福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
SMC-1(人胸膜瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細胞總RNAHCPEC tRNA
PDGFRB Others Rat 大鼠 PDGFRB / PDGFR-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
MDA-MB-453細胞,人導(dǎo)管癌細胞 鼠細胞系,B82細胞 膀胱平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CL-0305SF-295(人XG惡性膠質(zhì)瘤細胞)5×106cells/瓶×2
HPAEC Pellet 人肺動脈內(nèi)皮細胞團塊 > 1 mio.cells 心肌細胞生長添加物CMGS
人心肌成纖維細胞-心房RNAHCF-aa miRNA5 μg
GOLM1 Others Human 人 GOLM1 / GP73 人細胞裂解液 (陽性對照)
P3X63Ag8 小鼠骨髓瘤細胞
小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(EGFP標記)
小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記)
人胚胎肺成纖維細胞;WI-38 人腸微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細胞裂解液 (陽性對照)
人淋巴內(nèi)皮細胞cDNAHLEC cDNA
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8
Bel-7404細胞,人肝癌細胞 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞 中國倉鼠卵巢細胞;CHO
L1210(小鼠白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-28012 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Different. Medium, 間充質(zhì)干細胞軟骨分化培養(yǎng)基(即用型) 100ml
大鼠溴脫氧核苷*(BrdU)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)免疫試劑盒 Human ICAM-1 ELISA Kit
半胱酸(Cys)含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
Ratoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISA試劑盒大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanICEprotease-activatingfactor,IRAPELISA試劑盒人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanMatrixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human gastric inhibitory polypeptide (GIP) ELISA Kit 人胃抑素(GIP)ELISA試劑盒
Humancomplexedprostatespecificantigen,cPSAELISAKit 人復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanC-ReactiveProtein,CRPELISA試劑盒人C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織CSK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanProtamine1,PRM1ELISAKit人*1(PRM1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法人抗鹽抵抗的酸性磷酸酶(TRAP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗抗體(AsAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗結(jié)核桿菌(TB-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝