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二抗選擇時(shí)需要考慮的因素2025/3/3
?二抗（secondaryantibody）?：直接與靶抗原連接的一抗結(jié)合，通常用于標(biāo)記和檢測一抗。二抗可以是完整抗體或抗體片段，如IgG分子、Fab片段以及F(ab’)2片段。選擇二抗時(shí)需要考慮的因...
凍存細(xì)胞一般過程2025/2/24
凍存細(xì)胞：1、選對數(shù)增生期細(xì)胞(證明無支原體污染)，在凍存前1d換液。2、按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液，計(jì)數(shù)，使細(xì)胞密度達(dá)5×10^7／ml左右密度，離心，去上清。3、加入配制好的凍存液（培養(yǎng)液6....
PCR反應(yīng)上下游引物詮釋2025/2/17
引物（Primer）在聚合作用的起始時(shí)，可以刺激合成另一種大分子，并與反應(yīng)物以共價(jià)鍵形式連接的序列。在核酸化學(xué)中，引物是一段短的單鏈RNA或DNA片段，可結(jié)合在核酸鏈上與之互補(bǔ)的區(qū)域，其功能是作為核苷...
小鼠源細(xì)胞培養(yǎng)基的條件有哪些？2025/2/10
小鼠源細(xì)胞培養(yǎng)基的條件：1、合適的細(xì)胞培養(yǎng)基合適的小鼠源細(xì)胞培養(yǎng)基是體外細(xì)胞生長增殖的重要的條件之一，培養(yǎng)基不僅提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生長增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，而且還提供培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。2、優(yōu)...
有關(guān)ELISA試驗(yàn)保存問題詳述2025/2/5
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）因其操作簡單，靈敏度高，特異性好，經(jīng)濟(jì)安全等特點(diǎn)而在臨床上廣泛應(yīng)用，但是由于其操作步驟復(fù)雜，一般包括試劑準(zhǔn)備，樣本收集，加樣，溫育，洗滌，顯色，比色，結(jié)果判定等，其中任何...
原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞培養(yǎng)之間的差異2025/1/20
一、定義方面：1、原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細(xì)胞進(jìn)行的第1次培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)。2、傳代培養(yǎng)是指需要將培養(yǎng)物分割成小的部分，重新接種到另外的培養(yǎng)器皿（瓶）內(nèi)，再進(jìn)行培養(yǎng)的過程。對單層培養(yǎng)而言，80%...
小鼠細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分離和培養(yǎng)步驟2025/1/13
小鼠細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分離和培養(yǎng)步驟:1.小鼠頸椎脫臼處死后，剃除腹胸部的被毛，放入裝有75%酒精的燒杯中浸泡5min。2.取出小鼠，在無菌環(huán)境下打開胸腔，取出心臟組織，注入盛有無菌1×PBS的培養(yǎng)皿中，洗凈組...
PCR引物設(shè)計(jì)需要遵循原則2025/1/6
PCR引物設(shè)計(jì)需要遵循原則：1、引物的長度一般為15-30bp，常用的是18-27bp，但不應(yīng)大于38，因?yàn)檫^長會導(dǎo)致其延伸溫度大于74℃，不適于TaqDNA聚合酶進(jìn)行反應(yīng)。2、引物序列在模板內(nèi)應(yīng)當(dāng)沒...
抗體特異性的選擇考慮方面2024/12/24
抗體（antibody，Ab）是機(jī)體在體內(nèi)存在的外來分子、微生物等抗原物質(zhì)刺激下，由B淋巴細(xì)胞或記憶細(xì)胞增殖分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白（immunoglobulin...
細(xì)胞產(chǎn)物包含什么？2024/12/17
細(xì)胞產(chǎn)物有：氨基酸、核苷酸、多糖、脂類、維生素、抗生素、毒素、激素、色素等。細(xì)胞產(chǎn)物分為初級代謝產(chǎn)物和次級代謝產(chǎn)物。初級代謝產(chǎn)物有氨基酸、核苷酸、多糖、脂類、維生素等。次級代謝產(chǎn)物有抗生素、毒素、激素...
ELISA各種不同類型的檢測方法2024/12/9
ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。這種測定方法中有3種必要的試劑：1.固相的抗原或抗體；2.酶標(biāo)記的抗原或抗體；3.酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀及檢測的具備條件，可設(shè)計(jì)出各種不同...
細(xì)胞老化如何預(yù)防?2024/12/2
那我們該如何預(yù)防細(xì)胞老化？1.不要等細(xì)胞長得太滿才傳代。細(xì)胞太密會導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)下降，產(chǎn)生細(xì)胞接觸性抑制。2.細(xì)胞不要消化過度。采用yi蛋白酶消化細(xì)胞，會造成細(xì)胞表面一定程度的細(xì)胞損傷。3.最重要的是使...
細(xì)胞傳代技術(shù)實(shí)驗(yàn)原理2024/11/18
細(xì)胞傳代技術(shù)實(shí)驗(yàn)原理：當(dāng)培養(yǎng)的細(xì)胞增殖達(dá)到一定密度后，將會出現(xiàn)密度抑制現(xiàn)象，表現(xiàn)為細(xì)胞的生長和分裂速度逐漸減慢，甚至停止。貼壁細(xì)胞會在培養(yǎng)瓶中長成致密單層(懸浮細(xì)胞會充滿整個體積的培養(yǎng)液)，鋪滿培養(yǎng)瓶...
總蛋白酶活性試劑盒實(shí)驗(yàn)測定步驟2024/11/4
測定步驟：一.加樣1.除包被外都需45度加樣2.加樣體積要準(zhǔn)確3.管底加樣，不能加在管壁上4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡二.溫浴1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。2.各ELISA板...
?核酸檢測試劑盒總RNA提取流程2024/10/28
核酸檢測試劑盒總RNA提?。喝∫旱獌龃婺X組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入試劑，嚴(yán)格按照說明書的流程進(jìn)行。(1)加試劑（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴...
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