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產(chǎn)品名稱:G6PDH6磷酸葡萄糖脫氫酶檢測試劑盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63242
商品介紹:
測定意義 G6PDH(EC 1.1.1.49)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,是磷酸戊糖途徑的關鍵酶,催化 6-磷酸葡萄糖氧化為 6 -磷酸葡萄糖酸內(nèi)酯,同時將NADP+還原為NADPH,供生物合成及維持細胞內(nèi)的還原狀態(tài)用。因此6-磷酸葡萄糖脫氫酶活性的高低可以從一定程度上反映出生物體的生物合成和抗氧化能力。 測定原理: G6PDH催化NADP+還原生成NADPH,在340 nm下測定NADPH增加速率。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
1、細胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
豬谷脫氫(GDH/GLDH)聯(lián)免疫試劑盒 少根根霉PTMScan® Phospho-Tyrosine Mouse mAb (P-Tyr-100) Kit
豬黏膜地址黏附分子(MAdCAM1)聯(lián)免疫試劑盒蟲草SimpleChIP® Plus Sonication Chromatin IP Kit
豬信號7A(SEMA7A)聯(lián)免疫試劑盒黃曲霉Phospho-TNK1 (Tyr277) (D46E7) Rabbit mAb
豬內(nèi)皮受體B(ETRB)聯(lián)免疫試劑盒松果鏈霉CD44 (8E2) Mouse mAb
豬白介11(IL-11)聯(lián)免疫試劑盒黑馬朗假絲酵母Ubc12 (D13D7) Rabbit mAb
豬B激活抗原B7-2(LAB7-2/CD86)聯(lián)免疫試劑盒大腸埃希氏Helios (D8W4X) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
豬心臟肌球蛋白結合蛋白C(MYBPC3)聯(lián)免疫試劑盒 間型假絲酵母PRAME (E7I1B) Rabbit mAb
豬生存(Surv)聯(lián)免疫試劑盒雷丸Phospho-SGK3 (Thr320) (D30E6) Rabbit mAb
豬泛結合E2C(UBE2C)聯(lián)免疫試劑盒 蘇云金芽孢桿蠟螟亞種IDH2 (D8E3B) Rabbit mAb
豬甘露糖受體C2 (MRC2)聯(lián)免疫試劑盒 枯草芽孢桿Presenilin 1 (D39D1) Rabbit mAb
豬Ⅸ(F9)聯(lián)免疫試劑盒石楠炭疽病Presenilin 1 (D39D1) Rabbit mAb
豬信號傳導轉錄激活因子4(STAT4)聯(lián)免疫試劑盒白假絲酵母Phospho-TACC3 (Ser558) Antibody
豬絲裂原激活蛋白激(MAPK)聯(lián)免疫試劑盒 蠟樣芽胞桿MTA1 (D17G10) Rabbit mAb
豬端粒相關蛋白1(TEP1)聯(lián)免疫試劑盒黑曲霉MTA1 (D40D1) XP® Rabbit mAb
豬八聚體轉錄因子2B(OTF2B)聯(lián)免疫試劑盒 三葉草根瘤MTA1 (D40D1) XP® Rabbit mAb
G6PDH6磷酸葡萄糖脫氫酶檢測試劑盒微量法乙二叔丁 99%一溴化 98%Pentosidine ELISA Kit 大鼠戊糖
二乙二二甲 ≥99.5% (GC)氯化亞鐵,無水 99.5%,粉末AGEs ELISA Kit 大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物
三乙二二甲 99%2-異氧基乙 99%NGAL ELISA Kit 大鼠中性粒明膠相關脂質(zhì)運載蛋白
1,3,5-三氯 99%2-異基 97%Hp-IgG ELISA Kit 大鼠幽門螺旋菌IgG
四乙二二甲 99%1,3-茚滿二酮 97%ER ELISA Kit 大鼠雌受體
鈦異酯 98%4- 98%Beta-DF ELISA Kit 大鼠β-防御
鈦異酯 99.999% metals basis吲哚乙酯 97%D1R ELISA Kit 大鼠多巴D1受體
六氯三聚磷 98%菊糖 BCADRA1A ELISA Kit 大鼠腎上腺能a1A受體