商品介紹:
測定意義 MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH,細菌中通常只含有NAD-MDH,在真核細胞中,NAD-MDH分布于細胞質(zhì)和線粒體中。 測定原理: NAD-MDH催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導致340nm處光吸收下降。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后完善。服務于高校及免疫學科研單位,竭誠為您提供更周到的服務更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱:NADMDHNAD蘋果酸脫氫酶檢測試劑盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63216
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
粗酶液提?。?/span>
1、細胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
紫色直絲鏈霉Sheep CG (Chorionic Gonadotropin) ELISA Kit
秀珍菇Sheep IL-24 (Interleukin 24) ELISA Kit
節(jié)桿屬Sheep AP (Allopregnanolone) ELISA Kit
香菇Sheep AQP-2 (Aquaporin 2) ELISA Kit
中國漢納酵母Sheep COL3 (Collagen Type Ⅲ) ELISA Kit
黑曲霉Sheep ApoA5 (Apolipoprotein A5) ELISA Kit
干酪乳桿Sheep ACCPA (anti-cyclic citrullinated peptide antibody) ELISA Kit
鹵水糖螺Sheep Ta1 (Thymosin-α1) ELISA Kit
漢遜德巴利酵母Sheep PS1 (Presenilin 1) ELISA Kit
鐘器腐霉Sheep PACAP-38 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 38) ELISA Kit
柑橘青霉Sheep PACAP-27 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 27) ELISA Kit
北京芽孢桿Sheep NOS2/iNOS (Nitric Oxide Synthase 2, Inducible) ELISA Kit
黑根霉Sheep IL-5 (Interleukin 5) ELISA Kit
歐文氏屬GHRL (Ghrelin) ELISA Kit
固氮GHRL (Ghrelin/Obestatin Preprohormone) ELISA Kit
NADMDHNAD蘋果酸脫氫酶檢測試劑盒微量法乙 for HPLC, >99.0%(GC),含2%乙作穩(wěn)定劑氣相納米二氧化硅 99.8%,比表面積(BET):200m2/g;氯化物:0.01Anti-IFN- Beta/FITC 熒光標記抗人干擾-β抗IgG
二甲基黃 indicator氣相納米二氧化硅 99.8%,比表面積(BET):300m2/g;粒徑:7-40nAnti-IFN- Gamma/FITC 熒光標記干擾-γ抗體IgG
砷試劑 AR,99.0%氣相納米二氧化硅 99.8%,比表面積(BET):170m2/g;粒徑:7-40nAnti-IFN- Gamma/FITC(Interferon Gamma) 熒光標記抗大、小鼠IFN-γ抗IgG
1,2-二氯乙烷 standard for GC,>99.9%(GC)氣相納米二氧化硅 99.8%,比表面積(BET):120m2/g;粒徑:7-40nAnti-IFNGR2/FITC 熒光標記干擾-gamma受體2抗體IgG
1,3-二基-4-(5-溴-2-吡偶氮) AR疏水氣相納米二氧化硅 99.8%,比表面積(BET):230m2/g;;粒徑:7-40nAnti-IFN- Gamma/HRP 辣根過氧化物標記鼠抗人干擾-γ/IFN-gamma單克隆抗體IgG
2-(3,5-二溴-2-吡偶氮)-5-二乙基 AR氣相納米二氧化硅 99.8%,比表面積(BET):100m2/g;粒徑:7-40nAnti-IFNGR1/CD119/FITC 熒光標記干擾-gamma受體抗體IgG
二乙基乙基纖維-1 TLC二氧化硅 99.5%,30±5nmAnti-IGC/FITC 熒光標記兔抗非洲爪蟾IGC抗體IgG
二甲基黃 分析標準品,≥98.0% (HPLC)二氧化硅 99.5%,15±5nmAnti-IGF-I/FITC 熒光標記標記胰島樣生長因子-I抗體IgG
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。