操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
25ml | FS-X9801 |
產(chǎn)品介紹:
姬姆薩染料為天青色素、次甲藍的混合物,本染色液適于血液涂抹標本、血球、瘧原蟲、立克次體以及骨髓細胞、脊髓細胞等的染色。 染前用蛋白酶等進行處理,然后再用姬姆薩染液染色,在染色體上,可以出現(xiàn)不同濃淡的橫紋樣著色。姬姆薩染液可將細胞核染成紫紅色或藍紫色,胞漿染成粉紅色,在光鏡下呈現(xiàn)出清晰的細胞及染色體圖像。 試劑盒組份: 10×姬姆薩染色原液 25mL 10×姬姆薩稀釋液 25mL 染色步驟1.根據(jù)需要量,取8ml 雙蒸水,加入姬姆薩原液1ml,再加入姬姆薩稀釋液1ml,混勻即為工作液,此工作液常溫可保存兩周(如果無法短期用完,請確保姬姆薩原液不要見到水或者其他緩沖液)。2.按常規(guī)方法制備血涂片,待血膜干后,用甲醇固定2~3 分鐘;3.將血涂片或骨髓涂片放置染色架上,滴加2~3 滴染色工作液,使覆蓋全部血膜(具體用量視樣品大小而定),室溫染色15~30 分鐘。4.用自來水緩慢從玻片一端沖洗(注意勿先倒去染液或直接對血膜沖洗),涼干后鏡檢。 四、注意事項1.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。2.如果染色過濃或者過淡,請調(diào)整姬姆薩原液加入量(姬姆薩原液常用的稀釋比例是10 倍,但有時候可能會稀釋5 倍或者15 倍)。3.姬姆薩原液采用常規(guī)方法配制(姬姆色素:甘油:甲醇=1:66:66),請在使用時小心不要接觸到水。否則時間長了會失效。 儲存:2~8℃,避光,有效期12個月。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
泛(Ub)英文名:Ub 原癌基因CD39樣蛋白4抗體包裝100g
泛醌C還原核心蛋白Ⅱ(UQCRC2)英文名:UQCRC2 膠原樣蛋白抗體包裝500g
翻譯調(diào)節(jié)腫瘤蛋白1(TPT1)英文名:TPT1 腫瘤易感性候選基因5抗體包裝5g
法尼酯X受體(FXR)英文名:FXR 鈣調(diào)蛋白激激β抗體包裝1g
二?;视?/span>(DAG)英文名:DAG 中心體肌動蛋白γ1/增強型PI3K蛋白抗體包裝5g
二酰甘油-O-?;D(zhuǎn)移同源物1(DGAT1)英文名:DGAT1 分裂周期相關(guān)蛋白JPO2抗體包裝100g
二肽基肽Ⅳ(DPP4)英文名:DPP4 半胱蛋白-2抗體包裝25g
二肽基肽9(DPP9)英文名:DPP9 7號染色體開放閱讀框63抗體包裝25g
二肽基肽8(DPP8)英文名:DPP8 CD2結(jié)合蛋白3抗體包裝5g
二氫乳清脫氫(DHODH)英文名:DHODH 膠原三股螺旋重復(fù)蛋白1抗體包裝5g
二氫嘧啶脫氫(DPYD)英文名:DPYD 20號染色體開放閱讀框72抗體包裝100g
二氫硫辛轉(zhuǎn)乙?;?/span>(DLAT)英文名:DLAT 2號染色體開放閱讀框6抗體包裝25g
二氫硫辛脫氫(DLD)英文名:DLD CD318抗體包裝5g
二級淋巴組織趨化因子(SLC)英文名:SLC 著絲粒蛋白B抗體包裝25g
兒茶酚-O-基轉(zhuǎn)移(COMT)英文名:COMT 1號染色體開放閱讀框111抗體包裝5g
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品孕受體試劑盒延胡索;Corydaline
傳染性法氏囊病病毒禽雙RNA病毒屬│ 質(zhì)量規(guī)格:USP,進分sigmaD8809 孕和adipoQ 受體家族成員Ⅶ試劑盒月桂氮卓;Laurocapram
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,BR,可用于培養(yǎng)孕激誘導(dǎo)阻斷因子試劑盒油;cis-9-Octadecenoi
姬姆薩染液(10×)多色節(jié)桿 2-[2-(3-甲氧基苯)乙烯]膜結(jié)合HLA-G亞型
皮氏羅爾斯通氏 3-環(huán)戊烯-1-膜結(jié)合HLA-E亞型
產(chǎn)氣莢膜梭 D型 苯氧基乙酐艱難梭A
暗黃紫色小單孢 鉻鋰鞘氨激
Pseudomonas 2-吡啶基硫脲性神經(jīng)鞘磷脂
總狀毛霉原變型 甘錳二羥環(huán)氧苯并芘
釀酒酵母 6-氟煙甲酯神經(jīng)鞘磷脂
釀酒酵母 2-乙氧基乙乙酯葡萄糖-6-磷
巴西固氮螺 N,N-二乙基對苯二草鹽霍亂B亞基
咖啡擬盤多毛孢 H-D-Phe-Pna布病
少疣曲霉 反式-4-羥基-D-脯鹽鹽磷化腺活化蛋白激
冷溫木拉克酵母 骨特異性堿性磷
蘇云金芽胞桿 草鐵β-防御118
枯草芽孢桿 N-乙?;?D-半乳糖脫氧砒啶啉
戊糖片球 3--4-羧乙酯過氧亞硝基陰離子