轉(zhuǎn)染試劑正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：CCL19/MIP-3 beta 巨噬炎性蛋白19抗體全氟辛 , 用于環(huán)境分析
CCL26/Eotaxin 3 嗜粒趨化蛋白3抗體2,4,6-三磺 5 % (w/v) 水溶液
CCL27/CTACK 皮膚T虜獲趨化因子抗體2-硫 96%
Dectin-1/CLECSF12 C型凝集結(jié)構(gòu)域家族7成員A姥鮫烷 98%
CCR-1 表面趨化因子受體1抗體4-(1-吡咯烷
產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)： ◆ 一步轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染前和轉(zhuǎn)染后均不需要換液，操作簡(jiǎn)單； ◆ 高轉(zhuǎn)染效率，低細(xì)胞毒性，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)無(wú)影響； ◆ 對(duì)貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染或穩(wěn)定轉(zhuǎn)染均有效； ◆ 適用于微孔板轉(zhuǎn)染，也適用于生物反應(yīng)器的大量轉(zhuǎn)染； ◆ 高效轉(zhuǎn)染很多細(xì)胞，如293, CHO, COS-7, HeLa, HepG2, MDCK, PC12, HT29, NIH-3T3, MCF7, Vero,SF9等。 保存條件：4°保存，一年有效。 |
中文名稱(chēng)：轉(zhuǎn)染試劑
英文名稱(chēng)：
產(chǎn)品規(guī)格：0.75ml/1ml/1.5ml
貨號(hào)：FS-X9727
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
白介1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)英文名：IL-1sRⅡ 炭疽桿菌抗體包裝1g
白介1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)英文名：IL-1sRⅠ 腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白抗體包裝1g
白介1β前體(pro-IL1B)英文名：pro-IL1B 血管緊張Ⅱ1A型受體抗體包裝250mg
白介1β(IL－1β)英文名：IL－1β ABI1/SSH3BP1蛋白抗體包裝25g
白介1β(IL-1β)英文名：IL-1β 乙?；M蛋白H1b抗體包裝5g
白介1α(IL－1α)英文名：IL－1α 磷化雄激受體抗體包裝1g
白介1α(IL-1α)英文名：IL-1α 多功能DNA修復(fù)抗體包裝5g
白介18結(jié)合蛋白(IL-18BP)英文名：IL-18BP AP2關(guān)聯(lián)激1抗體包裝1g
白介18(IL－18)英文名：IL－18 通道蛋白1抗體包裝200mg
白介18(IL-18)英文名：IL-18 AATK凋亡關(guān)聯(lián)酪激抗體包裝100mg
白介17A(IL－17A)英文名：IL－17A ATP結(jié)合蛋白家族5抗體包裝25g
白介17(IL－17)英文名：IL－17 N-基嘌呤DNA糖基化包裝5g
白介16(IL-16)英文名：IL-16 AU5 tag標(biāo)簽抗體包裝1g
白介15(IL-15)英文名：IL-15 鈣離子ATP通道蛋白抗體包裝5g
白介13(IL－13)英文名：IL－13 果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷抗體包裝1g
磷化促腎上腺皮質(zhì)激ACTH抗體基質(zhì)金屬蛋白10(MMP10)ELR510444是新型微管阻斷劑，抑制MDA-MB-231增殖的IC50值為30.9nM，非P-gp底物分子。
轉(zhuǎn)染試劑蠟樣芽孢桿 N-3,4-二苯(基)硫脲抗肝腎微粒體抗體
板栗蛇孢日規(guī)殼 4-叔丁基苯基異酸酯抗肝PF4復(fù)合物抗體;HIT抗體
高加索異常倚囊霉 5-溴-2-甲基-4-硝基-1H-咪唑抗肝特異性脂蛋白抗體
外來(lái)毛霉橙色變種 2--1,3-二溴苯抗肝膜抗體
累四菲鏈霉 反-4,4'-二溴芪抗核抗體
鞘氨桿屬 5--2-并惡唑抗核周因子抗體
三葉草根瘤 4-異喹啉酸抗環(huán)瓜氨酸肽抗體
棒桿 溴化1-癸基-3-甲基咪唑抗肌聯(lián)蛋白抗體
黃灰鏈霉 5-甲基噻吩-2-羧酸抗甲型肝炎病IgG抗體
云芝栓孔（變色栓） 4-溴-2-氟芐抗甲型肝炎病IgM抗體
鐘器腐霉 1,4-二硝基咪唑抗甲狀腺過(guò)氧化物抗體
黑曲霉 啶?？辜谞钕偾虻鞍卓贵w
頭孢屬 5-甲氧基-2-呋喃甲抗甲狀腺微粒體抗體
類(lèi)諾卡氏 2,3-二-4-抗角蛋白絲聚集;絲集蛋白抗體
點(diǎn)枝頂孢 1-甲基-3-乙酸抗酸性磷酸
