當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 多功能氧化酶(MFO)可見分光光度法
貨號 | GOY-01S6475 |
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商品介紹
測定意義 多功能氧化酶又稱混合功能氧化酶,可產(chǎn)生降解反應(yīng),可使原化學(xué)物質(zhì)變?yōu)榈投镜幕驘o毒的物質(zhì)從體內(nèi)排出;還可產(chǎn)生激活反應(yīng),可使原化學(xué)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為具有親電子性質(zhì),導(dǎo)致毒性增強,成為致突變物或終致癌物。近年來對混合功能氧化酶系與外源性化學(xué)物質(zhì)相互作用的深入研究,對于從分子生物學(xué)水平上進一步了解外源性化學(xué)物質(zhì)的毒作用具有重要意義。 測定原理: MFO催化對硝基苯甲醚產(chǎn)生對硝基,在405nm下有特征吸光值。 自備用品: 分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
50管/48樣 | 可見分光光度法 | GOY-01S6475 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
測定步驟:
1、 酶標儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
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多功能氧化酶(MFO)可見分光光度法2,4,6-三溴酚 98%Anti-PTTG/FITC 熒光素標記垂體腫瘤轉(zhuǎn)化因抗體IgG豬B因子(BF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
1,2,4-三氮唑-3-羧酯 99%Anti-Raptor /FITC 熒光素標記mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體IgG豬增殖相關(guān)蛋白2G4 (PA2G4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
鈷 98%Anti-Rad17/FITC 熒光素標記周期檢控Rad17蛋白抗體IgG豬腫瘤特異性移植抗原(TSTA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
氧乙酯 99%Anti-Phospho-Rad17 (Ser645) /FITC 熒光素標記化周期檢控Rad17蛋白抗體IgG豬3-硝酪氨(3-NT)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
納他霉素 ≥95% (HPLC)Anti-Rad51/FITC 熒光素標記Rad51抗體IgG豬粒集落激因子(CSF3/GCSF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
L-羥鈷素 96%Anti-Rad52/FITC 熒光素標記Rad52抗體IgG豬膠質(zhì)系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
B12 98%Anti-RAD51C/FITC 熒光素標記癌和卵巢癌易感因RAD51C抗體IgG豬因子受體(EGFR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
鈷 分析標準品Anti-RAM-11/FITC 熒光素標記抗RAM-11抗體IgG豬骨成型蛋白3(BMP-3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
B12 用于培養(yǎng)和昆蟲培養(yǎng)Anti-RAMP-1/FITC 熒光素標記受體活性調(diào)制蛋白1抗體IgG豬甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨蛋白(MASP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
2-(2-溴乙)四氫-2H- 96%anti-RAP1A/FITC 熒光素標記抗Rap1抗體IgG豬酰硫氨(fMet)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
2-氨-1,3- 98%Anti-RAR- Alpha /FITC 熒光素標記維受體-α 抗體IgG豬巨噬移動抑制因子(MIF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
溴硅烷, 含穩(wěn)定劑銅, 98%Anti-RAR- Beta /FITC 熒光素標記維受體-β抗體IgG豬多配體聚糖1(SDC1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
六二硅烷 98%Anti-Phospho-Raptor (Ser792) /FITC 熒光素標記化mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體IgG豬核糖核(RNASE)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
硅烷 97%Anti-RASSF1A/FITC 熒光素標記Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體IgG豬血管緊張素II受體1(ANG II R1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
硅烷 90%Anti-RASGRF1/FITC 熒光素標記Ras特異性核苷釋放因子1抗體IgG豬泛素蛋白D(UBD)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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