產(chǎn)品介紹:
瑞氏染液主要應(yīng)用于血液和骨髓涂片染色。
操作步驟
1. (選做)平置血涂片于染色架上，滴加甲醇固定液，室溫固定15-30 分鐘。
2. 吸去固定液，室溫通風(fēng)晾干。
3. 將試劑一滴加到載玻片上，均勻覆蓋住載片上血細(xì)胞，染色時(shí)間約為1 分鐘。等染液有變紅的趨勢(shì)時(shí)，迅速滴加兩倍試劑一的量的試劑二。繼續(xù)染色5 到8 分鐘。
4. 小股水流洗片，防止將大量的細(xì)胞從載片上沖落下來(lái)從而影響以后的觀
產(chǎn)品介紹:
瑞氏染液主要應(yīng)用于血液和骨髓涂片染色。 操作步驟 1. (選做)平置血涂片于染色架上，滴加甲醇固定液，室溫固定15-30 分鐘。 2. 吸去固定液，室溫通風(fēng)晾干。 3. 將試劑一滴加到載玻片上，均勻覆蓋住載片上血細(xì)胞，染色時(shí)間約為1 分鐘。等染液有變紅的趨勢(shì)時(shí)，迅速滴加兩倍試劑一的量的試劑二。繼續(xù)染色5 到8 分鐘。 4. 小股水流洗片，防止將大量的細(xì)胞從載片上沖落下來(lái)從而影響以后的觀察。30s 水洗結(jié)束后將載片放到陰涼處風(fēng)干。 5. 顯微鏡鏡檢。 染色結(jié)果 1. 紅細(xì)胞呈淺紅色，中央稍淡而略有蝶形態(tài)。 2. 白細(xì)胞系統(tǒng)清晰易分，細(xì)胞膜清晰呈紫黑色，細(xì)胞核著色呈深淺不同的紫紅色，胞漿中各種顆粒區(qū)分明顯。其中中性粒細(xì)胞漿中顆粒呈淡紫紅色，嗜酸粒細(xì)胞漿中顆粒呈桔紅色、嗜堿性粒細(xì)胞胞漿中顆粒呈藍(lán)褐色。單核細(xì)胞的胞漿呈灰藍(lán)色，胞漿中顆粒呈細(xì)小淡紫紅色或藍(lán)紫色。淋巴細(xì)胞胞漿呈淡藍(lán)色。 注意事項(xiàng) 1. 推片：取全血3 微升左右置載玻片上，將推玻片保持與載玻片30 度角，置于血滴正前方，稍往后移與血滴接觸，即可見(jiàn)血液沿推片下緣散開(kāi)，再勻速沿載玻片平面向前滑動(dòng)，至血液鋪完血膜為止。 2. 涂片時(shí)不要太厚也不要太薄，太厚紅細(xì)胞重疊并易皺，太薄時(shí)不易找到白細(xì)胞。 3. 用蠟筆在血膜兩頭劃線，平放于染色架上。血膜要干透后才能染色，否則染色時(shí)血膜易脫落。 4. 試劑一及二染液不能過(guò)少，以防很快蒸發(fā)引起染液沉淀。試劑一不可少于400 微升，試劑二是試劑一的1 倍量。滴加試劑一及二時(shí)要輕搖玻片或用洗耳球?qū)?zhǔn)血片吹氣，使染液充分混合。 5. 鏡檢時(shí)如果紅細(xì)胞偏藍(lán)，請(qǐng)放在蒸餾水中1-3 分鐘，直至紅潤(rùn)為止。 6. 染色過(guò)淡，可復(fù)染。染色過(guò)深，可用水沖洗或浸泡，還可用75%乙醇脫色3-5 秒。 儲(chǔ)存：2～8℃，避光，有效期12個(gè)月。 |
中文名稱(chēng)：快速瑞氏染液
英文名稱(chēng)：
產(chǎn)品規(guī)格：250ml×3
貨號(hào)：FS-X9791
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
肌侵蛋白(MTPN)英文名：MTPN 磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝5g
肌腱蛋白X(TNX)英文名：TNX 磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝5MG
肌肌激(CKM)英文名：CKM 磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝1g
肌紅蛋白(MYO)英文名：MYO 磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝5g
肌三磷(ITPA)英文名：ITPA βA3/A1-crystallin蛋白抗體包裝25g
肌鈣蛋白T()英文名： γS-crystallin蛋白抗體包裝100g
肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞基4(ARPC4)英文名：ARPC4 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框85抗體包裝25g
饑餓(GHRL)英文名：GHRL 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框87抗體包裝5g
回腸脂肪結(jié)合蛋白(FABP6)英文名：FABP6 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框95抗體包裝25g
黃體激(LH)英文名：LH 補(bǔ)體C1S鏈多肽抗體包裝5g
脫氫(XDH)英文名：XDH 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框106抗體包裝50g
緩激肽(BK)英文名：BK 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框107抗體包裝100g
環(huán)氧化合物解4(EPHX4)英文名：EPHX4 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框117抗體包裝25g
環(huán)加氧2(PTGS2)英文名：PTGS2 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框118抗體包裝100g
環(huán)加氧1(PTGS1)英文名：PTGS1 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框144抗體包裝25g
曲霉Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品整合α2試劑盒乙酰紫草;Acetylshikonin
型副傷寒沙門(mén)菌Salmonella│paratyphi A 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,USP34,BR,可用于培養(yǎng)整合A5試劑盒異丹葉大黃;Isorhapontige
花津浦芽孢桿菌Bacillus│hwajinpoensis 質(zhì)量規(guī)格：>97%,USP34,BR真胰島試劑盒7-乙基;7-Ethylcampt
快速瑞氏染液平菇—875 6-溴-4-羥基-3-喹啉羧乙酯組
異形盤(pán)孢 -2-苯乙酯組蛋白H3
蘇云金芽孢桿 苯甲酯組蛋白H4
葡萄座腔 2-脫氧-2,2-二氟-D-赤式-五呋喃糖-3,5-二苯甲酯-1-甲磺酯組蛋白去乙?；?/span>
新城疫病 磺間甲氧嘧啶組蛋白去乙?；?
孢吸水鏈霉 2,5-吡二羧組蛋白去乙?；?
巴氏醋桿 對(duì)乙酮組蛋白去乙?；?
小豆交鏈孢霉 對(duì)羥基正辛酯組蛋白乙?；?/span>
副豬嗜血桿 2'--4',5'-二氟苯乙酮組織蛋白B
栗疫 2-甲氧基-3-三氟組織蛋白K
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 5-溴-2-苯甲組織蛋白L
芍藥枝孢霉 2-甲氧基-3-三氟甲基-5-溴吡啶組織蛋白S
釀酒酵母 3,5-二氟-4-吡啶甲組織蛋白X
樹(shù)舌靈芝 硫化鋰組織多肽抗原
變異鏈霉 亞乙基脲(2-咪唑酮)組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)相關(guān)基因A
