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細胞凋亡實驗原理是什么？2025/03/11

細胞凋亡是細胞的一種基本生物學(xué)現(xiàn)象，在多細胞生物去除不需要的或異常的細胞中起著必要的作用。它在生物體的進化、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定以及多個系統(tǒng)的發(fā)育中起著重要的作用。細胞凋亡不僅是一種特殊的細胞死亡類型，而且具有重要的生物學(xué)意義及復(fù)雜的分子生物學(xué)機制。細胞凋亡實驗原理：1、細胞死亡根據(jù)其性質(zhì)、起源及生物學(xué)意義區(qū)分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界，在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細胞在一定生理條件下一系列順序發(fā)生事件的組合，是細胞遵循一定規(guī)律自己結(jié)束生命的自主控制過程。細胞凋亡具有可

實驗室試劑貯存應(yīng)注意什么？2025/03/03

實驗室試劑貯存應(yīng)注意點：一、避光其實在實驗室中很多化學(xué)試劑見強光都極易揮發(fā)變質(zhì)，所以為避免試劑受到光的輻射，應(yīng)采用棕色玻璃瓶，外用黑紙包裹，并貯藏于暗室或遮光的試劑柜中。避光保存適用于能進行光化學(xué)反應(yīng)的試劑，如胺類、酚類、醛類等。二、低溫為了使試劑保持足夠低的溫度。采用水箱保存。低溫貯藏適用于容易失去的生化試劑和容易分解的物質(zhì)。如標準血清應(yīng)貯藏于±4℃的水箱中，而羧肽酶B和羧肽酶Y則應(yīng)貯藏于-20℃的低溫水箱。普通試劑應(yīng)貯藏于溫度較差的陰涼處所。另外勁馬公司主營的ELISA試劑盒的保存應(yīng)在2-8

ELISA試劑盒包被用抗原解析2025/02/24

ELISA試劑盒包被用抗原解析：用于包被固相載體的抗原按其來源不同可分為天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原三大類。天然抗原可取自動物組織、微生物培養(yǎng)物等，須經(jīng)提取純化才能作包被用。如HBsAg可以從攜帶者的血清中提取，一般的細菌和病毒抗原可以從其培養(yǎng)物中提取，蛋白成份抗原可從富含此抗原的材料中提取等（例如AFP從臍帶血或胎肝中提?。?。重組抗原是抗原基因在質(zhì)粒體中表達的蛋白質(zhì)抗原，多以大腸桿菌或酵母菌為質(zhì)粒體。重組抗原的優(yōu)點是除工程菌成份外，其他雜質(zhì)少，而且無傳染性，但純化技術(shù)難度較大。以大腸桿菌為

微生物培養(yǎng)基配置一般過程2025/02/17

培養(yǎng)基(culturemedium)是人工配制的，適合微生物生長、分離鑒別的營養(yǎng)基礎(chǔ)。一般基礎(chǔ)培養(yǎng)基中古有蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、瓊脂等基本營養(yǎng)物質(zhì)。微生物培養(yǎng)基應(yīng)用范圍很廣。例如，無菌試驗培養(yǎng)基可檢查藥品、生物制品是否污染細菌，它直接關(guān)系到人民用藥安全；在臨床及食品衛(wèi)生檢驗中常用選擇、鑒別培養(yǎng)基，此類培養(yǎng)基中根據(jù)用途不同，需要加入抑菌劑、指示劑、血液、糖等試劑，以利于特定細菌的分離與鑒別，需要使細菌大量生長、繁殖的各類培養(yǎng)基；病毒培養(yǎng)及疫苗中則需用組織細胞培養(yǎng)液，主要成分為多種氨基

胎牛血清在細胞培養(yǎng)中的作用2025/02/10

新生牛血清（NewbornCalfSerum，簡稱NBCS）：采自出生一天一周內(nèi)的新生牛；胎牛血清在細胞培養(yǎng)中的作用：1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑，使在細胞傳代時使剩余yi蛋白酶失活，保護

PCR反應(yīng)條件優(yōu)化2025/02/05

1.變性：在第一輪循環(huán)前,在94℃下變性5-10min非常重要,它可使模板DNA全解鏈,然后加入TaqDNA聚合酶(hotstart),這樣可減少聚合酶在低溫下仍有活性從而延伸非特異性配對的引物與模板復(fù)合物所造成的錯誤。變性不全,往往使PCR失敗,因為未變性全的DNA雙鏈會很快復(fù)性,減少DNA產(chǎn)量.一般變性溫度與時間為94℃1min。在變性溫度下,雙鏈DNA解鏈只需幾秒鐘即可全,所耗時間主要是為使反應(yīng)體系全達到適當?shù)臏囟取τ诟缓珿C的序列,可適當提高變性溫度.但變性溫度過高或時間過長都會導(dǎo)致酶

微生物培養(yǎng)基配置過程2025/01/20

培養(yǎng)基(culturemedium)是人工配制的，適合微生物生長、分離鑒別的營養(yǎng)基礎(chǔ)。一般基礎(chǔ)培養(yǎng)基中古有蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、瓊脂等基本營養(yǎng)物質(zhì)。微生物培養(yǎng)基應(yīng)用范圍很廣。例如，無菌試驗培養(yǎng)基可檢查藥品、生物制品是否污染細菌，它直接關(guān)系到人民用藥安全；在臨床及食品衛(wèi)生檢驗中常用選擇、鑒別培養(yǎng)基，此類培養(yǎng)基中根據(jù)用途不同，需要加入抑菌劑、指示劑、血液、糖等試劑，以利于特定細菌的分離與鑒別，需要使細菌大量生長、繁殖的各類培養(yǎng)基；病毒培養(yǎng)及疫苗中則需用組織細胞培養(yǎng)液，主要成分為多種氨基

細胞周期測定操作步驟2025/01/13

細胞周期指細胞一個世代所經(jīng)歷的時間。從一次細胞分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為一個周期。細胞周期反應(yīng)了細胞增殖速度。單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法，但它不能代表細胞群體的周期，故現(xiàn)多采用其他方法測群體周期。測定細胞周期的方法很多，有同位素標記法、細胞計數(shù)法等，這里介紹一種利用BrdU滲入測定細胞周期的方法。BrdU（5-溴脫氧尿mi啶核苷）加入培養(yǎng)基后，可做為細胞DNA復(fù)制的原料，經(jīng)過兩個細胞周期后，細胞中兩條單鏈均含BrdU的DNA將占l/2，反映在染色體上應(yīng)表現(xiàn)為一條單體淺染。如經(jīng)歷了三個

PCR反應(yīng)溫度條件設(shè)置2025/01/06

在PCR自動熱循環(huán)中，最關(guān)鍵的因素是變性與退火的溫度。如操作范例所示，其變性、退火、延伸的條件是：94℃60s,37℃60s,72℃120s，共25～30個循環(huán)，擴增片段500bp。在這里，每一步的時間應(yīng)從反應(yīng)混合液達到所要求的溫度后開始計算。在自動熱循環(huán)儀內(nèi)由混合液原溫度變至所要求溫度的時間需要30～60s，這一遲滯時間的長短取決于幾個因素，包括反應(yīng)管類型、壁厚、反應(yīng)混合液體積、熱源(水浴或加熱塊)以及兩步驟間的溫度差，在設(shè)置熱循環(huán)時應(yīng)充分給以重視和考慮，對每一儀器均應(yīng)進行實測。PCR的過程：

流式細胞術(shù)抗體特異性常見的驗證方法2024/12/24

常見的流式細胞術(shù)抗體特異性驗證方法：1、免疫熒光染色共定位：使用該抗體與已知針對同一細胞結(jié)構(gòu)或分子但標記不同熒光素的另一種抗體同時進行染色。通過觀察兩種熒光信號的共定位情況，如果高度重合，說明該抗體具有較好的特異性。2、競爭抑制實驗：在抗體染色前，先加入過量的未標記的相同抗原，然后再加入標記的抗體進行染色。如果特異性高，過量的未標記抗原會競爭結(jié)合位點，導(dǎo)致標記抗體的結(jié)合減少，熒光信號降低。3、敲除或沉默基因驗證：對于檢測特定基因表達產(chǎn)物的抗體，如果有條件，可以在細胞中敲除或沉默相應(yīng)的基因，然后用

細胞實驗主要內(nèi)容有什么？2024/12/17

細胞實驗是生物學(xué)研究中非常重要的實驗方法之一。通過對細胞的操作、觀察和分析，可以揭示細胞的結(jié)構(gòu)和功能，進而深入了解生命的本質(zhì)。在細胞實驗中，常用的實驗內(nèi)容包括細胞培養(yǎng)、細胞染色、細胞分離和細胞融合等。細胞培養(yǎng)是細胞實驗的基礎(chǔ)，也是最常見的實驗方法之一。它通過將細胞放入培養(yǎng)基中，并提供適當?shù)臓I養(yǎng)條件，使細胞能夠在體外繼續(xù)生長和分裂。細胞培養(yǎng)可以用來研究細胞的生長、增殖、分化以及對外界環(huán)境的響應(yīng)等。常見的細胞培養(yǎng)技術(shù)包括懸浮培養(yǎng)和貼壁培養(yǎng)。細胞染色是用染色劑將細胞中的某些成分染色，從而幫助研究者觀察

酶標記抗體(結(jié)合物)的制備方法2024/12/09

結(jié)合物即酶標記的抗體（或抗原），是ELISA中最關(guān)鍵的試劑。良好的結(jié)合物應(yīng)該是既保有酶的催化活性，也保持了抗體（或抗原）的免疫活性。酶標記抗體的制備方法主要有兩種，即戊2醛交聯(lián)法和過碘酸鹽氧化法。1、戊2醛交聯(lián)法：戊2醛是一種雙功能團試劑，它可以使酶與蛋白質(zhì)的氨基通過它而聯(lián)結(jié)。堿性磷酸一般用此法進行標記。交聯(lián)方法一步法、兩步法兩種。在一步法中戊2醛直接加入酶與抗體的混合物中，反應(yīng)后即得酶標記抗體。ELISA中常用的酶一般都用此法交聯(lián)。它具有操作簡便、有效（結(jié)合率達60%-70%）和重復(fù)性好等優(yōu)點

PCR擴增儀的種類分述2024/11/26

PCR擴增儀的種類總體來說，可以分成兩大類，即普通PCR擴增儀和實時熒光定量PCR擴增儀。一、普通PCR擴增儀1）.普通PCR擴增儀即通常所謂的定性PCR擴增儀。2）.梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴增儀。3）.原位PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶原位擴增功能的基因擴增儀。二、實時熒光定量PCR擴增儀1）.金屬板式實時定量PCR儀，還可作為普通PCR儀使用，有的甚至帶梯度功能，可容納的樣本量大，無需特殊耗材，但溫度均一性欠佳，有邊緣效應(yīng)，標準曲線的反應(yīng)條件難以做到與

ELISA檢測試劑盒競爭法計算方法2024/11/18

在ELISA檢測試劑盒競爭法中，陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強度取決于反應(yīng)中酶結(jié)合物的濃度和加入競爭抑制物的量，一般調(diào)節(jié)陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間，此時反應(yīng)最為敏感。競爭法ELISA不易用自視判斷結(jié)果，因肉眼很難辨別弱陽性反應(yīng)與陰性對照的顯色差異，一般均用比色計測定，讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種，即陽性判定值法和抑制率法。1.陽性判定值法與間接法和夾心法中的陽性判定值法基本相同，ELISA試劑盒但在計算公式中引入陽性對照A值，現(xiàn)舉某種檢測抗HBc的試劑盒為例。試劑盒

微生物菌種如何活化？2024/11/04

菌種活化就是將保藏狀態(tài)的菌種放入適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，逐級擴大培養(yǎng)是為了得到純而壯的培養(yǎng)物，即獲得活力旺盛的、接種數(shù)量足夠的培養(yǎng)物。菌種發(fā)酵有一般需要2-3代的復(fù)壯過程，因為保存時的條件往往和培養(yǎng)時的條件不相同，所以要活化,讓菌種逐漸適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境。要明白菌種活化的情況就需要了解菌種保藏的方式和方法。目前國際國內(nèi)常用的菌種保存方法包括：定期移植法、液體石蠟法、沙土管法、真空冷凍干燥法、80℃冰箱凍結(jié)法、液氮超低溫凍結(jié)法。對于不同的保存方式活化的方式也不同：1、定期移植法的菌種復(fù)蘇較簡單，直接轉(zhuǎn)接即可

聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR）技術(shù)特點歸納2024/10/28

PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈式反應(yīng)(PolymeraseChainReaction)的簡稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng)，能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量，其精確度高達納米級別。聚合酶鏈式反應(yīng)（PolymeraseChainReaction，PCR）是一項利用DNA雙鏈復(fù)制原理，在生物體外復(fù)制特定DNA片段的的核酸合成技術(shù)。技術(shù)特點：1、靈敏度高PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克（pg=10-1

植物生長素(IAA)試劑盒實驗安全性2024/10/21

植物生長素(IAA)試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知待測物質(zhì)濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。植物生長素(IAA)試劑盒實驗安全性：1）避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2）實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3）不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。1）試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。2）實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3）不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批

ELISA試劑盒洗液的使用基本原則2024/10/14

ELISA試劑盒洗液的使用基本原則：A、同一批號的洗液用完了，建議采用同一項目的試劑洗液。B、某一項目的洗液建議使用該試劑盒內(nèi)的洗液。C、同一項目的洗液用完了，建議使用該項目其他廠家的洗液。D、同一試劑盒洗液用完了，建議采用同一批號的洗液。E、同一項目所有廠家都用完了，建議采用同一系列項目的洗液F、不建議國產(chǎn)洗液與進口洗液混用，也更不建議不同系列項目的洗液混用，這兩點都是因為洗液的配置成分不同，特別是不同項目的洗液（正規(guī)試劑廠家），主要組分都不太一樣。

細胞周期同位素標記法測定原理2024/10/09

標記有絲分裂百分率法(PLM)是一種常用的測定細胞周期時間的方法。其原理是對測定細胞進行脈沖標記、定時取材、利用放射自顯影技術(shù)顯示標記細胞，通過統(tǒng)計標記有絲分裂細胞百分數(shù)的辦法來測定細胞周期。測定原理：①待測細胞經(jīng)3H-胸腺嘧啶核苷標記后，所有S期細胞均被標記。②S期細胞經(jīng)G2期才進入M期，所以一段時間內(nèi)PLM=0。③開始出現(xiàn)標記M期細胞時，表示處于S期最后階段的細胞，已渡過G2期，所以從PLM=0到出現(xiàn)PLM的時間間隔為G2期的持續(xù)時間。④S期細胞逐漸進入M期，PLM上升，到達到最高點的時候說

小鼠ELISA定量試劑盒檢測過程操作規(guī)范2024/09/29

小鼠ELISA定量試劑盒檢測過程操作規(guī)范如下：1、要保證移液槍的準確性，誤差不能超過2%?？捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但最好有專業(yè)人員進行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標準品時。3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。4、實驗時，要使底物避光保存。5、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。6、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。7、將液體