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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 超氧陰離子微量法檢測試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6431 |
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商品介紹
測定意義 生物體內(nèi)超氧陰離子等活性氧具有免疫和信號(hào)傳導(dǎo)的作用,但積累過多時(shí)會(huì)對(duì)細(xì)胞膜及生物大分子產(chǎn)生破壞作用,導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞和組織代謝異常,從而引起多種疾病。 測定原理: 超氧陰離子與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2-在對(duì)氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,根據(jù)A530值可以計(jì)算樣品中O2-含量。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器: 天平、水浴鍋、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6431 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
二乙二丁醋酸酯 98%燒堿石棉 CP,20-30目Anti-PCNA 增殖核抗原抗體
N,N-二甲基乙酰 P,98.0% 氫鈉 AR(劇品)ANti-PDCD4 凋亡相關(guān)蛋白4抗體
N,N-二甲基乙 99.0%亞硝酸鈷鈉 99.995% metals basisAnti-PCNA-Proliferation Marker 增殖核抗原抗體
N,N-二甲基乙 CP,98.0% 燒堿石棉 CP, 10-20目Anti-TFAR19/PDCD5 凋亡相關(guān)蛋白TFAR19抗體
N,N-二甲基乙 重蒸餾, ≥99.5%鄰聯(lián)甲苯 AR,98%Anti-PCNA-Proliferation Marker 增殖核抗原抗體
雙酮烯酰 99%鄰聯(lián)甲苯 CP,97%Anti-phosphos-PCNA (Tyr211) 化增殖核抗原抗體
二乙酯 CP鄰聯(lián)甲苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析,≥99%(GC)Anti-PCX/PODXL 足特異蛋白抗體
二乙酯 GR鹽酸鄰聯(lián)甲苯 ARAnti-PDE4D 二酯4D抗體
超氧陰離子微量法檢測試劑盒三氟磺鈧 98%Anti-HHV8/ORF K2 類皰疹病8抗體人胸腺質(zhì)淋巴生成素(TSLP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
四氫-2 2-二-4H--4-酮 95%Anti-HHV8/ORF50 人類皰疹病8抗體人尿激型纖溶原激活因子受體(PLAUR/uPAR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
三(4-溴) 98%Anti-HHV8/ORF50 人類皰疹病8抗體人血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
2-酰噻唑 97%Anti-HHV8/ORF50 人類皰疹病8抗體人血管內(nèi)皮生長因子D(VEGF-D)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
500ml透氣不透液墊片 40mm口徑 配套42mm口徑蓋Anti-HHV8/ORF K2 人類皰疹病8抗體人血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/KDR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
1,3-二 99%Anti-HIF-1 Alpha 缺氧誘導(dǎo)因子1α 抗體人結(jié)合蛋白(DBP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
3-吡 97%Anti-HIF-1 Beta/ARNT1 缺氧誘導(dǎo)因子1β 抗體人胰島素(INS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
2-吡 98%Anti-HIF 2 Alpha 缺氧誘導(dǎo)因子2α 抗體人外質(zhì)金屬蛋白誘導(dǎo)因子(EMMPRIN/CD147)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
碳鋇 AR,99%Anti-HINT1 組氨三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體人CD34分子(CD34)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
碳鍶 AR,99%Anti-HIRA/DGGR1 組蛋白替換精蛋白DGGR1抗體人抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
2-環(huán)戊酮 97%Anti-Histone H3 組蛋白3抗體人色素b5(CYB5A)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
碳鋇 AR,99%Anti-Phospho-Histone H3 (Ser10) 化組蛋白3抗體β肽(CGβ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
碳鋇 CP,98%Anti-Phospho-Histone H3 (Ser28) 化組蛋白3抗體人可溶性O(shè)X40L蛋白(sOX40L)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
碳鋇 SPAnti-Phospho-Histone H3 (Thr11) 化組蛋白3抗體人抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TAP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
碳鋇 99.95% metals basisAnti-Phospho-Histone H3 (Thr3) 化組蛋白3抗體人B-Raf原癌因絲氨/蘇氨蛋白激(BRAF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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