當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化磷酸化系列>> 48T/96TATP含量可見分光光度法檢測試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6549 |
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【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號(hào) |
50管/24樣 | 可見分光光度法 | GOY-01S6549 |
商品介紹
測定意義 ATP廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是生物能量通貨,能荷是描述細(xì)胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。測定ATP含量并且計(jì)算能荷,能夠反映能量代謝狀態(tài)。 測定原理: 肌酸激酶催化肌酸和ATP反應(yīng)生成磷酸肌酸,可在700nm下用磷鉬酸比色法檢測磷酸肌酸含量,以此反應(yīng)ATP含量。 自備儀器和用品: 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
亞鈰八水 99.9% metals basis硫化物標(biāo)準(zhǔn)溶液 100mg/L,溶劑:水Anti-CD3/FITC 熒光素標(biāo)記CD3蛋白抗體IgG
亞鈰,無水 97%硫化物標(biāo)準(zhǔn)溶液 硫離子:50~100µg/mLAnti-CD3/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記CD3抗體IgG
化鎳 CP,98.0% 度范圍:0.038-0.997mg/L,分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-CD3/PE 熒光素PE標(biāo)記CD3抗體IgG
鈮粉 99.95% metals basis,325目水質(zhì)氨氮標(biāo)樣濃度范圍:1.1mg/L,0.5mg/L,2.7mg/LAnti-CD4/FITC 熒光素標(biāo)記CD4蛋白抗體IgG
偏釩酸銀 CP水質(zhì)銅、鉛、鋅、鎘、鎳與鉻混合標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品 Anti-CD4/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記CD4抗體IgG
氧化釤 99.99% metals basis水質(zhì)氟、氯、根與硝酸根混合標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-CD4/PE 熒光素PE標(biāo)記CD4抗體IgG
亞硝酸鈷鈉 AR,Co 13.5~14.5%水質(zhì)氟、氯與根混合標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-CD5/FITC 熒光素標(biāo)記CD5抗體IgG
鋯粉 99.5% metals basis ((不包括鉿)),200 目濃度范圍:0.125-2.22mg/L,分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-CD5L/Api6/FITC 熒光素標(biāo)記CD5L抗體IgG
ATP含量可見分光光度法檢測試劑盒酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml兔抗小鼠IgG-Fc
酚標(biāo)準(zhǔn)溶液1.000g/ml,體:0.02mol/L NaOH溶液兔抗豬IgG
石油類(紅外法)標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑:四化碳兔抗豬IgG抗血清
五標(biāo)準(zhǔn)溶液溶劑:兔抗大鼠IgG抗血清
水質(zhì)pH標(biāo)樣 濃度范圍:4.10-9.18(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品小鼠抗大鼠IgG
水質(zhì)高錳鹽指數(shù)標(biāo)樣 濃度范圍:2.61-5.91(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品兔抗大鼠IgG
水質(zhì)鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液小鼠抗兔IgG
水質(zhì)總標(biāo)樣 濃度范圍:1.000-2.000(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品兔抗小鼠IgG
酚類混合標(biāo)準(zhǔn)溶液每個(gè)品種:1038±19ug/ml,溶劑:兔抗猴IgG
多環(huán)芳烴混合標(biāo)準(zhǔn)溶液溶劑:兔抗大鼠IgM
多聯(lián)(Aroclor 1242)標(biāo)準(zhǔn)溶液小鼠抗兔IgM
多聯(lián)(Aroclor 1254)標(biāo)準(zhǔn)溶液兔抗大鼠IgM抗血清
多聯(lián)(Aroclor 1260)標(biāo)準(zhǔn)溶液羊抗兔IgG抗血清
間二酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑:驢抗兔IgG抗血清
水質(zhì)硒標(biāo)樣 濃度范圍:4.95-20.2(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品羊抗小鼠IgM
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
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