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貨號	GOY-01S6420

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	多酚氧化酶(PPO）可見分光光度法檢測試劑盒
規(guī)格	50管/24樣
檢測方法	可見分光光度法
貨號	GOY-01S6420

商品介紹：

測定意義

PPO（EC1.10.3.1）主要存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是一種含銅的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化產(chǎn)生醌，從而引起褐化，與果蔬加工、茶葉品質(zhì)和組培等密切相關(guān)。

測定原理：

PPO能夠催化鄰苯二酚產(chǎn)生醌，后者在525nm有特征光吸收。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

人堿性成纖維生長因子6Anti-OR5A1 Antibody人多功能蛋白聚糖（VS）elisa定量檢測試劑盒

小鼠CD19分子Anti-OR5AK3P Antibody人多巴脫羧（DDC）elisa定量檢測試劑盒

大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1Anti-OR5A2 Antibody人低氧誘導(dǎo)因子1α （HIF-1α）elisa定量檢測試劑盒

人堿性成纖維生長因子4Anti-OR5AP2 Antibody人骨保護(hù)素（OPG）elisa定量檢測試劑盒

人酸性成纖維生長因子1Anti-OR5AK3P Antibody人蛋白二硫化物異構(gòu)A2（PDIA2）elisa定量檢測試劑盒

大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素Anti-OR5AP2 Antibody人蛋白Z（PROZ）elisa定量檢測試劑盒

小鼠CD3分子Anti-OR5AR1 Antibody人胰島素樣生長因子1受體3（IGF1R3）elisa定量檢測試劑盒

小鼠CD4分子Anti-OR5AS1 Antibody人丙酮酸脫氫激同工4（PDK4）elisa定量檢測試劑盒

多酚氧化酶(PPO）可見分光光度法檢測試劑盒 98%大鼠狀旁(PTH)免疫試劑盒神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43hnRNP F 異質(zhì)核糖核蛋白F抗體

2-氨-5-硝-6-吡 98%大鼠種胎兒球蛋白/胎蛋白(AFP)免疫試劑盒3-甘油脫氫（兔來源免疫組化用抗體）hnRNP A2B1 異質(zhì)核糖核蛋白hnRNPA2抗體

2-氨-3-硝-6-吡 98%大鼠羥戊5-焦脫羧(MDD)免疫試劑盒3-甘油脫氫單克隆抗體(內(nèi)參抗體)HNF4/TCF4/HNF4A 肝核因子4α抗體

2-溴-4-氨吡 97%大鼠低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒生長停滯特異性蛋白2家族1抗體HNF1/TCF1/HNF1A 肝核因子1α抗體

5-氨-2-吡 98%大鼠激肽原(KNG)免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)受體97抗體HN1L 雄激素調(diào)節(jié)樣蛋白抗體

4-氨-2-吡 98%大鼠激動(dòng)異構(gòu)/分裂素MB(CKMB)免疫試劑盒G蛋白結(jié)合蛋白7抗體HN1/ARM2 雄激素調(diào)節(jié)蛋白2抗體

3-氨-2-吡 97%大鼠質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)免疫試劑盒綠色熒光蛋白抗體HN protein 雞新城疫血凝素－神經(jīng)氨抗體

3,5-雙(三氟) 97%大鼠質(zhì)衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)免疫試劑盒綠色熒光蛋白抗體HMW Kininogen 高分子量激肽原重鏈抗體

2-溴-5-三氟 98%大鼠質(zhì)金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)免疫試劑盒G蛋白通路抑制蛋白1抗體HMGCS2 三羥輔A合成2抗體

對二三氟 99%大鼠質(zhì)金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)免疫試劑盒膠質(zhì)系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α2抗體HMGCS1 三羥輔A合成1

5-溴-1-茚酮 98%大鼠質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒核突觸蛋白-γ抗體HMGCR 三羥輔A還原抗體

N-芐哌酮 98%大鼠質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B) 免疫試劑盒粒-巨噬克隆激因子抗體HMGCL 三羥輔A裂解抗體

98%大鼠質(zhì)金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8/Collagenase II)免疫試劑盒還原抗體HMGB4 高遷移率族蛋白B4抗體

2--4-硝吡 98.0%大鼠質(zhì)金屬蛋白7(MMP-7)免疫試劑盒胰高血糖素樣肽-1抗體HMGB1 高遷移率族蛋白B1抗體

L-蘋果二酯 98%大鼠質(zhì)金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒顆粒蛋白前體抗體HMGA2 高遷移率族蛋白A2抗體

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。