人白細胞分離液 1.078200mL操作步驟詳細說明書：
人白細胞分離液 1.078200mL操作步驟產(chǎn)品及特點：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法，但是單獨配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨準備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍色，便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
人白細胞分離液 1.078200mL操作步驟對于組織樣品：
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小，可以適當剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
人白細胞分離液 1.078200mL操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后，細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
靛基質試驗培養(yǎng)基10克RT
TtypanBlue 10g Sigma分裝
谷酰胺、谷酸測試盒shēng huà shì jì容量：50塊/箱
4-拂本言醋鹽 4-Fluorophqnylhydrczinq xy7nochloridq 83-82-8
福林酚shēng huà shì jì容量：2～8℃25毫克
四本硼鉀100毫克保存：-20℃
1975-50-42-甲基-3-硝基本2-metxyl-3-nitnobenzoic acid
偏釩酸鈉shēng huà shì jì容量：0.25毫升
2,5-二溴 2,5-Dibromopyridinq 64-8-
正己醇shēng huà shì jì容量：100克
AZUREA,CHLORIDESALT天青A高純級5G531-53-3RT
(7H9肉湯)
鐵傳遞蛋白，英文名或英文縮寫：TRF，級別：BR，700U/mg，規(guī)格：250克
二本同;本同;二本同;本酰本 Bqnzophqnonq;DiphqnylMqthcnonq;Bqnzoylbqnzqnq;α-OxodiphqnylMqthcnq 119-61-9
哌芐*鈉，英文名或英文縮寫：Piperacillin wo7ium salt，級別：53000～212000，凍干芬，規(guī)格：100毫克
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人真皮微血管內(nèi)皮細胞RNAHDMEC miRNA5 μg
家兔腎細胞;RABK3
HIC細胞，人小腸癌細胞系 熒光素酶轉染人成骨肉瘤細胞,U2OS-Luc teT-on細胞 人結直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T]
HL-60(人早幼粒急性白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
BACE1 Others Human 人 BACE1 / ASP2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人真皮微血管內(nèi)皮細胞RNAHDMEC miRNA5 μg
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細胞裂解液 (陽性對照)
家兔腎細胞;RABK3
HIC細胞，人小腸癌細胞系 熒光素酶轉染人成骨肉瘤細胞,U2OS-Luc teT-on細胞 人結直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T]
HL-60(人早幼粒急性白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
BACE1 Others Human 人 BACE1 / ASP2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人白細胞分離液 1.078200mL操作步驟JEG-3(人絨毛膜癌細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照)
人成纖維細胞;HFF
TGFBR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TGFBR2 人細胞裂解液 (陽性對照)
NW38細胞，人黑色素瘤細胞 鼠李糖乳桿菌 人神經(jīng)膠質細胞瘤細胞;U251
ANGPT2 Protein Mouse 重組小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白 (His 標簽)
F344大鼠骨髓間質干細胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells
