公司采用的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無(wú)效包退包換,公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱 | 魚(yú)白三烯B4(LTB4)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Fish Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit |
貨號(hào) | GOY-F74860 |
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時(shí);
3. 吸棄,加檢測(cè)溶液A100µL,37°C孵育1小時(shí);
4. 洗板3次;
5. 加檢測(cè)溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
?
樣品收集、處理及保存:
1).細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過(guò)反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
?
檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測(cè)吸光值。
魚(yú)白三烯B4(LTB4)elisa試劑盒操作步驟:
1)運(yùn)用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時(shí)參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
2)依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來(lái)定,能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測(cè)樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測(cè)定成果。
9)在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。
甲合次硫酸氫鈉(>98%,BC)Phospho-BMAL1 (Ser42) Antibody2--氟
酸性品紅鈣(>60%,BS)Symmetric Di-Methyl Histone H3 (Arg8) (E1W5H) Rabbit mAb(2-羥基)酸
加拉銨(>98%,BR)Acetyl-Histone H4 (Lys12) (D2W6O) Rabbit mAb氧化
D-氨基葡萄糖硫酸鈉鹽INTS9 Antibody氫醌
葡萄糖-6-酸脫氫酶Na Channel β1 Subunit (D4Z2N) Rabbit mAb嗎啉酸鹽酸鹽
戊二酸(>98%,BR)Prestained Proin Marker4'-氟-2-羥基酮
戊二酸酐(>96%,BR)Prestained Proin Marker2--4,6-二基嘧啶
三醋酸甘油酯(>98%,BR)Prestained Proin Marker7-溴-1H-吲唑
甘氨酸鈉(>98%,BR)DEK (E1L3V) Rabbit mAb甲基吡啶-N-氧化物
酸(>98%,BR)Na Channel β2 Subunit (D6L5Y) Rabbit mAb1-基環(huán)戊
硬脂酸單甘油酯(>98%,BR)Tri-Methyl-Histone H3 (Lys9) (D4W1U) Rabbit mAbN-[基-(三氟甲基)基]甲基環(huán)氧酰
化金Tri-Methyl-Histone H3 (Lys9) (D4W1U) Rabbit mAb(2S)-(+)-縮水甘油基對(duì)甲磺酸酯
石墨粉(>99%,BR)LMAN1 (E2B6H) Rabbit mAb硝基-溴
硝酸胍(分子生物學(xué)級(jí))MDR1/ABCB1 (E1Y7S) Rabbit mAb溴丁
己二(>98%,BR)Claudin-1 (D3H7C) Rabbit mAb2-基-4,5-咪唑二羧酸二甲酯
六甲基酰三(>98%,BR)Viperin (D5T2X) Rabbit mAbN-基正丁
還原茚三酮二水合物(>98%,BR)Acetyl-Histone H3 (Lys18) (D8Z5H) Rabbit mAb6-氧基-2-巰基并噻唑
(>40%,BC)Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-氟芐基肼
一化 AR麻疹病融合蛋白抗體魚(yú)類(lèi)受精卵細(xì)胞凍存試劑盒(超低溫)鈉 99.7%胸腺肽 α-1抗體流式免疫組化一化 ACS紅細(xì)胞膜蛋白55抗體魚(yú)類(lèi)受精卵細(xì)胞凍存試劑盒(低溫)鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlL-酪氨酸二鈉鹽三化 AR,97.0%膜相關(guān)環(huán)指蛋白5抗體魚(yú)類(lèi)組織汞元素比色法定量檢測(cè)試劑盒鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L,溶劑:水L-丙氨酸乙酯鹽酸鹽2,3-二 98%磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C抗體魚(yú)類(lèi)組織汞元素?zé)晒舛繖z測(cè)試劑盒鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000µg/mL,基體:1%HClN-甲酰-L-酪氨酰乙酯N-氨乙基哌 99%線粒體核糖體蛋白MRP63抗體魚(yú)類(lèi)組織砷元素比色法定量檢測(cè)試劑盒鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 100µg/mL,基體:1%HClD-果糖-1,6-二磷酸三鈉聚乙亞胺 M.W. 600, 99%磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C抗體玉米樣品處理試劑盒鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液1.50mg/L,水質(zhì)標(biāo)樣4-硝基乙酰胺聚乙亞胺 M.W. 1800, 99% 基質(zhì)金屬蛋白酶13抗體玉米葉片原生質(zhì)細(xì)胞分離試劑盒鈉 CP,98.0%聚乙二醇600聚乙亞胺 M.W. 10,000, 99%酪氨酸單氧化酶微管相關(guān)蛋白MICAL抗體原生質(zhì)酵母細(xì)胞轉(zhuǎn)化試劑盒溴, 包含≤1000 ppm 氧化穩(wěn)定劑, 98%次亞磷酸鈉