HDAC廣譜抑制劑(PCI-24781)正在熱銷的產(chǎn)品：ANA(Human nucleolus antibody) ELISA Kit 人抗核仁抗體高氏合成1號瓊脂培養(yǎng) BR
gp210(Human glucoprotein 210) ELISA Kit 人抗核膜糖蛋白210抗體HE瓊脂 BR
LC1(Human liver cytosolantibody type 1) ELISA Kit
中文名稱：HDAC廣譜抑制劑(PCI-24781)
英文名稱：PCI-24781
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10746
產(chǎn)品介紹:
PCI-24781（Abexinostat;CRA024781）是一種新的HDAC廣譜抑制劑，主要靶向HDAC1的Ki值為7nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：783355-60-2 別名：CRA 024781;CRA 24781;Abexinostat 純度：97.94% 分子量：397.42 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
柱孢菌屬p27(抗原)Anti-GCHFR Antibody人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)
Enterobacter sichuanensisP63 腫瘤抑制基因（抗原）Anti-GCLM Antibody人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)
皺折裸胞殼護骨(多肽抗原)Anti-GCNT6 Antibody人幽門螺桿菌相關(guān)基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)
解淀粉芽孢桿菌骨保護蛋白配體(抗原)Anti-GDF15 Antibody人幽門螺桿菌相關(guān)基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)
蘇云金芽胞桿菌增生性瘢痕相關(guān)蛋白（抗原）Anti-GCNT7 Antibody人粘蛋白/粘液7(MUC7)
三葉草根瘤菌多腺二磷多聚抗原Anti-GDF1 Antibody人粘蛋白/粘液7(MUC7)
草假單胞菌內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪（人：N端多肽）、內(nèi)臟脂肪、 又稱：前B克增強因子、內(nèi)肥、腹脂Anti-GDF5 Antibody人轉(zhuǎn)谷酰2C多肽(TGM2)
灰色鏈霉菌內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪Anti-GDF3 Antibody人轉(zhuǎn)谷酰2C多肽(TGM2)
Streptomyces內(nèi)脂/B克增強因子Anti-GDF6 Antibody人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)
蘋果黑腐皮殼菌色上皮源性因子(多肽抗原）Anti-GDF2 Antibody人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)
假單胞菌屬磷脂磷2C（抗原）Anti-GDF7 Antibody人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)
產(chǎn)凍膠菌腸道肽轉(zhuǎn)運蛋白(小肽轉(zhuǎn)運蛋白)多肽Anti-GDI1 Antibody人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)
出芽短梗霉一種腫瘤抑制基因抗原Anti-GFER Antibody人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)
墳?zāi)构?jié)桿菌孕激誘導(dǎo)阻斷因子(抗原)Anti-GDI2 Antibody人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)
根瘤菌piwi 樣1蛋白(抗原)Anti-GFM2 Antibody人粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)
枯草芽孢桿菌過氧化活化增生受體γ（抗原）Anti-GGA1 Antibody人粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)
Saitohin蛋白抗體木霉屬人結(jié)腸癌細(xì)胞
線粒體琥珀脫氫D抗體蠟狀芽孢桿菌人回盲腸癌細(xì)胞
超氧化物歧化4抗體霍氏腸桿菌人慢性髓原白血病細(xì)胞
沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體大腸埃希氏菌人乳腺浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞
HDAC廣譜抑制劑(PCI-24781)大斑凸臍蠕孢 S-芐基-L-半胱白介1受體拮抗劑
枯草芽孢桿枯草亞種 2--6-甲基煙乳清蛋白
葡萄座腔 內(nèi)消旋-2,3-二巰基丁二結(jié)核病
短小芽孢桿 2-噻吩乙β2微球蛋白
菊池鏈格孢 1-（2-）β-乳球蛋白
鏈球(不定種) 2-溴噻唑環(huán)磷腺
大腸埃希氏桿 膽固油酯乳房鏈球
蠟樣芽孢桿 3,5-二苯腫瘤壞死因子γ
羅倫隱球酵母羅倫變種 3-溴-4-甲基噻吩β干擾
谷棒桿 N,N,N',N'',N''-五甲基二乙烯基三細(xì)粒棘球絳蟲抗體
癭青霉 3,4-二苯甲酰β內(nèi)酰
釀酒酵母 哌-2-羧牛血清白蛋白
頂青霉 油酰神經(jīng)元烯化
白靈側(cè)耳 3,5-二甲基異噁唑皮質(zhì)酮;腎上腺酮
干酪乳桿 烯苯S100B蛋白
