特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
無乳鏈球菌(StA)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10386 |
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
皺紋假單胞菌生長條件: 30℃培養(yǎng)基: 0002提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
大腸埃希氏菌培養(yǎng)基: 9模式菌株: yes土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法
-459℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
嗜熱地芽孢桿菌培養(yǎng)基: 859模式菌株: no砂土提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 70℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他
喜鹽芽胞桿菌近海細(xì)菌模式菌株: no沉積物/海灘沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃
IFO13645=ATCC31106產(chǎn)L(+)酒石。模式菌株: no種屬: Pseudomonas│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0384生長條件: 30℃
脫甲基菌培養(yǎng)基: 745潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油降解菌群水樣/表層海水提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
短裙竹蓀3-3培養(yǎng)基: 14模式菌株: no毛竹林子實(shí)體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 28 定期移植法
膠凍樣芽胞桿菌生長條件: 37℃培養(yǎng)基: 3提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法;定期移植法
-460℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
球孢白僵菌培養(yǎng)基: 14害蟲生物防治提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28 定期移植法
Idriella lunata培養(yǎng)基: CM0014模式菌株: no植物殘?bào)w提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 26C -80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
ATCC21819產(chǎn)生Fortimicin B福田霉素B模式菌株: no種屬: Micromonospora│olivasterospora提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0394生長條件: 28C
ACCC11001土霉素測定菌模式菌株: no種屬: Kocuria rhizophila提供形式: 凍干粉安全等級: 1培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。生長條件: 30-37℃,好氧,曾用名藤黃八疊球菌
枯草芽孢桿菌生長條件: 35-37℃培養(yǎng)基: CM0003提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法
結(jié)核分枝桿菌生長條件: 37℃研究提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no 真空冷凍干燥法
磺基水楊Sulfosalicylic acidAR100g
P2126-50GL-pxenylalanine L-本丙安63-91-250g44
Z0876-100mgTrans-Zeatin 反玉米素1637-39-4100mg
核蛋白和胞漿蛋白提取試劑盒50T
MOPSO, Free Acid100g
無水乙醇¤etxyl alcoholHPLC500ml
SCT-050-C0.5 ml 螺口尖底凍存管(無色)(帶蓋)160
S0130-100MGStreptozotocin 鏈脲佐菌素18883-66-4100mg
Cytosine5g
γ-Cyclodextrin, Hydrate1g
大鼠胰島素(INS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒 Human cTn-ⅠELISA Kit
谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)測試盒 GR法 50管/48樣
Ratmaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanhemoglobin-advancedglycosylationendproducts,Hb-AGEELISA試劑盒人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlipoproteinα,Lp-αELISAKit人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
無乳鏈球菌(StA)核酸檢測試劑盒美迪衣原體規(guī)格:20人份詳情介紹
美洛西林/舒巴坦藥敏紙片規(guī)格:75/18.75 μg/片,20片/瓶拉丁屬名:Mezlocillin/Sulbactam
YM培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于霉菌和酵母菌的增菌培養(yǎng)
培養(yǎng)基1(USP)規(guī)格:250g用途:用于微生物方法測定抗生素效價(jià)
含225ml GN增菌液均質(zhì)袋規(guī)格:10個(gè)/包用途:用于志賀氏菌前增菌培養(yǎng)
維生素B1(Vb1)規(guī)格:10g詳情介紹