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測(cè)定意義

UA是鳥類和爬行類動(dòng)物的主要代謝產(chǎn)物，正常人體尿液中產(chǎn)物主要為尿素，含少量尿酸。此外，UA還是重要的抗氧化劑，能清除超氧化物，羥自由基等。體內(nèi)UA生成量和排泄量不平衡會(huì)導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生。例如，血中UA升高會(huì)引起痛風(fēng)、腎功能損害和動(dòng)脈硬化，相反UA降低會(huì)引起惡性貧血，在臨床診斷上具有重要的意義。

測(cè)定原理：

尿酸酶能催化UA生成，CO2及H2O2，H2O2 氧化亞中的Fe2+ 生成Fe3+ ，F(xiàn)e3+進(jìn)一步與酚和4-氨基林縮合生成紅色醌類化合物，在505nm下有特征吸收峰，測(cè)定反應(yīng)體系505nm的吸收值，可計(jì)算尿酸的含量。

需自備的儀器和用品：

恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

1,2,3-三溴烷 97%錫 AR,99.5%FBN1 (fibrillin 1)  原纖維蛋白1抗原

3-乙酰吡 98%6-正基-2-硫代尿嘧 98%FGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4)  纖維母生長(zhǎng)因子4抗原

2-苯甲酰 98%6-正基-2-硫代尿嘧 分析標(biāo)準(zhǔn)品FGF5 peptide  纖維母生長(zhǎng)因子5抗原

2--4-甲基吡 97%苯肼 CP,96.0%Fibulin 1  衰老關(guān)鍵蛋白抗原

4-()吡 98%1-硝基烷 99%FLG(filaggrin)peptide  絲聚蛋白/中間絲蛋白抗原

烯基基硅烷 98%環(huán)丁基鹽酸鹽 96%FOS B  FosB抗原

烯基溴化鎂 1.0 M乙溶液3-(三氟甲氧基)苯甲酸 98%FRA2/FOSL2(Fos related/like antigen 2)  FOS樣抗原2

茴香二甲基縮 97%N-乙酰-L-苯 99%FOXF1(Forkhead box protein F1)  叉頭蛋白F1抗原

尿酸(UA)含量可見分光光度法檢測(cè)試劑盒酮 90%HSF1 ELISA Kit  大鼠熱休克因子1兔白介素18(IL-18)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

-О，О'-二乙 98%BetaOHB ELISA Kit  大鼠β羥丁兔性神經(jīng)鞘脂(ASM)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

組 96%CYP450 ELISA Kit  大鼠色素P450兔防御素α5(DEFα5)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

2-己噻吩 98%GHRP-Ghrelin ELISA Kit   大鼠生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin兔激肽釋放8(KLK8)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

反-3-己烯-1- 97%vaspin ELASA Kit  大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨蛋白抑制劑兔黑素瘤衍生亮氨拉鏈額外核因子(MLZE)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

碳化鉿 99.5%，Zr <1% ，325目BrdU ELISA Kit   大鼠溴脫氧核苷尿嘧兔C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

乙內(nèi)酰脲-5-乙 98%TGF Beta2 ELISA Kit  大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2兔黃體生成素釋放激素(LHRH/GnRH)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

4-(2-羥乙)吡 98%CYP2E1 ISA Kit   大鼠色素P4502E1兔核轉(zhuǎn)錄因子Y亞γ(NFYC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

3-羥乙炔 97%Alpha1-MG ELISA Kit  大鼠α1微球蛋白兔CD163分子(CD163)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

2-羥-4,6-二氧乙酮 98%MCP-4/CCL13 ELISA Kit   大鼠單核趨化蛋白4兔促有絲分裂因子(MF/MPF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

2-羥-2-(三氟) 94%PPAR- Alpha ELISA Kit  大鼠過氧化物體增殖物激活受體α兔心肌肌鈣蛋白T(c/TNNT2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  

反式-2-羥肉桂 97%CAM ELISA Kit   大鼠鈣調(diào)素兔肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SPC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

2-羥-5-氧 98%Apo-E ELISA Kit  大鼠載脂蛋白E兔C4結(jié)合蛋白α(C4BPα)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

2-羥-6-煙 98%omentin ELISA Kit  大鼠網(wǎng)膜素兔D-脫氫(D-LDH)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  

3-己炔-2-酮 97%OFQ/N ELISA Kit  大鼠孤腓肽兔脫氫表雄酮硫酯(DHEA-S)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。