* 1.077200mL圖片對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
* 1.077200mL圖片產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式,即開即用,用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實(shí)驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗。
* 1.077200mL圖片詳細(xì)說明書:
* 1.077200mL圖片對于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂100克
TTC 5g/10g/25g/100g原裝 Amresco 0765
寡霉素shēng huà shì jì容量:1公斤
4-?;狙趸?/span> 4-Formylphqnoxyccqtic ccid 04-71-3
改良Y培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:RT10克
四草酸鉀250毫克保存:-20℃
67-72-1六錄乙烷;全錄乙烷;六錄化碳;過錄乙烷;六錄化二碳Hexachloroethane;Carbon hexachloride
乙醛脫氫酶100毫克2~8℃,避光
2-基-5- 2-Amino-5-chloropyridine,98% 1072-98-6 25G 通用試劑
固紫B/固紫B鹽/耐曬紫B鹽/固紫羅蘭B鹽/堅牢紫B鹽/重氮堅牢紫B/Fast Violet B Salt BR,98% 1克 國產(chǎn)/進(jìn)口
Azoviolet對硝基本偶氮間本二酚5毫克BR,90%
77301-42-9DL-6-甲氧基-α-甲基-2-DL-6-metxOXY-ALPHA-metxYL-2-metxANOL
PolyacrylicresinⅢ卡波樹脂1克AR,98%
1-芐基 1-Benzylpiper 2759-28-6 25G 通用試劑
檸檬酸三銨 Ammonium citrate tribasic (anhydrous, ... 3458-72-8 100G 通用試劑
PDK1 Others Human 人 PDK-1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞-HDMEC-a
狗腎細(xì)胞;Super Tube
CTLL-2細(xì)胞,T細(xì)胞 人胰腺癌細(xì)胞,JF-305細(xì)胞 CM-M016小鼠胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠骨髓瘤細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.3
ACVR2B Others Human 人 ACVR2B / ActivinR-IIB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞-HDMEC-a
PDK1 Others Human 人 PDK-1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
狗腎細(xì)胞;Super Tube
CTLL-2細(xì)胞,T細(xì)胞 人胰腺癌細(xì)胞,JF-305細(xì)胞 CM-M016小鼠胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠骨髓瘤細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.3
ACVR2B Others Human 人 ACVR2B / ActivinR-IIB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
* 1.077200mL圖片IBRS-2(豬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Caki-1, 人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞 人骨肉瘤細(xì)胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]
人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38]
TMEM27 Others Human 人 TMEM27 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
HME2細(xì)胞,人黑色素瘤細(xì)胞 干酪乳桿菌干酪亞種 人癌細(xì)胞;MCF7
USMC(大鼠血管平滑肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
F344大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells