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葉綠體分離和葉綠體酶提取差速離心法

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-04-27 09:38:05瀏覽次數(shù):238次

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科研抗體
科研菌種
生化檢測試劑盒
科研細(xì)胞
貨號 GOY-01S6569
葉綠體分離和葉綠體酶提取差速離心法檢測試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:Lrp2/Megalin 糖蛋白gp330抗體 規(guī)格: 0.2ml
FGFR4/CD334 成纖維細(xì)胞生因子受體4抗體 規(guī)格: 0.1ml
TRA16 睪受體相關(guān)蛋白16抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Vimentin (Ser56) 磷酸化波形蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
MYL3/Myosin light cha

商品介紹

測定意義

線粒體是半自主性細(xì)胞器,不僅是細(xì)胞內(nèi)氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷(ATP)的主要場所,為細(xì)胞的活動提供能量,而且在許多生命活動中具有重要調(diào)控作用。因此,準(zhǔn)確和全面分離保持正常活性的線粒體已經(jīng)成為許多研究的前提。

測定原理:

利用專門試劑溫和勻漿組織和細(xì)胞,再采用差速離心法從勻漿中分離完整線粒體;利用專門試劑,配合超聲波破碎線粒體,可以得到保持活性的線粒體酶。

需自備的儀器和用品:

超聲波破碎儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。

【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

葉綠體分離和葉綠體酶提取差速離心法

50管/48樣

差速離心法

GOY-01S6569


QQ截圖20220307153443.png

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

① 組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取

② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;

2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般

將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。

測定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

Anti-Tubulin- Beta/FITC  熒光素標(biāo)記微管蛋白抗體IgG

Anti-Tubulin- Gamma/FITC  熒光素標(biāo)記微管蛋白-γ抗體IgG

Anti- Beta-Actin/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記β-肌動蛋白(抗體)

Anti-Tuberin/TSC2/FITC  熒光素標(biāo)記馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgG

Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr320) /FITC  熒光素標(biāo)記化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgG

Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1387)/FITC  熒光素標(biāo)記化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgG

Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) /FITC  熒光素標(biāo)記化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgG

Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr1571)/FITC  熒光素標(biāo)記化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgG

葉綠體分離和葉綠體酶提取差速離心法對硝標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.02mg/ml,體:人抗中性粒胞漿抗體(cANCA)IgM 免疫試劑盒C-藻藍(lán)素/藻藍(lán)蛋白/藻青蛋白抗體Phospho-MYPT1/MBS(Ser507)  化肌球蛋白抗體

對硝 GR,99.5%人抗中性粒/中心體抗體(ACA)免疫試劑盒色素P450 1A1抗體Phospho-MYPT1(Thr696)  化肌球蛋白抗體

對硝 分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析人抗增殖核抗原(PCNA)抗體免疫試劑盒絲/蘇氨蛋白質(zhì)激II α抗體Phospho-MYPT1 (Thr853)  化肌球蛋白抗體

2,4-二硝 GR,99%(劇品)人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)免疫試劑盒2號染色體開放閱讀框66抗體Phospho-MYPT1 (Ser668)  化肌球蛋白抗體

愈創(chuàng)木酚  >99.0%(GC)人抗抑制素B抗體(IgG)免疫試劑盒CULLIN抗體phospho-Myosin light chain(Ser20)  化肌球蛋白輕鏈抗體

鄰二 AR,98%人抗異質(zhì)型核糖核蛋白抗體/抗RA33抗體(anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab)免疫試劑盒小牛胸腺DNA抗體phospho-MyoD1(Ser200)  化肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體

鄰二 99%,用于生化研究人抗異亮氨氨酰tRNA連接,質(zhì)(IARS)抗體免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框226抗體phospho-MYL9(Thr19)  化肌球蛋白輕鏈9抗體

香草 AR,99%人抗異亮氨tRNA連接,線粒體(IARS2)抗體免疫試劑盒組織蛋白L抗體phospho-MYL6(Tyr29+Ser30)  化肌球蛋白輕鏈6抗體

1,4-二(反式+順式) 97%人抗胰島素受體抗體(AIRA)免疫試劑盒絲/蘇氨蛋白激II β抗體(casein kinase IIβ)Phospho-MYL(Ser19)  化肌球蛋白輕鏈2抗體

-2--1,4-二 98%人抗胰蛋白(AT)免疫試劑盒角蛋白18抗體phospho-MYF5 (phospho Ser49)  化生肌決定因子Myf5抗體

辛酰 99%人抗眼肌抗體(EMAb)免疫試劑盒轉(zhuǎn)化生長因子β1結(jié)合蛋白抗體Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375)  化µ-型阿片受體抗體

,反-2,4-壬二烯 >85.0%(GC)人抗血小板抗體IgM(PA-IgM)免疫試劑盒22號染色體開放閱讀框45抗體Phospho-mTOR (Tyr144)  化雷帕霉素靶蛋白抗體

間酰 97%人抗血小板抗體IgG(PA-IgG)免疫試劑盒22號染色體開放閱讀框32抗體Phospho-mTOR (Thr2446)   化雷帕霉素靶蛋白抗體

間二酰 99%人抗血小板抗體IgA(PA-IgA)免疫試劑盒CD5L抗體Phospho-mTOR (Ser2481)  化雷帕霉素靶蛋白抗體

對二酰 99%人抗血小板抗體(anti-PA Ab)免疫試劑盒(半定量)CD6抗體Phospho-Mst2(Thr180)  化蛋白激MST2抗體

 


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