中文名稱:幽門螺旋桿菌染色液(MGG法)
英文名稱:
產品規(guī)格:2×100ml
貨號:FS-X10129
產品介紹:
用途: 幽門螺桿桿菌/HP染色 注意事項: 幽門螺桿桿菌呈藍色,紅細胞呈綠色,膠原纖維呈紅色,細胞核呈深藍色。May-Grunwald液和Giemsa液分別與磷酸鹽緩沖液等量混合后使用。 儲存條件:室溫,24個月 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
北成對桿菌轉錄因子ETV7抗體Human FGGY (FGGY carbohydrate kinase domain-containing protein) 犬基質金屬蛋白13(MMP-13)免疫試劑盒
小立碗蘚類芽孢桿菌ELAVL1抗體Human FBLL1 (rRNA/tRNA 2′-O-methyltransferase fibrillarin-like protein 1) 犬基質金屬蛋白1(MMP-1)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌胚胎干相關轉錄因子1抗體Human FIZ1 (Flt3-interacting zinc finger protein 1) 犬肌激同工MB(CK-MB)免疫試劑盒
間座殼表皮生長因子受體III型突變體抗體Human FAP (Prolyl endopeptidase FAP) 犬肌紅蛋白(MYO/MB)免疫試劑盒
墨西哥劍菌紅膜蛋白條帶EPB41L5抗體Human FLYWCH2 (FLYWCH family member 2) 犬肌酐(Cr)免疫試劑盒
禾粘座孢霉(或禾漆斑菌)早期發(fā)育調控蛋白1抗體Human FLYWCH1 (FLYWCH-type zinc finger-containing protein 1) 犬黃體生成(LH)免疫試劑盒
絨囊耙齒菌轉錄因子ETV6抗體Human MCP/CD46(Membrane Cofactor Protein) 犬環(huán)磷腺(cAMP)免疫試劑盒
膠凍樣芽胞桿菌跨膜通道蛋白8抗體Human PSEN2(Presenilin-2) 犬環(huán)磷鳥(cGMP)免疫試劑盒
雜色曲霉尤文氏肉瘤相關EWS蛋白抗體Human FKRP (Fukutin-related protein) 犬環(huán)加氧2(COX-2)免疫試劑盒
桔橙小單孢菌核外切1抗體Human FUS(RNA-binding protein FUS) 犬紅生成(EPO)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌多發(fā)性肌炎/硬皮病自身抗原2抗體Human FUNDC1 (FUN14 domain-containing protein 1) 犬胱天蛋白12(Casp-12)免疫試劑盒
棕黑腐質霉核糖體RNA合成蛋白40抗體Human FNBP1L (Formin-binding protein 1-like) 犬骨形成蛋白-1(BMP-1)免疫試劑盒
墳墓節(jié)桿菌核糖體RNA合成蛋白42抗體Human FNBP4 (Formin-binding protein 4) 犬骨橋(OPN)免疫試劑盒
雞白痢沙門氏菌多發(fā)性外生骨疣樣蛋白3抗體Human FGF22 (Fibroblast growth factor 22) 犬骨堿性磷(BALP)免疫試劑盒
布雷鏈格孢轉錄因子EYA1抗體Human FHOD1 (FH1/FH2 domain-containing protein 1) 犬骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒
pBIFC-VC155磷化埃茲蛋白抗體Human FYB (FYN-binding protein) 犬骨成型蛋白7(BMP7)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質量規(guī)格:分析標準品L-羥脯
結核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質量規(guī)格:分析標準品L-精
刺盤孢屬Colletotrichum│sp. 質量規(guī)格:分析標準品,≥99.7%(GC加蘭他敏
幽門螺旋桿菌染色液(MGG法)扣囊復膜孢酵母 二甲基膦乙芐酯1-3-β-D葡聚糖
宇佐美曲霉 2-溴-5-苯α酮戊二
黑曲霉 4--3-苯脂肪
枯草芽胞桿 4-(正丁氧基)苯乙酮維生D結合蛋白
盔狀畢赤酵母 4-氧基苯甲脫氧核糖核Ⅱ
大腸埃希 5-溴-3-硝基-2-基吡啶乙酰
嗜冷生孢八疊球 1-芐基-3-羥甲基吡咯烷紫紅色壞死病PV-1
發(fā)根土壤桿(發(fā)根植物單胞)(現(xiàn)1) 環(huán)甲脒鹽鹽二酰甘油酰基轉移
灰毛青霉 N-Boc-γ-氨基丁2,3-β葡聚糖
褐黃木耳(琥珀木耳) Boc-D-4-苯T2
Paenibacillus thailandensis 3--2-吡啶甲核糖核
柄籃狀 2,3-二花色3-O-葡萄糖基轉移
巨大芽孢桿 四羥鋁鋯糖基轉移
解淀粉芽孢桿 2-(乙氧基亞甲基)-4,4,4-三氟-3-氧代丁乙酯花色?;D移
雞油 鹽萘爾甲基轉移