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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 總抗氧化能力(FRAP法)微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6435 |
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測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6435 |
商品介紹
測(cè)定意義 測(cè)定對(duì)象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測(cè)血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細(xì)胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。 測(cè)定原理: 在酸性環(huán)境下,抗氧化物質(zhì)還原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)產(chǎn)生藍(lán)色的Fe2+-TPTZ的能力反映了總抗氧化能力。 自備實(shí)驗(yàn)用品: 恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。
DL-叔亮 98%鄰苯甲酸 ≥98.0% (HPLC)(劇品)Anti-Cav-1/FITC 熒光素標(biāo)記抗小凹蛋白抗體IgG
L-亮甲酯鹽酸鹽 98%2,4-二氯溴苯 98%Anti-Caveolin-3/FITC 熒光素標(biāo)記質(zhì)膜微囊蛋白-3抗體IgG
DL-賴 99%芐基基氯化銨 98%Anti-CACH2/CaV1.2/FITC 熒光素標(biāo)記L型鈣通道蛋白抗體IgG
D-亮 99%戊二(50%) AR,50% in H2O Anti-CACNA1G/Cav3.1 /FITC 熒光素標(biāo)記電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體IgG
D-亮甲酯鹽酸鹽 98%戊二(50%) 高純度醫(yī)用級(jí),50% in H2OAnti-CBFA1/RUNX2/FITC 熒光素標(biāo)記成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體IgG
D-叔亮鹽酸鹽 BR 戊二(50%) 電鏡,50% in H2OAnti-CBL2 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠原癌蛋白CBL2抗體IgG
DL-賴鹽酸鹽 BR戊二(50%) 照相級(jí),50% in H2OAnti-phospho-CBL2(Tyr731) /FITC 熒光素標(biāo)記化原癌蛋白CBL2抗體IgG
N-甲基-L-脯,一水 98%聚乙二單甲 均分子量350 Anti-phospho-CBL2(Tyr774) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化原癌蛋白CBL2抗體IgG
總抗氧化能力(FRAP法)微量法檢測(cè)試劑盒2-溴酰溴 97%CLEC4E(Human C-type lectin domain family 4 member e) ELISA Kit 人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E兔巨噬清道夫受體1 (MSR1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
粘 99%Human Hypothetical protein LOC677168 ELISA Kit 人假定蛋白LOC677168兔轉(zhuǎn)錄因子20(TCF20)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
酰溴 95%Ly6a(Human lymphocyte antigen 6 complex locus A) ELISA Kit 人淋巴抗原6復(fù)合物因座A兔褪黑素(MT)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
皂土(膨潤(rùn)土) Bentone SD-1,適于中至低性溶劑EAR1(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 1) ELISA KIT 人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員1兔趨化素樣因子超家族成員4(CKLFSF4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
皂土(膨潤(rùn)土) Bentone SD-2,適于中高性溶劑MLKL(Human mixed lineage kinase domain-like) ELISA Kit 人混合系列蛋白激樣結(jié)構(gòu)域兔蛋白激抑制劑α(PKIα )聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
BENTONE 27,應(yīng)用在中等到高等性溶劑PPARGC1(Human peroxisome proliferative activated receptor gama coactivator 1 alpha) ELISA Kit 人過氧化物體增殖激活物受體γ輔激活因子1α兔唾液結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素10(SIGLEC10)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
皂土(膨潤(rùn)土) BENTONE 38,應(yīng)用在性溶劑體系中human similar to cDNA sequence BC027382 ELISA Kit 人類似cDNA順序BC027382兔多功能蛋白聚糖(VS)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
鋅粒 99.99% metals basishuman similar to RIKEN cDNA 4931408D14 gene ELISA kit 人類似RIKEN cDNA 4931408D14 因兔胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
二二硒 99%RCOR3(Human REST corepressor 3) ELISA Kit 人REST協(xié)阻抑因子3兔血管緊張素I受體抗體(ANG I R-Ab)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
99%COLEC11(Human collectin sub-family member 11) ELISA Kit 人集蛋白亞家族成員11兔麥考酚(MPA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
鹽鹽 ≥99.0% (HPLC)Alpha1 Beta-GP(Human Alpha1 Beta glycoprotein) ELISA Kit 人α1β糖蛋白兔尿素相關(guān)蛋白C(UreC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
6-硫 98%sTREM-1(Human soluble Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1) ELISA Kit 人可溶性髓系觸發(fā)受體-1兔狀腺素抗體(TAb)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
0.98MSTN(Human Myostatin) ELISA Kit 人肌抑素兔活化Ⅻ(FⅫa)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
≥99.5% (HPLC)MLZE(Human melanomaderived leucine zipper extra-nuclear factor) ELISA Kit 人黑素瘤衍生亮氨拉鏈額外核因子兔血小板衍生生長(zhǎng)因子亞A(PDGFA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%(HPLC)UGT2B4(Human uridine dipho-sphate glucuronosyltransferase 2 family polypeptide B4) ELISA Kit 人二尿核苷葡糖轉(zhuǎn)移2家族肽B4兔α-骨膠原交聯(lián)(α-CTx)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
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