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貨號 | GOY-01S6508 |
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商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 100管/48樣 |
檢測方法 | 微量法 |
貨號 | GOY-01S6508 |
商品介紹:
測定意義
UE能夠水解尿素,產(chǎn)生氨和碳酸。UE活性與有機(jī)物質(zhì)含量、全氮和速效氮含量呈正相關(guān),反應(yīng)了氮素狀況。
測定原理:
利用靛酚藍(lán)比色法測定脲酶水解尿素產(chǎn)生的NH3-N。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
Bacillus circulans前β1高密度脂蛋白檢測試劑盒
Bacillus subtilis subsp. subtilis亞基A檢測試劑盒
Lysinibacillus sphaericus血小板膜蛋白CD41檢測試劑盒
Bacillus thuringiensisCD137分子檢測試劑盒
Bacillus thuringiensis因子受體檢測試劑盒
Bacillus thuringiensis谷氨酰2檢測試劑盒
Bacillus thuringiensisSestrin 1蛋白檢測試劑盒
Bacillus thuringiensisL-天門冬檢測試劑盒
脲酶(UE)微量法檢測試劑盒1,6-己二 99.5%PROG ELISA Kit 魚孕激素/孕酮豚鼠糖化血紅蛋白(HbA1c)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
正庚 97%SCT(Salmon calcitonin) ELISA Kit 豚鼠睪酮受體(TR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
異辛烷 for HPLC,>99% (GC)T4(Fish Thyroxine) ELISA Kit 魚類狀腺素豚鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SPD)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
異丁 99%E2 ELISA KIT 魚雌二豚鼠纖溶原激活劑(PLGA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
異丁 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5% (GC)ACTH ELISA Kit 魚促皮質(zhì)激素豚鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
異丁 Standard for GC, ≥99.5% (GC)E ELISA Kit 魚雌激素豚鼠胰島素自身抗體(IAA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
異丁酐 98%FSH ELISA Kit 魚促卵泡素豚鼠同線蛋白2(ST2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
3-氧丁 99%LH ELISA Kit 魚促豚鼠抗?fàn)钕龠^氧化物抗體(TPO-Ab)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
烯酰 98% AMPK ELISA Kit 魚化腺苷活化蛋白激豚鼠間皮素(MSLN)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
α-乙烯 99%PV ELISA Kit 魚卵黃高蛋白豚鼠巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
α-乙烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品MHC ELISA Kit 魚類主要組織相容性復(fù)合體豚鼠反狀腺原氨(rT3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
5--2-己酮 99%C3 ELISA Kit 鮭魚補(bǔ)體蛋白3豚鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
正壬烷 99%C4 ELISA Kit 鮭魚補(bǔ)體蛋白4豚鼠胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
己二 99%IL-1 Alpha ELISA kit 魚類白介素1α豚鼠二酯4D(PDE4D)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
正壬 98%IL-1 Beta ELISA Kit 魚類白介素1β豚鼠白蛋白(ALB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
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