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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氮代謝系列>> 植物硝態(tài)氮可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6497 |
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【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
50管/48樣 | 可見(jiàn)分光光度法 | GOY-01S6497 |
商品介紹
測(cè)定意義 硝態(tài)氮是植物最主要的氮源。植物體內(nèi)硝態(tài)氮含量反映了土壤中硝態(tài)氮的供應(yīng)情況,可作為土壤氮肥的指標(biāo)。測(cè)定植物體內(nèi)的硝態(tài)氮含量,不僅能夠反映出植物的氮素營(yíng)養(yǎng)情況,而且對(duì)鑒定蔬菜和以植物為原料的加工制品的品質(zhì)也有重要的意義。 測(cè)定原理 在濃酸條件下,NO3-與水楊酸反應(yīng),生成硝基水楊酸,硝基水楊酸在堿性條件下(PH>12)呈黃色,在一定范圍內(nèi),其顏色深淺與含量成正比,可比色測(cè)定計(jì)算得硝態(tài)氮含量。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 蒸餾水、天平、常溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。
GDP甘露糖焦化抗體Human WDR46 ELISA Kit硅酸鈣
G蛋白偶聯(lián)受體171抗體Human WDR18 ELISA Kit檸檬酸鋰
神經(jīng)膜糖蛋白M6bHuman WDR55 ELISA Kit金絲桃苷
鳥(niǎo)苷酸激GMK抗體Human WARS2 ELISA Kit荷葉堿
半乳糖腦苷脂抗體Human WDR16 ELISA Kit大戟二烯醇
G蛋白偶聯(lián)受體激5抗體Human WBP1 ELISA Kit穿山甲
GTP結(jié)合蛋白R(shí)EM1抗體Human WBP11 ELISA Kit松葉
化糖原合激-3α抗體Human WASL ELISA Kit沉香
植物硝態(tài)氮可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒活性炭 電鍍脫色,200目,from wood化NF-κB活化激抗體
活性炭 催化劑載體,8-16目馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體
活性炭 凈水、氣體純化,棒,φ1.0mm化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體
活性炭 凈水、氣體純化,10-24目化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體
活性炭 凈水、氣體純化,棒,φ4.0mm化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體
活性炭 藥物脫色,200目化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體
活性炭 食品糖類,200目化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體
活性炭 培養(yǎng)級(jí)化微管相關(guān)蛋白抗體
活性炭 植物培養(yǎng)級(jí)非受體型酪氨蛋白激Tnk1抗體
≥4,400 USP units/mg化非受體型酪氨蛋白激Tnk1抗體
(+)-氨蝶呤 95%化DNA拓普西異構(gòu)Ⅱ抗體
環(huán)酰,一水 97%環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體
阿糖胞苷 98%化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體
亞葉鈣 98%CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體
氨蝶呤 水合物 99%腫瘤壞死因子β抗體(TNFβ)
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
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