含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無(wú)色試劑:內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:標(biāo)記二抗工作液:標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
別 名 Cleavage and polyadenylation specificity factor 30 kDa subunit; CPSF 30 kDa subunit; CPSF30; CPSF4; NAR; NEB1; No arches homolog; NS1 effector domain binding protein 1; CPSF4_RAT.
產(chǎn)品名稱 | 中文名稱 | 貨號(hào) |
Anti-COPS8抗體 | 剪切和多聚腺苷酸化特異性因子4抗體 | GOY-01K64730 |
英文名稱 Anti-COPS8
中文名稱 剪切和多聚腺苷酸化特異性因子4抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 免疫學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 27kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CPSF4/CPSF30
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存條件 Store at -20 °C for one year.
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
安裝步驟與維護(hù)一)一抗稀釋的準(zhǔn)備:
方法1. 實(shí)驗(yàn)前,將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋(或PBS稀釋),將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復(fù)凍溶。
方法2. 實(shí)驗(yàn)前,也可將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預(yù)試驗(yàn)可做幾個(gè)梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個(gè)適合的稀釋比例,再正式做。工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
二)DAB顯色液的制備實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:在1毫升試劑E(DAB 底物液)中,加入1滴(約50微升)試劑D(DAB濃縮液),混合均勻,即配成DAB工作液。此溶液必須現(xiàn)用現(xiàn)配,配好后避光保存,6小時(shí)內(nèi)使用,剩余的液體應(yīng)棄去。標(biāo)本顯色時(shí)間一般為室溫 5~20分鐘,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察顯色的情況,顯色充分后應(yīng)將標(biāo)本及時(shí)脫水封固。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無(wú)色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過(guò)氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時(shí)或4℃過(guò)夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來(lái)水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
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