操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
MI-773 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | FS-X11087 |
產(chǎn)品介紹:
MI-773是一種MDM2-p53相互作用抑制劑,高親和力結(jié)合到MDM2,Ki為0.88nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):1303607-07-9 純度:98.0% 分子量:562.5 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
腫瘤壞死因子受體超家族成員27抗體 EDA2R
酪蛋白硫suan轉(zhuǎn)移mei2抗體 TPST2
四分子交聯(lián)體14抗體(四旋蛋白) TSPAN14
jia狀腺轉(zhuǎn)錄因子1相關(guān)蛋白26抗體 TAP26/CCDC59
線粒體外膜受體Tom20抗體 TOM20
腫瘤壞死因子配體超家族成員12抗體 TWEAK
睪高表達(dá)蛋白4抗體 THEG4/C1orf223
ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)因子1抗體 Tap1
微管蛋白β3抗體 Tubb3/Tubulin beta 3
腫瘤壞死因子受體超家族成員13B抗體 TNFRSF13B
破傷風(fēng)毒su輕鏈抗體 Tetanus toxin light chain
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白44抗體 TXNDC4
MDM2-p53相互作用抑制劑(MI-773)熒光假單胞 尼亞希木脂
戊糖片球 Nyasicol
解脂亞羅酵母 Neostenine
慶笙紅球 新槐
枯草芽孢桿 Nemoralisin
鮮橙曲霉 N1,N-雙(對(duì)香豆酰)亞精
雅致小克銀漢霉 蠟果楊梅 C
Nocardioides Mulberrofuran G pentaacetate
瓜果腐霉 Mulberrofuran G
木賊鐮孢 Mulberrofuran C
莫格球擬酵母 Methyl isodrimeninol
美澳型核果褐腐病 Methyl demethoxycarbonylchanofru
金孢寄生 Methyl 2-(6-acetyl-5-hydroxy-2,3
雙孢蘑菇 Meridinol
堆形艾美耳球蟲 Marsdenoside F