天青石藍(lán)B染色液正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：sVEGFR2 可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2抗體N-芐異 97.0%
VEGFR3 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-3巴豆 98%
VEGFR-3 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-3抗體巴豆 Standard for GC，≥99.9% (GC)
Versican 蛋白聚糖Versican抗體巴豆酯 98%
Vimentin 波形蛋白抗體維生A 98%
Phospho-Vim
中文名稱(chēng)：天青石藍(lán)B染色液
英文名稱(chēng)：
產(chǎn)品規(guī)格：50ml|100ml
貨號(hào)：FS-X10054
產(chǎn)品介紹:
用途： 蘇木素染色 注意事項(xiàng)： 染色效果好于普通蘇木素伊紅染色。 儲(chǔ)存條件：4℃，避光，12個(gè)月 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
金黃殼囊孢4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框51抗體Human SMOX(Spermine oxidase) 人結(jié)核菌桿(TB)抗體(IgA)免疫試劑盒
海角副球菌分支GBE1抗體Human AMOT(Angiomotin) 人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒
擬莖點(diǎn)霉磷化絲切蛋白抗體Human P7(Caspase-7) 人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)免疫試劑盒
平田頭菇補(bǔ)體成分5受體1抗體Human NEFH(Neurofilament heavy polypeptide) 人結(jié)蛋白(DES)抗體免疫試劑盒
廣島鏈霉菌分裂周期2樣蛋白激6抗體Human HSD11B1(Corticosteroid 11-beta-dehydrogenase isozyme 1) 人結(jié)蛋白(Des)免疫試劑盒
硬結(jié)節(jié)桿菌補(bǔ)體C3IP1抗體Human SEMA3A(Semaphorin-3A) 人角化生長(zhǎng)因子(KGF)免疫試劑盒
果生鏈核盤(pán)菌磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體Human HRG(Histidine-rich glycoprotein) 人角化內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)免疫試劑盒
異常漢遜酵母變種周期依賴(lài)性激11抗體Human SMOX(Spermine oxidase) 人膠轉(zhuǎn)蛋白(TAGLN)免疫試劑盒
芬娜冬菇周期依賴(lài)性激10Human SSTR2(Somatostatin receptor type 2) 人膠質(zhì)系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌枯草亞種8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框86抗體Human P7(Caspase-7) 人膠原吡啶交聯(lián)(PYD)免疫試劑盒
特異青霉（產(chǎn)黃青霉）磷化分裂周期蛋白25B抗體Human NEFH(Neurofilament heavy polypeptide) 人降脂(Adipsin)免疫試劑盒
血痕韌革菌磷化分裂周期蛋白25B抗體Human AMOT(Angiomotin) 人降鈣原(PCT)免疫試劑盒
鹽古桿菌磷化半胱蛋白蛋白6抗體Human APLN(Apelin) 人降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒
高盧蜜環(huán)菌9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框172抗體Human GAS1(Growth arrest-specific protein 1) 人降鈣(CT)免疫試劑盒
球孢白僵菌磷化P27抗體/周期依賴(lài)激抑制劑Human MASP2(Mannan-binding lectin serine protease 2) 人堿性胎兒蛋白(BFP)免疫試劑盒
發(fā)酵成對(duì)桿菌表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體Human TFR2(Transferrin receptor protein 2) 人堿性磷(ALP)免疫試劑盒
冷海黃桿菌Flavobacterium│frigidimaris 質(zhì)量規(guī)格：AR白皮杉;
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：AR紫草呋喃A
外來(lái)毛霉Mucor│adventitius 質(zhì)量規(guī)格：IND光萼野百合堿;烏沙拉明 光萼豬屎豆堿;
天青石藍(lán)B染色液醋桿科 1,4-二代丁烷無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員7B
彎孢 2-羥基苯絲蛋白1
粉紅單端孢 鄰氨基苯鹽鹽易洛魁族同源盒基因5
紋孢青霉 三羧三乙酯接觸蛋白相關(guān)蛋白樣4
繩狀青霉 乙二二硬脂受體相互作用蛋白1
傳染性法氏囊病病 氟化氫吡啶絡(luò)合物受體相互作用蛋白3
發(fā)酵乳桿 3-(三氟甲氧基)苯甲酰過(guò)氧化物4
紐纏叢梗孢 二乙氫鹽,98%檢測(cè)Arl6ip5
孟氏假單胞 4-溴-2-(三氟甲基)苯甲肝癌源性生長(zhǎng)因子
假單胞屬 N-烯自噬相關(guān)蛋白5
松生擬層孔 Fmoc-Leu-OPfp自噬相關(guān)蛋白7
蘇云金芽孢桿 N-甲基正β-己糖亞基α
運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞運(yùn)動(dòng)亞種 6-羥基-2H-苯并呋喃-3-酮亞硝基還原
諾卡氏屬 FMOC-L-纈五氟苯酯補(bǔ)體成分1q受體
黃單胞 2--6-硝基喹喔啉腎母過(guò)度表達(dá)基因
