* 1.075200mL說明書詳細(xì)說明書:
* 1.075200mL說明書產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1. 一站式,即開即用,用戶不需單獨準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
* 1.075200mL說明書對于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
* 1.075200mL說明書對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
5-胞苷三嶙酸三鈉鹽shēng huà shì jì容量:5克
(胰蛋白示肉湯)
BGS瓊脂25克RT
4-酰本硼醋 4-Formylphqnylboronic ccid 87199-17-2
四本硼鈉25克
四草酸鉀shēng huà shì jì容量:保存:-20℃250毫克
UV-327(進(jìn)分)NA
5-溴-4錄-3-吲哚-β-D-半乳糖苷1公斤
氧化* Oxysophoridine,98% 54809-74-4 1G 通用試劑
亞油醋標(biāo)準(zhǔn)液(+4℃) Linolqic ccid 60-33-3
Azophloxine偶氮熒光桃紅100克IND
100-39-0溴化芐;芐基溴;α-溴Benzyl broMide;ω-BroMotolue
PIPESsesquiwo7iumsalt1,4-二乙磺酸倍半鈉鹽100克AR
苯基溴化 Phenyl Bromide 100-58-3 100ML 通用試劑
4-基苯甲酯 Methyl 4-aminobenzoate (98%) 619-45-4 25G 基酸
TNFSF13B Others Cynomolgus 食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞-HDMEC
犬腎細(xì)胞系/IgR;MDCK/IgR
95-D細(xì)胞,人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 轉(zhuǎn)血小板基因倉鼠卵巢細(xì)胞,CHO-pt細(xì)胞 CM-M018小鼠頜下腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
SCaBER(人膀胱鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Gibco 17001-074 TM-C100 Basal Medium,liquid 450ml
人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞-HDMEC
TNFSF13B Others Cynomolgus 食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
犬腎細(xì)胞系/IgR;MDCK/IgR
95-D細(xì)胞,人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 轉(zhuǎn)血小板基因倉鼠卵巢細(xì)胞,CHO-pt細(xì)胞 CM-M018小鼠頜下腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
SCaBER(人膀胱鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Gibco 17001-074 TM-C100 Basal Medium,liquid 450ml
* 1.075200mL說明書EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0905 胎兒真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基MSCM-acf
FCGR2A Others Cynomolgus 食蟹猴 CD32a / FCGR2A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CM-M046小鼠腸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系
F81 貓腎細(xì)胞