特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號(hào) |
對(duì)蝦黃頭病病毒(YHV)核酸定性檢測試劑盒 | RT-PCR法 | FS-P10675 |
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
紅緣擬層孔菌生長條件: 26培養(yǎng)基: 14菌蓋或菌柄提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no 定期移植法
-1044℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
交替單胞菌培養(yǎng)基: 471產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)蛋白酶、淀粉酶菌株水樣/深海海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
豌豆根瘤菌培養(yǎng)基: 0063模式菌株: no根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長條件: 28-30℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法
惡臭假單孢菌工程菌,汞離子誘導(dǎo)發(fā)光模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 33生長條件: 28℃
寬松環(huán)單頂孢培養(yǎng)基: 18模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長條件: 25-28℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
豬丹絲菌血清定性模式菌株: no丹豬脾提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2培養(yǎng)基: 396生長條件: 37
刺孢小克銀漢霉原變種生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-1045℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
擬青霉進(jìn)行分析檢測及抗病性鑒定,指導(dǎo)。模式菌株: no蟲草提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 66生長條件: 25
鹽田菌培養(yǎng)基: 471海洋細(xì)菌水樣/深層海水提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 4℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
蘇云金芽胞桿菌培養(yǎng)基: 0002殺雙翅目昆蟲土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法
灰葡萄孢培養(yǎng)基: 0014模式菌株: no腐爛葡萄提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
枯草芽孢桿菌淀粉酶模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃
南方鹽單胞菌潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自十溴聯(lián)醚富集菌群模式菌株: no沉積物/TVG表層沉積物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃
-1046℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
2,5-二酚
N-甲基-D-天冬
4-硝基二甲
3-基)(基)硫脲
2-Chlorophenyl isocyanate 鄰異酯 3320-83-0
S-ADENOSYL-L-MINE S-腺苷蛋 17176-17-9
3-Chloropropyl isocyanate 3-丙基異酯 13010-19-0
tert-Butylisocyanate 叔丁基異酯 1609-86-5
大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)ELISA試劑盒 ,英文名: AIL-R3 ELISA Kit
人落葉型天皰瘡抗體(PF)ELISA檢測試劑盒HumanPemphigusFoliaceus,PFELISAKit 96T/48T
大鼠層粘連蛋白亞基γ-2(LAMC2)免疫試劑盒 Rat Laminin subunit gamma-2,LAMC2 ELISA kit
CLIAKitfoNF-Beta(HumaumornecrosisfactorBeta)ELISAKIT人腫瘤壞死因子β規(guī)格:48T/96T
全組織琥珀脫氫酶活性染色試劑盒10次
ELISAKitBPI-Ab人抗殺菌通透性蛋白抗體規(guī)格:48T/96T
對(duì)蝦黃頭病病毒(YHV)核酸定性檢測試劑盒甜茶苷64849-39-4中文別名:甜茶素、甜茶甙
英文名:Rubusoside
英文別名:);(4alpha)-13-(beta-D-Glucopyranosyloxy)kaur-16-en-18-oic acid beta-D-glucopyranosyl ester
登錄號(hào):64849-39-4
分子式:C32H50O13
分子量:642.73
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色柱狀結(jié)晶
規(guī)格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來源:薔薇科懸鉤子屬的落葉灌木甜茶( Rubus suavissimus S. Lee )
溶解性:易溶于水、、乙醇等極性溶劑。
熔點(diǎn):176-179℃
旋光度:-33°(95%乙醇)
藥理藥效:降血糖、降血壓、促進(jìn)新陳代謝
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年