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貨號 | GOY-01S6488 |
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選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 100管/96樣 |
檢測方法 | 微量法 |
貨號 | GOY-01S6488 |
商品介紹:
測定意義
NO(Nitric Oxide,NO)廣泛分布于生物體內(nèi)神經(jīng)、循環(huán)、呼吸、消化、泌尿生殖等系統(tǒng)中,特別是神經(jīng)組織中較豐富。它作為細胞間及細胞內(nèi)的信息物質(zhì),發(fā)揮信號傳遞的作用,是一種新型的生物信使分子,在機體的生理、病理過程中起著重要的作用。
測定原理:
NO在體內(nèi)或水溶液中極易氧化生成NO2—,在酸性條件下,NO2—與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物,進一步與萘基乙烯基二胺偶合,產(chǎn)物在550nm處有特征吸收峰,測定其吸光值,可以計算NO含量。為了排除樣品色素等的影響,每個樣品需做對照管。
自備實驗用品及儀器:
天平、研缽或勻漿器、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
實驗方法學:
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
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NO含量微量法檢測試劑盒霧化鎳粉 99.8%,200目Podoplanin Protein 平足蛋白抗原猴紅膜蛋白(EMP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
錫 AR,100目Pokemon (POK Erythroid Myeloid Ontogenic factor) “撲克蒙"蛋白又稱“波克曼"蛋白猴瘦素(LEP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
AR, ≥99.5%Polycystin 1(Polycystic Kidney Disease 1) 多囊腎蛋白1抗原猴過氧化還原2(PRDX2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
AR,99%Polycystin 2(polycystic kidney disease 2) 多囊腎蛋白2抗體猴谷氨脫羧2(GAD2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
for HPLC, ≥99.5%phospho-AKT1/PKB1/2/3(pThr473)peptide 化蛋白激B抗原(絲氨化位點:473)猴心肌鈣黏蛋白(H-Cadherin)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
鄰二 for HPLC,99%RKIP(Raf kinase inhibitor protein) Raf激抑制蛋白抗原猴硒蛋白1(SEP1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
海因 98%pre-X protein[Hepatitis B virus]N-Terminus 乙肝病pre-X蛋白抗原(N端)猴Toll樣受體9(TLR9/CD289)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
吩惡 98%pre-X protein(CT)[Hepatitis B virus C-Terminus] 乙肝病pre-X蛋白抗原(C端)猴金屬硫蛋白1 (MT1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
氧化亞銅 AR,95.0%PHD3 (Egln3; HIF-prolyl hydroxylase 3) 脯氨羥化(多肽)猴脂聯(lián)素受體2(ADIPOR2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
氧化亞銅 CP,90.0%ADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 ) 新型金屬質(zhì)蛋白(抗原)猴血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
氧化亞銅 99%Adiponectin 脂聯(lián)素(多肽片斷抗原)猴胰多肽(PP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
2,4-二酚 >98.0%(GC)Adipo R1(adiponectin receptor 1) 脂聯(lián)素受體-1(抗原)猴核孔蛋白98kda(NUP98)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
2,6-二酚 AR,99.0%Adipo R2(adiponectin receptor 2) 脂聯(lián)素受體-2(抗原)猴糖化白蛋白(GA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
2,4-二氧乙 97%PSAP/PAP peptide 前列腺性抗原猴肌-3-激2α肽(PI3K2α)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
2,4-二氧乙鈉 98%PSAP/PAP peptide (human) 前列腺性抗原(人)猴抗狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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