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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氮代謝系列>> 亞硝酸還原酶(NiR)可見分光光度法
貨號(hào) | GOY-01S6481 |
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商品介紹
測(cè)定意義 硝酸還原酶(NiR)是一類能催化亞硝酸鹽還原的酶,廣泛存在于微生物及植物體內(nèi),是自然界氮循環(huán)過程中的關(guān)鍵酶,可以將亞硝酸鹽降解為NO或NH3,從而減少環(huán)境中亞硝態(tài)氮的積累,降低因亞硝酸鹽累積而造成的對(duì)生物體的毒害作用。 測(cè)定原理 亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO,使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2—減少,即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)亞硝酸還原酶的活性。 需自備的儀器和用品 天平、研缽、可見分光光度計(jì)、水浴鍋、低溫離心機(jī)、1mL玻璃比色皿。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
50管/24樣 | 可見分光光度法 | GOY-01S6481 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
乙二四乙酸鐵鈉 CP,98%甲基烯酸異辛酯 99%Anti-IGFBP-4/IBP4/FITC 熒光素標(biāo)記胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-4抗體IgG
乙二四乙酸鐵鈉 13.5-18.5% Fe basis甲基烯酰氧乙基基氯化銨 75 wt. % in H2OAnti-IGFBP-5/IBP5 /FITC 熒光素標(biāo)記胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-5抗體IgG
乙二四乙酸二鈉鎂 98%鋯粉 99.95% metals basis ((不包括鉿))Anti-IGSF8/CD3/FITC 熒光素標(biāo)記球蛋超家族成員8抗體IgG
碳酸乙烯酯 98.0%鋯粉 99.5% metals basis ((不包括鉿)),200 目Anti-IKB Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記KB抑制蛋白α抗體IgG
碳酸乙烯酯 99%偶氮二異戊 98%Anti-IKB alpha(phospho S32 + S36)/FITC 熒光素標(biāo)記化KB抑制蛋白α抗體IgG
曙紅Y,溶 AR2,4-二羥基二苯甲酮 99%Anti-IKB Beta/FITC 熒光素標(biāo)記KB抑制蛋白β抗體IgG
曙紅Y,溶 Biological stain2-羥基-4-甲氧基-5-磺酸二苯甲酮 98%Anti-phospho-IkB beta (Ser23)/FITC 熒光素標(biāo)記化KB抑制蛋白β抗體IgG
曙紅Y,溶 95%2-羥基-4-正辛氧基二苯甲酮 99%Anti-IL-1 Alpha /FITC 熒光素標(biāo)記白介素1α抗體IgG
亞硝酸還原酶(NiR)可見分光光度法升麻素苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98% Anti-GIP/FITC 熒光素標(biāo)記胃泌素抑制肽抗體IgG大鼠纖(FG)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
血根堿 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98% (HPLC)Anti-TNFRSF18/FITC 熒光素標(biāo)記糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體抗體IgG大鼠甘露糖受體C1(MRC1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
血根堿 ≥98% (HPLC)Anti-GIG8/ID2/FITC 熒光素標(biāo)記DNA結(jié)合抑制因子2抗體IgG大鼠脂酰乙N-轉(zhuǎn)移(PEMT)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
柴胡皂苷C 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%Anti-Glasses Snake poison Protein/FITC 熒光素標(biāo)記抗眼鏡蛇蛇蛋白抗體(眼鏡蛇)IgG大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
五味子乙 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98% Anti-GLI1/FITC 熒光素標(biāo)記下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗體IgG大鼠低密度脂蛋白(VLDL)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
柴胡皂苷A 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%Anti-GLP-1(7-36)/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗胰高血糖素樣肽-1抗體IgG大鼠山梨脫氫(SDH)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
柴胡皂苷D 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%Anti-GLP-1/KG-31 /FITC 熒光素標(biāo)記胰高血糖素樣肽-1抗體IgG大鼠原片段F1+2(F1+2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
五味子素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98% Anti-GLP-2/FITC 熒光素標(biāo)記胰高血糖素樣肽-2抗體IgG大鼠血管舒張劑激活蛋白(VASP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
斯皮諾素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%Anti-GLP-2/FITC 熒光素標(biāo)記胰高血糖素樣肽-2抗體IgG大鼠DNA轉(zhuǎn)移3A(DNMT3A)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
五味子乙素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%Anti-Glu-Glu Tag/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗Glu-Glu Tag標(biāo)簽抗體IgG大鼠血管粘附蛋白1(VAP-1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
五味子 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98% Anti-GLUR2/FITC 熒光素標(biāo)記谷氨受體2抗體IgG大鼠載脂蛋白A1 (ApoA1) 聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
五味子酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98% Anti-GLUR3/FITC 熒光素標(biāo)記谷氨受體3抗體IgG大鼠異檸檬脫氫 (ICD) 聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
五味子素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%Anti-GLUR4/FITC 熒光素標(biāo)記谷氨受體4抗體IgG大鼠α酮戊二脫氫 (α-KGDHC) 聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
延胡索乙素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>97%Anti-GLP-1R/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗胰高血糖素樣肽-1受體抗體IgG大鼠NADH脫氫1 (ND1) 聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
延胡索乙素 97%Anti-GLUT1/FITC 熒光素標(biāo)記葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體IgG大鼠6-果糖激 (6-PFK)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
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