檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測吸光值。
產(chǎn)品名稱 | 魚金屬硫蛋白2(MT-2)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Fish Metallothionein-2,MT-2 ELISA Kit |
貨號 | GOY-F74837 |
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實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
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公司采用的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無效包退包換,公司提供免費(fèi)代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
操作步驟:
1)運(yùn)用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
魚金屬硫蛋白2(MT-2)elisa試劑盒樣品收集、處理及保存:
1).細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
碳酸胍(>98%,BR)Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb4H-噻吩[3,2-b]吡咯-5-羧酸酯
六次甲基四(>99%,BC)Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb氨基-1H-吡唑并[3,b]吡啶
鹽酸肼(>98%,BR)Phospho-Tyrosine Hydroxylase (Ser31) (D6I9V) Rabbit mAb2-溴-氟酚
水合硫酸鐵(> 99%,BR)Vincristine基-2,6-二-5-氟吡啶
沒食子酸甲酯(>98%,BC)PFKFB2 (D7G5R) Rabbit mAb油酰單
肌激酶(比活性:>200 U/mg,BC)LRRK2 (D18E12) Rabbit mAb2-氟-溴-6-
酸酮酸-環(huán)己鹽(>98%,BC)Rab25 (D4P6P) XP® Rabbit mAb吡啶-酸
酸二酯酶 IIRab25 (D4P6P) XP® Rabbit mAb基-5-硝基三氟甲
丁二酰亞(>98%,BR)Phospho-ATM (Ser1981) (D25E5) Rabbit mAb2-甲氧基氧基酸酯
聯(lián)單酸SimpleChIP® Human IFN-γ Promor Primers2-吡啶
5-溴尿苷(>99%,BR)STAM1 Antibody-羥基-2(1H)-羥基吡啶
ADA緩沖液二鈉鹽(>99%,BR)DyLight™ 554 Phalloidin2,5-二-4,6-二甲基煙
無蛋白酶牛血清白蛋白PX-8664,4'-二二砜
六水化鋁DAZL (D2A4) Rabbit mAb (IHC Specific)癸基噻吩
硬脂酸鋁SimpleChIP® Mouse ATF-3 Intron 1 Primers酰肼
氟化銨(>95%,BR)VAMP8 Antibody2-氟-甲基吡啶-5-酸
對甲氧基甲(>98%,BR)Phospho-α-E-Canin (Ser652) Antibody2-溴-6-氟三氟甲
鉍試劑III(>99%,BR)AGR2 (D9V2F) XP® Rabbit mAb2-氨基-5-溴-甲氧基吡
金酸鈉 金含量,48% RNA聚合酶相關(guān)蛋白LEO1抗體血液樣品固著液(Acetic alcohol固著液) 乳清酸一水合物 98%芥子 (芥)磷酸銀 銀含量, 77.0 % 淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病蛋白抗體血液樣品組織蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性比色法定量檢測試劑盒錳 SP,粉末鉤藤四(三基膦)鈀(0) 99.8% metals basis, Pd 9.0%自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3A/3B抗體血液一氧化氮(NO)活性比色法定量檢測試劑盒金屬錳片 99.9% metals basis,不規(guī)則片狀蘆筍間 CP,98%黃體激素釋放激素/促性腺激素釋放激素抗體血液一氧化氮(NO)活性熒光定量檢測試劑盒錳粉 99.99% metals basis,粉末葡醛酸鈉間 GCS,>99.5%(GC)LRRC23蛋白抗體血液一氧化氮合成酶總活性比色法定量檢測試劑盒錳標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml非那雄胺間 GR,99%LRRC39蛋白抗體血液一氧化氮合成酶總活性比色法定量檢測試劑盒錳標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000mg/L,溶劑:1%硝酸3-磷酸甘油醛脫氫酶間 分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析,>99.6%(GC)自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體血液一氧化氮合成酶總活性熒光定量檢測試劑盒錳標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L,溶劑:1%硝酸磷酸甘油醛脫氫酶(小鼠來源)IHC WB2,3-二酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品L3MBTL3蛋白抗體血液乙脫氫酶III(S-亞硝基谷胱苷肽還原酶)活性比色法定量檢測試劑盒水質(zhì)錳標(biāo)樣 1.96mg/L in H2O,分析標(biāo)準(zhǔn)品多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體流式免疫組化