產(chǎn)品介紹:
革蘭氏染色法的意義就在于鑒別細(xì)菌,把眾多的細(xì)菌分為兩大類,革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌。首先,細(xì)菌經(jīng)初染劑結(jié)晶紫初染成藍(lán)紫色,再加媒染劑與結(jié)晶紫結(jié)合成結(jié)晶紫-碘的復(fù)合物,從而增強(qiáng)了染料與細(xì)菌的結(jié)合力。 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌(G+)的細(xì)胞壁主要由肽聚糖形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)組成,壁厚,類脂含量低,用脫色劑脫色時(shí)細(xì)胞壁脫水,使肽聚糖層的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)孔徑縮小,透性降低,從而使結(jié)晶紫-碘的復(fù)合物不易被洗脫而保留在細(xì)胞內(nèi),經(jīng)脫色和復(fù)染后仍保留初染劑的藍(lán)紫色。而革蘭氏陰性菌(G-)細(xì)胞壁類脂含量較多,肽聚糖層較薄且肽聚糖為平面片層結(jié)構(gòu),易被脫色劑溶解,使細(xì)胞壁通透性增高,結(jié)合的染料復(fù)合物容易泄漏,細(xì)菌被脫色為無(wú)色,再經(jīng)復(fù)染液復(fù)染為紅色。 1. 將涂片在火焰上固定,滴加R1 初染劑染1 分鐘,水洗。 2. 滴加R2 媒染劑作用1 分鐘后水洗。 3. 滴加R3 脫色劑,此時(shí)應(yīng)將玻片不時(shí)搖動(dòng),直至無(wú)紫色脫落為止,染30 秒鐘,水洗,水流不可太大。 4. 滴加R4 復(fù)染液染色30 秒,水洗,待干,鏡檢。 染色結(jié)果:革蘭氏陽(yáng)性菌為紫色,革蘭氏陰性菌為紅色。 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
100T | FS-X9782 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
墨蝶呤還原(SPR)英文名:SPR 癌胚抗原單克抗體(包被)包裝1g
末端補(bǔ)體復(fù)合體C5b-9(C5b-9)英文名:C5b-9 癌胚抗原單克抗體(檢測(cè))包裝5g
膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(FPN)英文名:FPN 癌基因c-Raf抗體包裝1g
膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)英文名:ANXA5 Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體包裝5g
膜聯(lián)蛋白A2(ANXA2)英文名:ANXA2 黑色瘤相關(guān)抗原抗體包裝1g
膜聯(lián)蛋白A1(ANXA1)英文名:ANXA1 CD33抗體包裝25g
免疫球蛋白樣EGF樣域酪激1(Tie1)英文名:Tie1 睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α抗體包裝5g
免疫球蛋白G3(IgG3)英文名:IgG3 CD7抗體包裝100g
免疫球蛋白G2α(IgG2α)英文名:IgG2α 尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2抗體包裝1g
密封蛋白(OCLN)英文名:OCLN CD68抗體包裝25g
錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1)英文名:ANKRD1 緊密連接蛋白1抗體包裝5g
絡(luò)絲蛋白(RL)英文名:RL 膜輔蛋白抗體包裝25g
卵泡抑樣蛋白3(FSTL3)英文名:FSTL3 CXC趨化因子16抗體包裝5g
膽固脂酰轉(zhuǎn)移(LCAT)英文名:LCAT 色c氧化IV亞型1抗體包裝1g
卵白蛋白(OVA)英文名:OVA 1號(hào)染色體開放閱讀框227抗體包裝250mg
葡萄汁有孢漢遜酵母Hanseniaspora│uvarum 質(zhì)量規(guī)格:含量> 99%中性粒趨化蛋白2試劑盒棕櫚乙酯;Palmitic acid
梨形卷枝霉Helicostylum│piriforme 質(zhì)量規(guī)格:>99%,光學(xué)純度>98%,標(biāo)準(zhǔn)品中性粒顆??贵w試劑盒紫蘇;l-Perillaldehyde
ATCC19262=CECT579=CIP104721=CIP63.28=IAM資源名稱: 大西洋假交替單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:> 99%,(Src/Abl)酪激雙重抑制劑中性??贵w試劑盒紫蘇葶;Perillartine
革蘭氏染液匍枝根霉原變種 2-硝基-4,5-二氟甲苯抑制性IgG受體
白僵 4-苯磺酰2,3-雙加氧
香菇—五香1號(hào) 4-(甲磺?;?芐鹽鹽2,3-雙加氧1
釀酒酵母 4-苯砜隱熱蛋白
猴假單胞 4-叔丁基環(huán)已酮印度猬因子
奇異球 4-叔丁基環(huán)己(順反混合)應(yīng)答元件結(jié)合蛋白1
盤孢 5-(2-呋喃)異惡唑-3-甲硬骨
釀酒酵母 鄰氨基苯甲-4-磺游離β絨毛膜促性腺
鍺栓孔 2-氨苯-5-磺游離膽固
芽胞桿 5-(2-溴乙基)-2,3-二氫苯并呋喃游離蛋白S
中國(guó)臺(tái)灣根霉 苯甲?;F游離睪酮
蘋果落葉交鏈孢霉 2-氨基-4-磺?;坞x甲狀腺
假單胞屬 N,N-二甲基二茂鐵游離前列腺特異性抗原
硬結(jié)節(jié)桿 乙烯基二茂鐵游離狀腺原
根瘤 3,4-二代苯磺酰游離血紅蛋白