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測定意義

TH位于線粒體的內(nèi)膜上，又稱為線粒體復合體六，催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互轉(zhuǎn)化，調(diào)節(jié)線粒體NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反應稱為TH-2，催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。

測定原理：

NADH和NADPH均在340nm有特征吸收，因此TH催化的轉(zhuǎn)氫反應不能導致340nm吸光度發(fā)生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸（APAD+）替代NAD+，TH-2催化APAD+還原生成APADH，APADH在375nm有特征光吸收，測定375nm光吸收的增加速率，來計算TH-2活性。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

實驗方法學：

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

非受體蛋白激2抗體Anti-HIF3A AntibodyYAC-1（小鼠瘤）圖片

腫瘤壞死因子α誘導蛋白5Anti-HIF1A Antibody(原貨號PB0245)EB-3（人Burkitt瘤）圖片

腫瘤壞死因子CAnti-HIF3A AntibodyA3（人T白血?。┢放?/span>

轉(zhuǎn)化生長因子β4抗體Anti-Histidine decarboxylase/HDC AntibodyTE-13（人食管癌）價格

轉(zhuǎn)化生長因子β活化激結合蛋白1抗體Anti-HK1 AntibodyHCCLM3（人高轉(zhuǎn)移肝癌）圖片

硫氧還蛋白結合蛋白2抗體Anti-HK2 AntibodyC918（人眼脈絡黑色素瘤）品牌

MAPK調(diào)控蛋白TRB2抗體Anti-HINT1 AntibodySK-Hep-1（人肝癌）圖片

ATP結合轉(zhuǎn)運因子2抗體Anti-HLA-A Antibody(原貨號PB0407)RM-1（小鼠前列腺癌）圖片

轉(zhuǎn)氫酶2紫外分光光度法檢測試劑盒G鈉 1650 U/mg LRRC59蛋白抗體Dog IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗犬IgM抗體

D-青霉  99%LRRC41蛋白抗體Dog IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗犬IgM抗體

2-過氧化丁酮 >52%(GC)促黃體生成素受體抗體Dog IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的兔抗犬IgM抗體

2-過氧化丁酮 CP清蛋白α抗體Dog IgM  兔抗犬IgM抗體

鄰二二乙酯 AR,99.5%核纖層蛋白B2抗體DOCK1  質(zhì)分裂付出蛋白1抗體

草酰二 98%層粘蛋白α5抗體DNPK1  DNA依賴蛋白激催化亞抗體

高嶺土 醫(yī)藥級L-瓜氨抗體Dnmt3a  DNA轉(zhuǎn)移-3α抗體

(R)-(-)-3--1,2- 97%泌升高蛋白1抗體Dnmt3 Beta  DNA轉(zhuǎn)移-3β抗體

(R)-(+)-縮水甘油 98%溶體相關膜蛋白4α抗體Dnmt1  DNA轉(zhuǎn)移1抗體

(R)-(+)-縮水甘油 98%分化相關因14抗體DNMBP  動力結合蛋白DNMBP抗體

(S)-縮水甘油 97%β內(nèi)酰樣蛋白2抗體DNM1L  發(fā)動蛋白樣相關蛋白1抗體

硫安普霉素 分析標準品神經(jīng)突觸粘附樣分子4抗體DNase II  脫氧核糖核2抗體

硫安普霉素 95%可溶性半糖凝集素3結合蛋白抗體DNase I  脫氧核糖核1抗體

伊維茵素 97%瘦素抗體DNase gamma  脫氧核糖核γ抗體

磺 99%脂酯LPIN1抗體DNAPK/PRKDC  DNA依賴蛋白激催化亞抗體

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。