伊紅染液正在熱銷的產(chǎn)品：phospho-ERK1(Thr197/Thr202) 化絲裂原活化蛋白激1/2抗體丁酯 98%
Eph receptor B2/Ephb2 Ephb2抗體軟脂 standard for GC, ≥99% (GC)
ERK1/MAPK3 絲裂原活化蛋白激3抗體軟脂 AR
MAPK4 絲裂原活化蛋白激4抗體軟脂 CP
DUSP1/MKP-1 絲裂原活化蛋白激-1抗
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
中文名稱：伊紅染液
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：100ml
貨號(hào)：FS-X9800
產(chǎn)品介紹:
伊紅為一種紅色的酸性染料，可將細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞間質(zhì)染為粉紅色。水溶性伊紅組織學(xué)上用于上皮細(xì)胞、肌肉纖維和細(xì)胞漿染色。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，用于鑒別產(chǎn)酸性細(xì)菌的一種培養(yǎng)基添加劑。 染色的時(shí)間長(zhǎng)短需依據(jù)：染劑對(duì)細(xì)胞、組織的染色作用，室溫條件，涂片厚薄等進(jìn)行調(diào)節(jié)。所以在染色時(shí)必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時(shí)間。 操作方法 1. 涂片放空氣中自然干燥，甲醇固定5 分鐘，自來(lái)水小水流洗去固定液。 2. 滴加伊紅染液染色2 分鐘，流水洗去多余染液，濾紙吸干水分，鏡檢。 3. 鏡檢結(jié)果：胞漿呈紅色，紅細(xì)胞呈桔紅色，其它成分呈深淺不同紅色。 儲(chǔ)存：室溫避光，有效期一年。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
分泌型卷曲相關(guān)蛋白4(SFRP4)英文名：SFRP4 分裂周期蛋白7抗體包裝500mg
分泌型卷曲相關(guān)蛋白2(SFRP2)英文名：SFRP2 磷化分裂周期蛋白25抗體包裝1g
分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)英文名：SFRP1 分裂周期蛋白25B抗體包裝5g
分泌粒蛋白Ⅱ(SCG2)英文名：SCG2 磷化CD244抗體包裝250g
肺部激活調(diào)節(jié)趨化因子(PARC)英文名：PARC 神經(jīng)元電壓門控鈣通道γ3/L-type Ca++CP γ3抗體包裝50g
腓骨蛋白7(FBLN7)英文名：FBLN7 3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框25抗體包裝1g
肥胖抑制(OB)英文名：OB 轉(zhuǎn)錄激活因子MYB抗體包裝1g
肥大細(xì)胞類糜蛋白1(CMA1)英文名：CMA1 陽(yáng)離子通道相關(guān)蛋白1抗體包裝1g
防御β2(DEFβ2)英文名：DEFβ2 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框222抗體包裝1g
防御β1(DEFβ1)英文名：DEFβ1 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框15抗體包裝1g
防御α5(DEFα5)英文名：DEFα5 骨架相關(guān)蛋白4抗體包裝25g
防御α1(DEFα1)英文名：DEFα1 肌肽二肽1抗體包裝5g
芳香烴受體核轉(zhuǎn)位因子(ARNT)英文名：ARNT 性線粒體肌激抗體包裝10g
芳香烴受體(AhR)英文名：AhR 碳酐相關(guān)蛋白8抗體包裝25g
泛結(jié)合E2A(UBE2A)英文名：UBE2A 鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體包裝5g
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：≥930μg/mg,BR,可用于培養(yǎng)載脂蛋白A1試劑盒8-氧黃連堿 ;
: Vi-1,8382資源名稱: 傷門氏菌 質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定運(yùn)狀腺蛋白/前白蛋白試劑盒異澤蘭黃;Eupatilin
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：純度大于97%含量84.0-102%,USP30孕烯試劑盒異橙黃;Isosinensetin；3
伊紅染液停乳鏈球 1-Boc-2-基吡咯烷絲蛋白抑制因子1
黑曲霉 5-溴-2-甲氧基苯甲松弛肽2;松弛2
黑曲霉變種 N-乙基琥珀酰亞UDP葡糖基轉(zhuǎn)移1家族多肽A1
葡枝根霉 2-甲氧羰基-5-苯磺酰登革熱病NS1抗原
玫瑰綠色鏈霉 1,2,3,4-四氫異喹啉-6-金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白13
根瘤 9-癸烯C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白9
熒光假單胞 4,8-雙(5-(2-丁基辛基)噻吩-2-基)苯并[1,2-b:4,5-b']二噻吩抗人類缺陷病抗體
金黃色葡萄球 4-氨基-5-溴嘧啶硫肝糖蛋白
紅酵母屬 3-溴鄰苯二酚纖維蛋白原抗體
雙歧雙歧桿 2-氨基-5-羥基嘧啶N末端B型鈉尿肽
土曲霉 3-溴-4-羥基輔Q10
膜醭畢赤酵母 4-溴-3-羥基酮
球毛殼 6-溴-7-氮雜心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白C
Bacillus tequilensis 油泛交叉反應(yīng)蛋白
大腸桿 三甘單丁可溶性白抗原-E
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
