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貨號 | GOY-01S6452 |
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選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 100管/48樣 |
檢測方法 | 微量法 |
貨號 | GOY-01S6452 |
商品介紹:
測定意義
生物體內(nèi)巰基主要包括巰基和蛋白質(zhì)巰基。前者不僅能夠修復(fù)氧化損傷的蛋白質(zhì),而且參與活性氧清除,后者對于維持蛋白質(zhì)構(gòu)象具有重要作用。通過測定總巰基含量和GSH含量,能夠間接測定蛋白質(zhì)巰基含量。
測定原理:
巰基基團與5,5’- 二硫代-雙-硝基苯甲酸(DTNB)反應(yīng),生成黃色化合物,在412nm處有最大吸收峰。
需自備的儀器和用品:
天平、研缽、可見分光光度計、恒溫水浴鍋、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
間隙連接蛋白43(多肽片斷抗原)Anti-FANCG Antibody大鼠胰脂肪(PL)elisa定量檢測試劑盒
間隙連接蛋白45(抗原)Anti-FASN Antibody大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)elisa定量檢測試劑盒
II 型膠原(抗原)Anti-FARP2 Antibody大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)elisa定量檢測試劑盒
表面趨化因子受體1抗原Anti-FASTK Antibody大鼠脂聯(lián)素(ADP/Acrp30)elisa定量檢測試劑盒
前列腺素氧化環(huán)化2(抗原)Anti-FASTKD1 Antibody睪酮(T)elisa定量檢測試劑盒
C-藻藍素(藻藍蛋白)Anti-FASTKD1 Antibody脂氧素A4(LXA4)elisa定量檢測試劑盒
結(jié)締組織生長因子(多肽抗原)Anti-FASTKD2 Antibody豚鼠鈣調(diào)結(jié)合蛋白1(CABIN1)elisa定量檢測試劑盒
周期素E/原癌基因抗原Anti-FASTKD3 Antibody豚鼠核因子-κB亞基p65(NF-κB p65)elisa定量檢測試劑盒
總巰基微量法檢測試劑盒3-氧乙酮 98%羅丹明標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA
干冰,塊狀,146*88*20Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA
4,4'-二氨二 98%APC標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA
2,2-雙[4-(4-氨氧)]六氟烷 97%Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA
3,4'-二氨二 97%Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA
對氨叔丁酯 98%Cy5標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA
D-α-環(huán)己甘氨 98.0%Cy5.5標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA
(RS)-1H--2-羧 97%Cy7標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA
(R)-啉-2-羧 97%PE標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA
(2S,3aS,7aS)-2-羧八氫 98%膠體金標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA
5,6,7,8-四羥萘-1-羧 98.0%APC標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc
乙仲丁酯 99%Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc
18-冠-6 99%Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc
6-氧喹啉 96%Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc
環(huán)氧烷 97%Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc
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