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產(chǎn)品名稱:ICDHc胞漿異檸檬酸脫氫酶紫外分光光度法
規(guī)格:50管/48樣
檢測方法:紫外分光光度法
貨號:FS-01S63245
商品介紹:
測定意義 ICDHc(EC 1.1.1.42)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,催化異檸檬酸脫氫脫羧生成 α-酮戊二酸,同時還原NADP+生成NADPH。ICDHc是細胞質(zhì)中除了磷酸戊糖途徑外又一種NADPH重要來源,在逆境中該酶活性通常會發(fā)生顯著變化。 測定原理: 利用ICDHc催化NADP+還原成NADPH反應(yīng),在340 nm下測定NADPH濃度的增加。 所需的儀器和用品: 紫外分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
粗酶液提取:
1、細胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
豬叉頭框蛋白O2(FOXO2)聯(lián)免疫試劑盒枯草芽孢桿LCP1 Antibody
豬Nesfatin 1蛋白 (NES1)聯(lián)免疫試劑盒 黏著玫瑰變色hnRNP Q/R Antibody
豬相關(guān)漿蛋白A(PAPPA)聯(lián)免疫試劑盒球孢白僵FoxA1/HNF3α (E7E8W) Rabbit mAb
豬普通急性白血病抗原(CALLA)聯(lián)免疫試劑盒 球孢白僵SimpleChIP® Human HMOX1 Promoter Primers
豬半乳糖苷β(GLβ)聯(lián)免疫試劑盒雅致放射毛霉Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
豬趨化樣因子超家族成員4(CKLFSF4)聯(lián)免疫試劑盒大腸埃希NME1/NDKA (D14H1) Rabbit mAb
豬蛋白激C(PKC)聯(lián)免疫試劑盒銅綠假單胞EGF Receptor (L858R Mutant Specific) (43B2) Rabbit mAb (Biotinylated)
豬神經(jīng)營養(yǎng)性酪激2型受體(NTRK2)聯(lián)免疫試劑盒Enterobacter cowanii Inoue et al. PathScan® Total MUC1 Sandwich ELISA Kit
豬肝配蛋白A4 (EFNA4)聯(lián)免疫試劑盒克魯弗酵母SimpleChIP® Mouse Ccdc57 Intron 5 Primers
豬成纖維生長因子9(FGF9)聯(lián)免疫試劑盒熱帶假絲酵母Phospho-NMDA Receptor 2B (GluN2B) (Ser1284) Antibody
豬骨髓前體抑制因子1(MPIF-1/CCL23)聯(lián)免疫試劑盒蠟狀芽孢桿HDAC1 (10E2) Mouse mAb
豬脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)聯(lián)免疫試劑盒 短密青霉HDAC1 (10E2) Mouse mAb
豬腸脂肪結(jié)合蛋白(IFABP)聯(lián)免疫試劑盒黃曲霉SHOC2 (D7N1A) Rabbit mAb
豬蛋白(NPHN)聯(lián)免疫試劑盒香氣紅冬孢鎖擲孢酵母Histone H2A.X (D17A3) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
豬胎球蛋白A(FETUA)聯(lián)免疫試劑盒 谷棒桿Ⅰ型SirT7 (D3K5A) Rabbit mAb
ICDHc胞漿異檸檬酸脫氫酶紫外分光光度法周期M2抗體Human ADAMTS7(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 7) ELISA Kit人肺癌標志物DR-70(DR-70TM)ELISA試劑盒,DR-70TM ELISA kit
周期T2抗體Human EDA(Ectodysplasin-A) ELISA Kit人乙酰肝(HPA)ELISA試劑盒,HPA ELISA kit
周期K抗體Human TNC(Tenascin) ELISA Kit人抗存活抗體/生存蛋白(Surv)ELISA試劑盒,Surv ELISA kit
抗肽CAMP抗體Human IL36A(Interleukin-36 alpha) ELISA Kit人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA試劑盒,EMA IgA ELISA
5號染色體開放閱讀框4抗體Human HPX(Hemopexin) ELISA Kit人衣原體蛋白樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒, CPAF ELISA
4號染色體開放閱讀框44抗體Human MAPT(Microtubule-associated protein tau) ELISA Kit人流感病抗體IgG(FLU)ELISA試劑盒,FLU ELISA
4號染色體開放閱讀框33抗體Human TLR5(Toll-like receptor 5) ELISA Kit人雌受體(ER)ELISA試劑盒,ER ELISA
4號染色體開放閱讀框42抗體Human PRKACB(cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit beta) ELISA Kit人3-羥基-3-甲基戊二酰A合1(HMGCS1)ELISA試劑盒,HMGCS1 ELISA