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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 羥自由基清除能力微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6441 |
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測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6441 |
商品介紹
測(cè)定意義 羥自由基作用于體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸、脂類等生物分子,造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損,進(jìn)而導(dǎo)致體內(nèi)代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一,在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用。 測(cè)定原理: H2O2/ Fe2+ 通過Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基,水楊酸能有效捕捉產(chǎn)生的羥自由基并與其反應(yīng)生成有色物質(zhì)2,3-二羥基苯甲酸,在510nm處有最大吸收峰,加入具有清除能力的物質(zhì)后,有色物質(zhì)便會(huì)減少,從而可以根據(jù)吸光值的數(shù)值判斷樣品清除羥自由基的能力。 自備實(shí)驗(yàn)用品: 恒溫水浴鍋、酶標(biāo)儀、96孔板和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通常可以使測(cè)定正常。
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羥自由基清除能力微量法檢測(cè)試劑盒4、4'-二氨酰替 98%Anti-Melamine/FITC 熒光素標(biāo)記抗三聚抗體IgG豬性成纖維生長因子(AFGF/FGF1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2,4-二羥 98%Anti-Melamine/FITC 熒光素標(biāo)記抗三聚抗體IgG豬膜橋蛋白聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
對(duì)二氨異辛酯 98%Anti-Phospho-Met (Tyr1003) /FITC 熒光素標(biāo)記化肝生長因子受體(原癌因)抗體IgG豬間變性淋巴瘤激(ALK)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
3-三氟酚 99%Anti-Phospho-Met (Tyr1234/1235) /FITC 熒光素標(biāo)記化肝生長因子受體(原癌因)抗體IgG豬胸腺依賴性抗原(TD-Ag)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
5-羥-1-四氫萘酮 99%Anti-Phospho-Met (Tyr1349) /FITC 熒光素標(biāo)記化肝生長因子受體(原癌因)抗體IgG豬酮激M2型同工(PKM2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
六氟二酐 98%Anti-Melan-A/MART-1 /FITC 熒光素標(biāo)記黑色素瘤相關(guān)抗原/黑色素-A抗體IgG豬腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化(TACE)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2,2-雙[4-(4-氨氧)]六氟烷 97%Anti-Menin/Men1/FITC 熒光素標(biāo)記Menin抑癌蛋白抗體IgG豬單氧化(MAO)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
4-羥 98%Anti-Metal ion transporter/FITC 熒光素標(biāo)記擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體IgG豬肌球蛋白輕鏈1(MYL1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
4-三氟水楊 98%Anti-Metronidazole/FITC 熒光素標(biāo)記抗硝唑抗體IgG豬三葉因子1(TFF1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
氫化雙酚A 95%Anti-Mfn1/FITC 熒光素標(biāo)記線粒體融合蛋白1抗體IgG豬血小板激活因子(PAF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
4-叔丁-4'-氧二酰 95%Anti-MGMT /FITC 熒光素標(biāo)記O6DNA轉(zhuǎn)移抗體IgG豬游離血紅蛋白(f-Hb)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2-環(huán)己 99%Anti-MGr1-Ag/37LRP /FITC 熒光素標(biāo)記層粘連蛋白受體1抗體(N端)IgG豬靶向核糖核(TR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
1--3-吡咯烷 97%Anti-MGr1-Ag/37LRP /FITC 熒光素標(biāo)記層粘連蛋白受體1抗體(C端)IgG豬血小板衍生生長因子受體α(PDGFRα)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
無水化鎂 99.99%,-10 目顆粒, 氬氣封裝Anti-MICA/FITC 熒光素標(biāo)記一種應(yīng)激分子抗體IgG豬神經(jīng)鈣黏蛋白(NCAD)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
對(duì)酰 98%Anti-MIP-1 Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬炎癥因子1α抗體IgG豬降鈣素因相關(guān)肽(CGRP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
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