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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氮代謝系列>> 食品中亞硝酸鹽含量微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6492 |
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商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 100管/96樣 |
檢測(cè)方法 | 微量法 |
貨號(hào) | GOY-01S6492 |
商品介紹:
測(cè)定意義
在食品中,亞硝酸鹽可與肉品中的肌紅素結(jié)合而更安定,在食品加工業(yè)中作為保色劑,以維持肉制品的良好外觀,并防止肉毒梭狀芽孢桿菌的產(chǎn)生,提高食用肉制品的安全,但是人體長(zhǎng)期攝入亞硝酸鹽過(guò)量的食品,可誘發(fā)消化系統(tǒng)癌變。
測(cè)定原理:
在酸性條件下,亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸反應(yīng)生成重氮化合物,再與N-1-萘基乙二胺形成紫紅色偶氮化合物,在540nm處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、研缽或勻漿器、水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗原Anti-ECRG4 Antibody兔蛋白激活受體4(PAR4)elisa定量檢測(cè)試劑盒
S相激相關(guān)蛋白抗原Anti-EDNRA Antibody兔上皮型鈣粘蛋白 (E-Cad)elisa定量檢測(cè)試劑盒
協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4Anti-ECRG4 Antibody兔黏病耐藥蛋白1(MX1)elisa定量檢測(cè)試劑盒
協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A7抗原Anti-EDNRA Antibody猴成纖維生長(zhǎng)因子21(FGF21)elisa定量檢測(cè)試劑盒
線粒體促凋亡蛋白抗原Anti-EDNRA Antibody猴蛋白激抑制劑γ(PKIγ)elisa定量檢測(cè)試劑盒
乙酰輔A轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗原Anti-EEF1A1 Antibody猴軟骨素(CS)elisa定量檢測(cè)試劑盒
鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗原Anti-EEF1B2 Antibody猴踝蛋白(TLN)elisa定量檢測(cè)試劑盒
運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存蛋白1抗原Anti-EEF1G Antibody兔染色盒同源物3(CBX3)elisa定量檢測(cè)試劑盒
食品中亞硝酸鹽含量微量法檢測(cè)試劑盒橡苔 98%小鼠鈣非依賴型脂A2(iPLA2)免疫試劑盒β-球蛋白抗體SLC26A4 鈉單獨(dú)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC26A4抗體
庚烯酮 98%小鼠鈣調(diào)素(CAM)免疫試劑盒緩激肽B2受體抗體SLC25A6 線粒體載體腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體
二丁葉酯 98%小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)免疫試劑盒丁酰酯抗體(N端)SLC25A20 線粒體二羧載體蛋白20抗體
二丁葉酯 ≥98%, FCC, Kosher小鼠分泌型脂A2(sPLA2)免疫試劑盒丁酰酯抗體(C端)SLC25A13 線粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬氨/谷氨載體蛋白抗體
麥芽酚 ≥98.5%,natural, FG小鼠肺炎支原體(MP)抗體(IgG)免疫試劑盒BLAME抗體SLC25A11 線粒體二羧載體蛋白11抗體
橙花叔 97%, Mixture of cis and trans小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)免疫試劑盒巴曲霉素單克隆抗體SLC25A10 線粒體二羧載體蛋白抗體
橙花叔 ≥97.0%,Mixture of cis and trans, FCC小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)免疫試劑盒蛇巴曲抗體SLC24A5 可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC24A5抗體
椰子 98%, FCC, Kosher小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)免疫試劑盒溴脫氧尿苷抗體Slc22a5 溶質(zhì)載體家族蛋白22成員5抗體
橙花 97%小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)免疫試劑盒腫瘤/抗原2.2抗體SLC16A7/MCT2 單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體
乙位萘乙 99%小鼠肺表面活性蛋白D(SP-D)免疫試劑盒腫瘤/抗原2.3抗體SLC16A3/MCT4 單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3/4抗體
乙位萘乙 食品級(jí),Kosher小鼠肥大類胰蛋白(MCT)免疫試劑盒腫瘤/抗原2.4抗體SLC14A1/RACH1 尿素轉(zhuǎn)運(yùn)型糖蛋白抗體
反,反-2,4-壬二烯 >85.0%(GC)小鼠肥大/干生長(zhǎng)因子受體(試劑盒/Sl/CD117)免疫試劑盒腦鈉素/利鈉肽抗體SLC12A3/NCCT 鈉離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體
正壬 96%小鼠芳香免疫試劑盒B Raf抗體SLAMF9/CD2F-10 CD2F-10抗體
正壬 ≥95%, FCC, Kosher, FG小鼠二酰甘油(DAG/DG)免疫試劑盒癌易感因1抗體SLAMF9 CD2F-10抗體
3,6-壬二烯 97%小鼠二肽肽Ⅳ(DPPⅣ)免疫試劑盒癌易感因2抗體SLAMF7/CD319 SLAMF7抗體
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
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