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胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)微量法

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  • 型號(hào)
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  • 更新時(shí)間2022-04-24
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限9
  • 實(shí)名認(rèn)證已認(rèn)證
  • 產(chǎn)品數(shù)量9412
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胞漿異檸檬酸脫氫酶ICDHc微量法

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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售,主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司產(chǎn)品。    


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貨號(hào)GOY-01S6355
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胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)微量法 產(chǎn)品詳情

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產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)微量法

100管/96樣

微量法

GOY-01S6355

商品介紹

測(cè)定意義

ICDHcEC 1.1.1.42)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化異檸檬酸脫氫脫羧生成 α-酮戊二酸,同時(shí)還原NADP+生成NADPH。ICDHc是細(xì)胞質(zhì)中除了磷酸戊糖途徑外又一種NADPH重要來源,在逆境中該酶活性通常會(huì)發(fā)生顯著變化。

測(cè)定原理:

利用ICDHc催化NADP+還原成NADPH反應(yīng),在340 nm下測(cè)定NADPH濃度的增加。

所需的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153443.png

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

① 組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取

② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;

2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般

將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。

AR,99.0%β-萘酚 ARNrf2 peptide  核因子2相關(guān)因子2抗原

己二酸 超純級(jí),≥99.5% (HPLC)β-萘酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.5%(GC)NRF-1(nuclear respiratory factor-1)  核呼吸因子-1抗原

 ACS, ≥99.0%β-萘酚 熒光指示劑, ≥99.0% (GCNSE (neuron specific enolase)  神經(jīng)元特異性烯化抗原

AR,99.5% (劇品) Standard for GC,≥99.8% (GC)NTCP(Na+/taurocholate Cotransporting Polypeptide)  鈉離子/?;悄懰峁厕D(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗原

光譜級(jí),≥99.5%(GC)鄰苯二 AR,98%Obestatin/Ghrelin/GHRP  肥胖抑制素抗原

 色譜級(jí),≥99.8%(GC)3-二乙基 99%OCLN(Occluding)  咬合蛋白抗原

乙酸酐 AR,98.5%(易制品)N,N-二甲基正辛 95%Oct-4(Octamer-4)  胚胎干關(guān)鍵蛋白抗原

冰乙酸 AR,99.5%癸 98%ODC(Ornithine decarboxylase)  脫羧抗原

胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)微量法多效唑 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(HPLC)大象雌激素(E)免疫試劑盒三焦抗體GFP  綠色熒光蛋白抗體

多效唑標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,u=2%,溶劑:植物ELISA試劑盒2,3-雙加氧抗體GFP  綠色熒光蛋白(免疫組化用抗體)

多效唑標(biāo)準(zhǔn)溶液10μg/ml,u=2%,溶劑:植物蔗糖合成(SPS)免疫試劑盒白介素19抗體GFOD2  葡萄糖果糖還原2抗體

二戊樂靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%植物玉米素核苷(ZR)免疫試劑盒抑制素A/Inhibin α抗體GFI1B  獨(dú)立生長(zhǎng)因子1B抗體

二戊樂靈標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,u=2%,溶劑:酮植物乙(IAA)免疫試劑盒胰島素因增強(qiáng)結(jié)合蛋白1/2抗體GFAP delta  膠質(zhì)纖維性蛋白GFAPδ抗體

二戊樂靈標(biāo)準(zhǔn)溶液10μg/ml,u=2%,溶劑:酮植物K1(VK1)免疫試劑盒化白介素-1受體相關(guān)激1抗體GFAP  膠質(zhì)纖維性蛋白抗體

猛殺威 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%植物E(VE)免疫試劑盒化白介素-1受體相關(guān)激1抗體GERP/TRIM8/RNF27  環(huán)指蛋白27抗體

咪鮮 分析標(biāo)準(zhǔn)品,95.5%植物3(VD3)免疫試劑盒化白介素-1受體相關(guān)激1抗體Gephyrin  橋尾蛋白抗體

咪鮮標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,u=2%,溶劑:植物2(VD2)免疫試劑盒干擾素調(diào)節(jié)因子3Gentamicin(3G7)  素單克隆抗體

咪鮮標(biāo)準(zhǔn)溶液10μg/ml,u=2%,溶劑:植物(VD)免疫試劑盒化干擾素調(diào)節(jié)因子3Gentamicin  素抗體

嘧霉 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%植物C(VC)免疫試劑盒干擾素調(diào)節(jié)因子7抗體Geminin  DNA復(fù)制抑制因子抗體

甜菜寧 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%植物B6(VB6)免疫試劑盒化干擾素調(diào)節(jié)因子7抗體Gelsolin  凝溶膠蛋白抗體

戊菌隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%植物B12(VB12)免疫試劑盒化胰島素受體底物-1抗體GDPD5  甘油二酯結(jié)構(gòu)域5抗體

嘧肟草 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%植物A(VA)免疫試劑盒化胰島素受體底物-1抗體GDPD3  甘油二酯結(jié)構(gòu)域3抗體

菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=4%,體:正己烷植物茄呢2,葉綠體(SPS2/SPPS)免疫試劑盒化胰島素受體底物-1抗體GDPD2/GDE3  促進(jìn)成骨分化因子抗體

測(cè)定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。


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