ALK抑制劑(CH5424802)正在熱銷的產(chǎn)品：TOPO II Alpha/DNA TP II Alpha /FITC 熒光標(biāo)記DNA拓普西異構(gòu)Ⅱ抗體IgGFmoc-N-三苯-L-谷氨酰 95%
TNF- Alpha /RBITC 紅色熒光標(biāo)記腫瘤壞死因子抗體N-alpha-芴氧羰-N-epsilon-叔丁氧羰-L-賴氨 98%
TP53/FITC 熒光標(biāo)記抗腫瘤P53抗體IgGFmoc-
中文名稱：ALK抑制劑(CH5424802)
英文名稱：CH5424802
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號(hào)：FS-X10386
產(chǎn)品介紹:
英文名稱：CH5424802 產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg CH5424802是一種有效的選擇性的ALK抑制劑，IC50為1.9nM。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：1256580-46-7 別名：Alectinib;AF802 純度：99.34% 分子量：482.62 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
雪腐微座孢胞內(nèi)活化的Notch1蛋白抗體Human CD25(Interleukin 2 Receptor Alpha) 高分子量角蛋白(CK-HMW)
發(fā)酵乳桿菌神經(jīng)鈣傳感蛋白1抗體Human CD32(Receptor II for the Fc Fragment of IgG) 高爾基體抗體(AGAA)
毛地黃殼針孢神經(jīng)元鈣結(jié)合相關(guān)蛋白EFCBP1抗體Human GP4(Plaet Membrane Glycoprotein IV) 高爾基蛋白73(GP-73)
彎孢菌膜相關(guān)蛋白樣蛋白NUMBL抗體Human CCDC3(Coiled-coil domain-containing protein 3) 高半胱(Hcy)
匍匐曲霉原變種霉敏感性肽蛋白抗體Human CD40L(Cluster of Differentiation 40 Ligand) 剛地弓形蟲(T.gondii)
金橙黃微小桿菌N-乙基順二酰亞敏感融合蛋白抗體Human CD80(T-lymphocyte activation antigen CD80) 干因子受體(SCFR)
芽孢桿菌NIPAL2蛋白抗體Human CD56(Neural Cell Adhesion Molecule) 干因子/肥大生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)
短波單胞菌屬神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子HNT抗體Human CD13(Aminopeptidase N) 干生長(zhǎng)因子(SCF)
青春雙歧桿菌軸突蛋白1β/Neurexin 1β抗體Human DLL1(Delta-like protein 1) 干擾誘導(dǎo)跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)
匍枝根霉原變種谷受體3A抗體Human E-Cad(E-Cadherin) 干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)
枯草芽孢桿菌谷受體3B抗體Human CRP(C-Reactive Protein) 干擾誘導(dǎo)T趨化因子(ITAC/CXCL11)
藤黃淺藤黃鏈霉菌谷受體3A+3B抗體Human CXCL10(Interferon Gamma Induced Protein 10kDa) 干擾調(diào)節(jié)因子8(IRF8)
雜色曲霉P53誘導(dǎo)凋亡抑制蛋白α抗體Human RAC1(Ras Related C3 Botulinum Toxin SubstRate 1) 干擾調(diào)節(jié)因子3(IRF3)
蘋果黑腐皮殼菌胞質(zhì)5'核1A抗體Human EG-VEGF(Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor) 干擾調(diào)節(jié)因子(IRF)
白地霉NOC2家族樣蛋白抗體Human PI3(Peptidase Inhibitor 3, Skin Derived) 干擾活化基因205(Ifi205)
溜曲霉硝基酪抗體Human GP4(Plaet Membrane Glycoprotein IV) 干擾a-抗體(Anti-IFN-ab)
盧森坦海旋菌Thalassospira│lucentensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR
魯氏不動(dòng)桿菌Acinetobacter│lwoffii 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
ATCC22687=JCM1455=IFO10318=CCRC22069資源名稱: 膜醭畢赤酵母 質(zhì)量規(guī)格：BR,羅氏進(jìn)分
ALK抑制劑(CH5424802)阿克蘇海洋桿 煙酰肼總膽紅
葡萄座腔 原卟啉總膽汁
擬青霉 2,6-二-3-(三氟甲基)吡啶總蛋白
黃孢紫紅菇 3-溴-2-總甲狀腺
棕黑腐質(zhì)霉 4--3-氟甲苯總抗氧化能力
毛腿環(huán)銹傘 三氟甲磺鈣總腺原
球孢白僵 阿曲汀足標(biāo)記蛋白;足盂蛋白
蕈狀芽孢桿 (-)-鹽東莨菪堿阻抑
黑曲霉 4--7-氮雜組脫羧
維及尼鏈霉 甲狀腺鈉 水合物組
曲霉 1,3-二咔唑-9-基苯組-N-甲基轉(zhuǎn)移
四川散斑殼 (S)-1-Cbz-3-氨基吡咯烷鹽鹽組織蛋白K
尖孢鐮刀 戊四唑組織多肽抗原
間型彎孢 4-甲基辛組織激肽釋放
