測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6365 |
商品介紹
測定意義 細胞內(nèi)脂質(zhì)的積累是脂質(zhì)合成與分解失衡的結(jié)果。脂肪酸合成增多,而氧化分解降低,會導致細胞內(nèi)脂質(zhì)積累。FAS是脂肪酸合成關鍵酶,催化乙酰和丙二酰而生成長鏈脂肪酸。FAS普遍表達于各種組織細胞中,在哺乳動物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達豐富。 測定原理 以NADPH為還原力,FAS催化乙酰CoA和丙二酰CoA生成長鏈脂肪酸;通過測定NADPH的減少量,即可推算出FAS活性。 實驗中所需儀器和用品 研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍和雙蒸水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通常可以使測定正常。
Saccharomyces cerevisiae脯羥化2檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae合成檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae43kDa Tar DNA結(jié)合蛋白檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae芐氯素1檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae褪黑素受體1檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae褪黑素受體2檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae褪黑素受體3檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae褪黑素受體1B檢測試劑盒
脂肪酸合成酶(FAS)微量法檢測試劑盒化鎳 CP,98.0% Anti-PAX5 配對盒因5抗體小鼠凋亡蛋白激活因子(APAF1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
化鎳 anhydrous, 99.99% metals basisAnti-PAX7 配對盒因7抗體小鼠水通道蛋白0(AQP-0)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
肼 AR,98.0%Anti-PAX8 配對盒因8抗體小鼠二級淋巴組織趨化因子(SLC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
苦酮 ARAnti-PAX9 配對盒因9抗體小鼠水通道蛋白1(AQP-1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
CP,99.0%(劇品)Anti-PBK/TOPK PDZ連接激/T-LAK源蛋白激抗體小鼠生長調(diào)節(jié)致癌因γ(GROγ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
GR,99.8%Anti-Phospho-PBK/TOPK (Thr9) 化PDZ連接激/T-LAK源蛋白激抗體小鼠水通道蛋白2(AQP-2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
99.995%Anti-Paxillin 樁蛋白Paxillin抗體小鼠晚期糖化終末產(chǎn)物受體(AGER)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
玫瑰紅 IndicatorAnti-Phospho-Paxillin (Tyr118) 化樁蛋白Paxillin抗體小鼠水通道蛋白3(AQP-3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
過氧化鈉 95%Anti-P-cadherin P-鈣粘附分子抗體小鼠水通道蛋白4(AQP-4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
高鈉 ACS, 99.8-100.3% Anti-R-cadherin R-鈣粘附分子抗體小鼠精氨(Arg)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
亞硝鈷鈉 AR,Co 13.5~14.5%Anti-LI-cadherin 肝腸鈣粘連蛋白抗體小鼠精氨受體1A(AVPR1A)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
偏鋁鈉 ARAnti-PCNA 增殖核抗原抗體小鼠芳香烴受體(AhR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
燒堿石棉 CP,20-30目Anti-PCNA 增殖核抗原抗體小鼠芳香烴受體相互作用蛋白(AIP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
氫鈉 AR(劇品)ANti-PDCD4 凋亡相關蛋白4抗體小鼠芳香烴受體核轉(zhuǎn)位蛋白2(ARNT2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
亞硝鈷鈉 99.995% metals basisAnti-PCNA-Proliferation Marker 增殖核抗原抗體小鼠無唾液糖蛋白受體(ASGR1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒x