caspase-8染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法PA319(人大腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人口腔角質(zhì)細(xì)胞總RNAHOK tRNA
IL1R2 Others Human 人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
MDA-MB-415細(xì)胞,人癌細(xì)胞 鼠胚成纖維細(xì)胞系,STO細(xì)胞 原代成纖維細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml
CL-0334EB-3(人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HDLEC Pellet 人類(lèi)皮膚淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊(少年者) > 1 mio.cells 少突膠質(zhì)前體細(xì)胞生長(zhǎng)添加物OPCGS
caspase-8染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
caspase-8染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
caspase-8染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
MDA-MB-231(ATCC來(lái)源), 人癌細(xì)胞
GPC3 Others Mouse 小鼠 Glypican 3 / GPC3 / OCI-5 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人正常前列腺上皮細(xì)胞;RWPE-1
狗腎細(xì)胞隆突型;MDCK superdome T細(xì)胞,CTLL-2細(xì)胞 RTE細(xì)胞,大鼠氣管上皮細(xì)胞
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]
HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Malaysia/2506/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
LAG3 Others Rat 大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人類(lèi)原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞;UT-7
CM-R026大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
MKN-45細(xì)胞,人低分化胃癌細(xì)胞 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,BE(2)C細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2
CRFK(貓腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CA10 Others Human 人 CA10 / CARPX 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫試劑盒 Human ICAM-3 ELISA Kit
脯酸(PRO)含量測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
Ratovariancancermarker-CA125ELISA試劑盒大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanhypotheticalproteinLOC677340ELISA試劑盒人假定蛋白LOC677340ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanmatrixextracellularphosphoglycoprotein,MEPEELISAKit人細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠15-脂氧合酶(15-LOX)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human Pro gastrin releasing peptide (ProGRP) ELISA Kit 人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)ELISA試劑盒
HumanPentosidineELISAKit 人戊糖素(Pentosidine)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCoxsackievirusIgM,CoxV-IgMELISA試劑盒人柯薩奇病毒IgM(CoxV-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次
Humanproteindisulfide-isomeraseA3,PDIA3ELISAKit人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
caspase-8染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法人抗抗體(AOAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗流行性出血熱病毒抗體IgM(EHF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗流行性出血熱病毒抗體IgG(EHF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗流行性出血熱(EHFAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝