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查爾酮異構(gòu)酶(CHI)微量法檢測(cè)試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-24 16:15:40瀏覽次數(shù):151次

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elisa檢測(cè)試劑盒
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貨號(hào) GOY-01S6468
查爾酮異構(gòu)酶(CHI)微量法檢測(cè)試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:小鼠γ丁酸(GABA)ELISA Kit,48T/96T
大鼠γ丁酸(GABA)ELISA Kit,48T/96T
人兒茶酚(CA)ELISA Kit,48T/96T
小鼠兒茶酚(CA)ELISA Kit,48T/96T
大鼠兒茶酚(CA)ELISA Kit,48T/96T

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商品屬性:

產(chǎn)品名稱

查爾酮異構(gòu)酶(CHI)微量法檢測(cè)試劑盒

規(guī)格

100管/96樣

檢測(cè)方法

微量法

貨號(hào)

GOY-01S6468

商品介紹:

測(cè)定意義

查爾酮異構(gòu)酶(Chalcone isomerase, CHI)是第一個(gè)被認(rèn)識(shí)的黃酮類化合物合成相關(guān)酶,也是黃酮代謝途徑中的關(guān)鍵酶之一。查爾酮異構(gòu)酶和查爾酮合酶一起構(gòu)成了黃酮類化合物生物合成的限速酶。

測(cè)定原理:

查爾酮異構(gòu)酶(CHI)催化查爾酮環(huán)化形成 4,5,7-三羥基黃烷酮,通過(guò)測(cè)定381nm下的吸光度變化表示CHI的活性。

需自備的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血35ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔510分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

總銀杏酸(C13:0,C15:1,C17:2,C15:0,C17:1) ≥90%3-溴-2-基吡 98%Anti-OAT-3  陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-3抗體

6-氯-1-己 95%3-氯基異酸酯  96%Anti-OAT4L/URAT1  尿酸鹽重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)子1抗體

辛二 99%鄰氯苯異酸酯 98%Anti-Ghrelin/GHRP  生長(zhǎng)釋放肽抗體

辛二酸 99%間氯苯異酸酯 98%anti-OCLN/Occludin  緊密連接蛋白抗體

N-氨酰甲基乙磺酸 99%環(huán)己基異酸酯  98%Anti-claudin 5  緊密連接蛋白-5抗體

4--3-肼基-5-巰基-1,2,5-三唑(用于的測(cè)定) 99%4-氯-2-吡甲酸 98%Anti-OCT1  陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)器1抗體

瓊脂糖 for biochemistry 4-氯吡-2-甲酸甲酯 98%Anti-OCT2  陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體

3--9-乙基咔唑  95%5-氯噻吩-2-磺酰 97%Anti-Oct-4(Octamer-4)  胚胎干關(guān)鍵蛋白抗體

查爾酮異構(gòu)酶(CHI)微量法檢測(cè)試劑盒5--1.3.3--2-亞啉 98%f- BetaCG ELISA Kit  大鼠游離β絨毛膜促性豚鼠睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

鄰氧 CP,97%ALD ELISA Kit  大鼠固酮豚鼠甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

鄰氧 GR,99%NA ELISA Kit  大鼠去素豚鼠Hedgehog相互作用蛋白(HHIP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

鄰氧 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%,用于環(huán)境分析PGF ELISA Kit  大鼠前列腺素F豚鼠腺苷環(huán)化3(ADCY3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

3-氧 98%PGE1 ELISA Kit  大鼠前列腺素E1豚鼠載脂蛋白C1(ApoC1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

4,4'-二聯(lián)  >98%(GC)CORT ELISA Kit  大鼠皮質(zhì)酮/酮豚鼠膽囊收縮素/腸促胰肽A受體(CCKAR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

2-乙氧 98%ET-1 ELISA Kit  大鼠內(nèi)皮素1豚鼠膠原II(Collagenase II)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

對(duì)乙氧 98%BK ELISA Kit  大鼠血管舒緩激肽豚鼠脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

N-乙-N-芐 98%Resistin ELISA Kit  大鼠抵抗素豚鼠封閉蛋白11(CLDN11)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

N,N-二 standard for GC, ≥99.5% (GC)PRL ELISA Kit  大鼠催素豚鼠Ⅰ型膠原α1(COL1α1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

N,N-二 AR,99%GRH ELISA Kit  大鼠促生長(zhǎng)激素釋放激素豚鼠通用轉(zhuǎn)錄因子II A肽1(GTF2A1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

N,N-二 CP,98%ACTH ELISA Kit  大鼠促皮質(zhì)激素豚鼠轉(zhuǎn)錄激活因子-1(ATF-1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

N,N-二 purified by redistillation, ≥99.5%FSH ELISA Kit  大鼠促卵泡素豚鼠β4(TMSβ4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

N,N-二乙 ARER ELISA Kit  大鼠雌二受體豚鼠前列腺素D2合成(PGD2S)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

N,N-二乙 ≥99% (GC)Pro-ANP ELISA Kit  大鼠前心鈉肽豚鼠β肌動(dòng)蛋白(β-actin)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。

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