服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號(hào) |
甲型H1N1流感病毒(2009)核酸檢測(cè)試劑盒 | 熒光PCR法 | FS-P9631 |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
phospho-Androgen Receptor (Ser578) 磷酸化雄激素受體抗體
APE1 多功能DNA修復(fù)酶抗體
AAK1 AP2關(guān)聯(lián)激酶1抗體
AQP1 水通道蛋白1抗體
AATK AATK細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪氨酸激酶抗體
ABCB5 ATP結(jié)合蛋白家族5抗體
APNG N-甲基嘌呤DNA糖基化酶
AU5 tag AU5 tag標(biāo)簽抗體
ATP2c1 鈣離子ATP酶通道蛋白抗體
alpha-L-arabinofuranosidase 果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗體
Apelin 脂肪炎癥因子Apelin抗體
ATP4B 氫鉀ATP酶通道蛋白抗體
ATP5A ATP5A抗體
Arg3.1 即刻早期基因ARC抗體
ARF6 ADP核糖基化因子6抗體
Aromatase 芳香化酶抗體
Artemin Artemin抗體
ADRA1A alpha 1腎上腺素能受體A抗體
Angiotensin II Type 1 Receptor 血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體
ATF3 活化轉(zhuǎn)錄因子3抗體
APJ Receptor 血管緊縮素樣蛋白1抗體
APG7 自噬相關(guān)蛋白7抗體
ANTXR2 炭疽毒素受體2抗體
ATG4C 自噬相關(guān)蛋白4C抗體
APG5L 自噬蛋白5/細(xì)胞凋亡的特異性蛋白抗體
IGFBP-3 ELISA Kit 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒
IGFBP2 ELISA Kit 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA試劑盒
IGFBP-1 ELISA Kit 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒
IGFBP-3 ELISA Kit 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋3(IGFBP-3)ELISA試劑盒
IGFBP-2 ELISA Kit 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋2(IGFBP-2)ELISA試劑盒
IGFBP-1 ELISA Kit 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋1(IGFBP-1)ELISA試劑盒
IGF-2R ELISA Kit 胰島素樣生長(zhǎng)因子2受體(IGF-2R)ELISA試劑盒
IGF-2 ELISA Kit 胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒
IGF2BP2 ELISA Kit 胰島素樣生長(zhǎng)因子2 mRNA結(jié)合蛋白2(IGF2BP2)ELISA試劑盒
IGF-1 ELISA Kit 胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒
IRS-2 ELISA Kit 胰島素受體底物2(IRS-2)ELISA試劑盒
IRS1 ELISA Kit 胰島素受體底物1(IRS1)ELISA試劑盒
ISR-β ELISA Kit 胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒
INSRA ELISA Kit 胰島素受體α(INSRA)ELISA試劑盒
IGF-Ⅱ ELISA Kit 胰島素生長(zhǎng)因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)ELISA試劑盒
IGF-Ⅰ ELISA Kit 胰島素生長(zhǎng)因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)ELISA試劑盒
Anti-Ins ELISA Kit 胰島素抗體(Anti-Ins)ELISA試劑盒
IDE ELISA Kit 胰島素降解酶(IDE)ELISA試劑盒
INS ELISA Kit 胰島素(INS)ELISA試劑盒
IAPP ELISA Kit 胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒
TAP ELISA Kit 胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒
Try-Ⅱ ELISA Kit 胰蛋白酶原Ⅱ(Try-Ⅱ)ELISA試劑盒
trypsin ELISA Kit 胰蛋白酶(trypsin)ELISA試劑盒
CPAF ELISA Kit 衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒
HbCO ELISA Kit 一氧化碳血紅蛋白(HbCO)ELISA試劑盒
NO ELISA Kit 一氧化化氮(NO)ELISA試劑盒
NOS ELISA Kit 一氧化氮合酶(NOS)ELISA試劑盒
NOS ELISA Kit 一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒
NO ELISA Kit 一氧化氮(NO)ELISA試劑盒
FOLR1 ELISA Kit 葉酸受體α(FOLR1)ELISA試劑盒
FOLR ELISA Kit 葉酸受體(FOLR)ELISA試劑盒
FA ELISA Kit 葉酸(FA)ELISA試劑盒
GSSG ELISA Kit 氧化型谷胱甘肽(GSSG)ELISA試劑盒
OxLDL ELISA Kit 氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒
Ox-HDL ELISA Kit 氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)ELISA試劑盒
OLAb ELISA Kit 氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒
OxLDL ELISA Kit 氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒
PRDX4 ELISA Kit 氧還原蛋白過氧化物酶4(PRDX4)ELISA試劑盒
EloA ELISA Kit 延伸蛋白A(EloA)ELISA試劑盒
NADPH ELISA Kit 煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒
甲型H1N1流感病毒(2009)核酸檢測(cè)試劑盒NAD ELISA Kit 煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)ELISA試劑盒
CEMP-1 ELISA Kit 牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP-1)ELISA試劑盒
DMP1 ELISA Kit 牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)ELISA試劑盒
CIC ELISA Kit 循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA試劑盒
spectrin ELISA Kit 血影蛋白(spectrin)ELISA試劑盒
PDGFsR-α ELISA Kit 血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒
PCR檢測(cè)試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?br />(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。