒抗體(SRP)免疫試劑盒 Human signal recognization particle antibody,SRP ELISA Kit

檸檬酸合酶(CS)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 10管/9樣

Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISA試劑盒大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

humanguanylatenucleotidebindingprotein4,Gbp4ELISA試劑盒人鳥(niǎo)苷酸結(jié)合蛋白4(Gbp4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit人白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat heat shock protein 60 (Hsp-60) ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒

HumanphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit 人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISA試劑盒人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

中量真菌/酵母細(xì)胞基因組DNA純化試劑盒10次

HumanSolubleprotein-100，S-100ELISAKit人S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Mallory磷鎢酸蘇木素染色試劑盒(PTAH化學(xué)氧化法)300ml實(shí)驗(yàn)方法人*α1(Thymosinα1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人*(Thymosin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝